一种制备单克隆抗体快速免疫的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，属于诊断技术领域，包括以下步骤：S1、在养殖的动物中，取不低于7周龄的动物进行分笼，S2、以4%水合氯醛按0.1ml/10g的量，对动物进行麻醉，S3、用1ml一次性无菌注射器抽取稀释好的抗原溶液,S4、在洁净环境中把麻醉的动物固定在手术台上，暴露腹部，除去腹部的毛发,S5、用手术弯剪剪开腹部外表皮，拨开脂肪组织，再用镊子轻轻拉出脾脏，将抗原注射入脾脏内,S6、用缝合针缝合伤口,S7、每间隔3‑14天进行第二和第三次免疫，第三次免疫后2‑5天采血进行验证致敏的B淋巴细胞分泌抗体的情况;本发明专利技术设计合理实用，抗原使用量低，降低成本，可以提高抗体效价，在一定程度上消除假阳性。免疫操作简单，无需担心出现免疫到皮下而导致免疫不成功的情况。

【技术实现步骤摘要】
一种制备单克隆抗体快速免疫的方法
本专利技术涉及IVD诊断
，具体为一种制备单克隆抗体快速免疫的方法。
技术介绍
现阶段杂交瘤单克隆抗体的制备主要为在细胞融合技术基础上将分泌特异性抗体的B淋巴细胞与具有无限增殖能力的骨髓里细胞融合，形成针对一种抗原表位的特异性抗体，而这过程均需要进行免疫，目前常用的免疫方法有腹腔注射，肌肉注射及皮下注射，这三者的免疫常为间隔14天重复3-4次免疫，免疫达到融合条件预计需要49-63天，免疫周期较长，且需加佐剂乳化，操作繁琐耗时；该方法存在一定缺陷，如：1，抗原注射后未能完全刺激脾脏就被分解掉一部分，影响抗体效价；2，现有技术在乳化过程无论是使用手动推还是超声乳化均存在在操作过程发热过高导致抗原变性。为此，急需一种制备单克隆抗体快速免疫的方法来解决这些问题。
技术实现思路
本专利技术提供的专利技术目的在于提供一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，能缩短免疫周期，刺激产生特异性抗体的B淋巴细胞效果更好。为了实现上述效果，本专利技术提供如下技术方案：一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，包括以下步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、在养殖的动物中，取不低于7周龄的动物，分区域饲养；/nS2、对动物进行麻醉，可使用但不限于4%水合氯醛按0.1ml/10g的量；/nS3、用1ml一次性无菌注射器抽取稀释好的抗原溶液；/nS4、在洁净环境中把麻醉的动物固定在手术台上，暴露腹部，除去腹部的毛发；/nS5、用手术弯剪剪开腹部外表皮，拨开脂肪组织，再用镊子轻轻拉出脾脏，将抗原注射入脾脏内；/nS6、用缝合针缝合伤口；/nS7、每间隔3-14天进行第二和第三次免疫，第三次免疫后2-5天采血进行验证致敏的B淋巴细胞分泌抗体的情况。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、在养殖的动物中，取不低于7周龄的动物，分区域饲养；
S2、对动物进行麻醉，可使用但不限于4%水合氯醛按0.1ml/10g的量；
S3、用1ml一次性无菌注射器抽取稀释好的抗原溶液；
S4、在洁净环境中把麻醉的动物固定在手术台上，暴露腹部，除去腹部的毛发；
S5、用手术弯剪剪开腹部外表皮，拨开脂肪组织，再用镊子轻轻拉出脾脏，将抗原注射入脾脏内；
S6、用缝合针缝合伤口；
S7、每间隔3-14天进行第二和第三次免疫，第三次免疫后2-5天采血进行验证致敏的B淋巴细胞分泌抗体的情况。


2.根据权利要求1所述的一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，其特征在于，根据S1中的操作步骤，在对动物进行脾免前2-5天，进行分区饲养。


3.根据权利要求1所述的一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，其特征在于，根据S2中的操作步骤，在进行脾免前不少于10分钟前，对动物进行麻醉。


4.根据权利要求1所述的一种制备单克隆抗体快速免疫的方法，其特征在于，根据S3中的操作步骤，所述抗原溶液为生理盐水稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢贞华，李博，
申请(专利权)人：巴德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44