一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法，包括植物基本培养基、LB培养基、Hurek液体培养基和甘蔗组培苗，通过取样、清洗、脱毒、甘蔗组培苗的继代培养、甘蔗组培苗移栽、甘蔗盆栽苗的移栽及开放培养、甘蔗苗接种固氮菌和对甘蔗盆栽苗进行测量。本发明专利技术通过在无菌状态下对甘蔗组培苗进行脱毒处理，从根本上解决了甘蔗种苗受到传播病源的反复浸染的难题，解决了之前甘蔗组培苗只能用于新品种扩繁，而不能直接应用于生产的技术难题，大幅提升整个蔗糖业的经济效益，本发明专利技术通过将固氮菌引入甘蔗组培苗，在无菌操作的条件下切取甘蔗的茎尖，并依次进行愈伤组织诱导、诱导生根及壮苗培养，具有较强的推广与应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法
本专利技术涉及植物组培
，特别涉及一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法。
技术介绍
甘蔗作为重要的经济作物和能源作物,是我国制糖的主要原料，每年蔗糖产量占食糖产量的85％。在甘蔗种植区，甘蔗的产量直接影响当地的经济发展，是农民收入的主要来源,随着化石能源日益枯竭，利用蔗糖或甘蔗渣来发酵乙醇作为生物燃料，具有广泛的发展空间。甘蔗作为C4植物，其生物产量高[，但在实际种植中化肥投入和其本身病害成为实现甘蔗高产、高糖的桎梏。甘蔗的繁殖方式是无性繁殖，传统种植一般是直接种植蔗苗，蔗苗取自蔗茎或梢尾，也有利用宿根繁殖。和其他所有无性繁殖作物一样，长期的无性繁殖会使甘蔗积累大量的病毒，导致品种退化。利用植物幼嫩茎尖进行组织培养是解决病毒积累的有效方法，以这种方法获得健康的甘蔗苗在投入生产后可提高甘蔗产量20％-40％。甘蔗的组培苗抗逆能力较弱，必须先进行继代培养，待其植株较为强壮后植入盆中进行开放培养，才能移植到大田。在甘蔗生产中，化肥尤其是氮肥的投入对甘蔗产量有很大影响，如果是连续种植，氮肥的使用量将随着其利用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法，包括植物基本培养基:MS培养基+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+10g/L胰蛋白脉+5g/L酵母提取物，pH＝5.8；/nLB培养基:NaCl 10g、酵母粉5g、蛋白脉10g，定容至1000ml，pH＝7.0；/nHurek液体培养基:KHPO41.0g、KHPO41.5g、Fe 10ml、KCl 0.15g、CaCly·2H·O 0.4g、MgSO47H O0.4g、微量元素1ml、味精0.43g、苹果酸0.2g，定容至1000ml，pH＝6.4，其特征在于，所述具体包括如下步骤：/na.取样：选择无病害、无虫害的优良甘蔗组培苗；/nb.清洗：以流动的清...

【技术特征摘要】
1.一种将固氮菌引入甘蔗组培苗的方法，包括植物基本培养基:MS培养基+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+10g/L胰蛋白脉+5g/L酵母提取物，pH＝5.8；
LB培养基:NaCl10g、酵母粉5g、蛋白脉10g，定容至1000ml，pH＝7.0；
Hurek液体培养基:KHPO41.0g、KHPO41.5g、Fe10ml、KCl0.15g、CaCly·2H·O0.4g、MgSO47HO0.4g、微量元素1ml、味精0.43g、苹果酸0.2g，定容至1000ml，pH＝6.4，其特征在于，所述具体包括如下步骤：
a.取样：选择无病害、无虫害的优良甘蔗组培苗；
b.清洗：以流动的清水对甘蔗组培苗进行漂洗；
c.脱毒：温水脱毒或空气高温脱毒，温水脱毒是将甘蔗组培苗置于48～50℃的温水中浸泡0.6～2h；空气高温脱毒是将甘蔗组培苗置于46℃的热空气中至少4周；
d.甘蔗组培苗的继代培养：将脱毒后的甘蔗组培苗分株后，用镊子将其移入植物基本培养基中培养，3周后进行第二次继代培养，观察其生长情况，组培苗培养条件为:25℃-30℃，光照16-17h；
e.甘蔗组培苗移栽：将经过二次继代培养后的组培苗移栽到纸盆中，外面用保鲜膜覆盖，保持足够湿度，隔天浇水，培养条件:25℃-30℃，光照16-17h；
f.甘蔗盆栽苗的移栽及开放...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长宁，农倩，林丽，谢金兰，莫璋红，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院，
类型：发明
国别省市：广西;45