一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，主要步骤包括：1)以苦参碱、槐定碱对照品，采用薄层色谱法对该复方制剂中苦参进行定性鉴别；2)以白头翁皂苷B4为对照品，采用薄层色谱法对该复方制剂中白头翁进行定性鉴别；3)采用高效液相色谱法对该中药复方制剂中苦参碱和氧化苦参碱两个活性成分(或指标成分)进行含量测定。本发明专利技术能很好的控制这种中药复方制的质量，监控产品生产工艺的稳定性，保证其质量的稳定、均一、可控。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法
本专利技术属于药物分析
，涉及一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法。
技术介绍
仔猪腹泻是严重的仔猪疾病，是引起仔猪死亡的重要原因。由腹泻引起的仔猪死亡数占仔猪死亡总数的39.8％，主要表现为水样腹泻，可引起仔猪死亡，耐过存活仔猪生长缓慢、发育停滞、饲料报酬降低，给养殖场(户)造成巨大的经济损失，严重威胁养猪业健康发展。本复方制剂主要用于治疗仔猪腹泻，其药味多、成分复杂，产品质量较难控制，而对本复方制剂的质量控制方法，现有文献未见报道。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，能够有效的控制产品的质量，满足生产的要求、保证生产的药物安全、可靠和疗效准确，建立该中药复方制剂的质量标准，从而指导该兽用药品生产。为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：本专利技术公开了一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，该治疗仔猪腹泻的中药复方制剂由苦参、白头翁、石榴皮、仙鹤草、肉桂和木香制成包括如下操作：以苦参碱和槐定碱为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的苦参进行定性鉴别；以白头翁皂苷B4为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的白头翁进行定性鉴别；以及：采用高效液相色谱法对该中药复方制剂中的苦参碱和氧化苦参碱两个活性成分进行含量测定。进一步地，所述苦参、白头翁、石榴皮、仙鹤草、肉桂和木香的质量比为(2.81-3.23)：(2.89-3.02)：(2.92-3.08)：(1.91-2.03)：(1.95-2.13)：(0.98-1.04)优选地，采用薄层色谱法对苦参进行定性鉴别，具体步骤如下：1)制备供试品溶液取治疗仔猪腹泻的中药复方制剂4g，加入20mL热水使其溶化，静置至室温，然后离心，取上清液，加入浓氨试液1mL，采用三氯甲烷提取2次，每次25mL，合并三氯甲烷提取液，蒸干得到残渣，加入1mL三氯甲烷溶解残渣，获得供试品溶液；2)制备对照品溶液分别取对照品苦参碱和槐定碱，分别加乙醇制成1mL含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；3)选择固定相，点样，然后置于展开系统中进行展开，观察结果；其中，固定相选择硅胶G板，展开剂是将甲苯：丙酮：甲醇按8：3：0.5的体积比配制而成的混合液；点样量为5μl，展开距离为8～10cm；展开系统为氨蒸气饱和系统，待展开后取出、晾干、喷以碘化铋日光下显色、检视；结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。优选地，采用薄层色谱法对白头翁进行定性鉴别，具体步骤如下：1)制备供试品溶液取本品10g，置锥形瓶中，加热水30ml使溶化，放至室温，离心，取上清液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液振摇提取2次，每次30ml，弃去氨试液，正丁醇液再用水振摇提取2次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，加中性氧化铝(100～200目，3g)拌匀，用40％甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；2)制备对照品溶液取白头翁皂苷B4对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；3)选择固定相，点样，然后置于展开系统中进行展开，观察结果；其中，固定相选择硅胶G板，展开剂是将正丁醇：醋酸：水按4：1：1的体积比配制而成混合液的上层液，展开剂；对照品溶液、供试品溶液及阴性样品液各5μL，展开距离为14cm；展开系统为取出，晾干，10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视，结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱Rf值0.4的位置上有相同颜色的斑点。优选地，所述热水温度为70～80℃。优选地，采用高效液相色谱法对苦参碱和氧化苦参碱进行含量测定，具体步骤如下：1)制备供试品溶液按计量配比，取治疗仔猪腹泻的中药复方制剂中6味药材，混匀，研细，取2g，置于25mL容量瓶中，加入浓氨试液1mL湿润，然后加入10mL甲醇振摇使其分散，再加入10mL三氯甲烷超声处理30min，冷却，加入甲醇定容至25mL，然后摇匀、过滤，取滤液，制得供试品溶液；2)制备对照品溶液精密称取对照品苦参碱和氧化苦参碱，分别加入甲醇溶解，再用流动相分别稀释制得每1mL含有0.04mg苦参碱的苦参碱对照品溶液，以及每1mL含有0.17mg氧化苦参碱的氧化苦参碱对照品溶液；3)分别吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，进行测定；其中，液相色谱条件如下：色谱柱选择以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱；梯度洗脱流动相为磷酸二氢钾缓冲液：甲醇：乙腈＝96:2:2的混合液；检测波长为220nm；流速为1.0ml/min；上样量为10μl理论塔板数为：以氧化苦参碱计应不低于2000。优选地，磷酸二氢钾缓冲液的配制方法如下：取磷酸二氢钾2.72g，加水1000ml使溶解，加三乙胺1ml，用磷酸调节pH值至3.5。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术公开的治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，由于该中药复方制剂中苦参、白头翁作为君药，因此该方法对其进行质量控制时，首先以苦参、白头翁薄层鉴别作为质量标准，其次选取苦参中的苦参碱和氧化苦参碱的含量多少来判定质量，能够对其物质群整体予以控制，从整体上有效的表征其质量。通过本专利技术的质量控制方法能够很好地控制这种中药复方制剂的质量，使产品生产工艺稳定，保证其质量的稳定、均一、可控。此外，该质量控制方法还具有简便性、专属性、可操作性强、重复性好等优点，方法中设置的检测项目科学、建立的检测方法可靠、规定断标准合理，充分地反映了该产品质量控制的关键点，既保证了产品质量，又提高了产品生产质量的可控性。附图说明图1为《中国兽药典》收录的苦参薄层色谱结果照片；图2为本专利技术优化的质量控制方法的苦参薄层色谱结果照片；图3为《中国兽药典》收录的白头翁薄层结果照片；图4为本专利技术优化的质量控制方法的白头翁薄层色谱结果照片；图5为《中国兽药典》公布的苦参碱和氧化苦参碱的液相色谱图谱；图6为本专利技术优化的质量控制方法的苦参碱和氧化苦参碱的液相色谱图谱。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本专利技术方案，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。需要说明的是，本专利技术的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，该治疗仔猪腹泻的中药复方制剂由苦参、白头翁、石榴皮、仙鹤草、肉桂和木香制成，其特征在于，包括如下操作：/n以苦参碱和槐定碱为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的苦参进行定性鉴别；/n以白头翁皂苷B4为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的白头翁进行定性鉴别；以及：/n采用高效液相色谱法对该中药复方制剂中的苦参碱和氧化苦参碱两个活性成分进行含量测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，该治疗仔猪腹泻的中药复方制剂由苦参、白头翁、石榴皮、仙鹤草、肉桂和木香制成，其特征在于，包括如下操作：
以苦参碱和槐定碱为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的苦参进行定性鉴别；
以白头翁皂苷B4为对照品，采用薄层色谱法对该中药复方制剂中的白头翁进行定性鉴别；以及：
采用高效液相色谱法对该中药复方制剂中的苦参碱和氧化苦参碱两个活性成分进行含量测定。


2.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于，采用薄层色谱法对苦参进行定性鉴别，具体步骤如下：
1)制备供试品溶液
取治疗仔猪腹泻的中药复方制剂4g，加入20mL热水使其溶化，静置至室温，然后离心，取上清液，加入浓氨试液1mL，采用三氯甲烷提取2次，每次25mL，合并三氯甲烷提取液，蒸干得到残渣，加入1mL三氯甲烷溶解残渣，获得供试品溶液；
2)制备对照品溶液
分别取对照品苦参碱和槐定碱，分别加乙醇制成1mL含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
3)选择固定相，点样，然后置于展开系统中进行展开，观察结果；
其中，固定相选择硅胶G板，展开剂是将甲苯：丙酮：甲醇按8：3：0.5的体积比配制而成的混合液；点样量为5μl，展开距离为8～10cm；
展开系统为氨蒸气饱和系统，待展开后取出、晾干、喷以碘化铋日光下显色、检视；结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。


3.根据权利要求1所述的治疗仔猪腹泻的中药复方制剂的质量控制方法，其特征在于，采用薄层色谱法对白头翁进行定性鉴别，具体步骤如下：
1)制备供试品溶液
取治疗仔猪腹泻的中药复方制剂10g，置锥形瓶中，加热水30ml使其溶化，放至室温，离心，取上清液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液振摇提取2次，每次30ml，弃去氨试液，正丁醇液再用水振摇提取2次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，加3g中性氧化铝拌匀，用40％甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨彦平，高雷，赵彤，刘春蓉，杨欣媛，陈贝贝，
申请(专利权)人：西安雨田农业科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61