一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法技术

本发明专利技术属于蛋白质提取领域，具体公开了一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，调节去冷胶血浆的pH值为6.3～7.0，调节去冷胶血浆的电导率为9～12mS/cm，进行阴离子交换层析，得到第一次流穿液和吸附有IgM蛋白的阴离子凝胶填料；调节第一次流穿液的pH值为5.4～5.6，调节第一次流穿液的电导率为2.0～4.0mS/cm，进行阳离子交换层析，得到第二次流穿液和吸附有IgG蛋白的阳离子凝胶填料。采用本发明专利技术的方案，可以解决分离出IgM和IgG的效率较低的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法
本专利技术属于蛋白质提取领域，具体涉及了一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法。
技术介绍
免疫球蛋白是浆细胞在各种生理和病理条件下受抗原刺激而产生的糖蛋白分子，通常由两条重链和两条轻链形成的一个Y型结构，免疫球蛋白可分为IgM、IgG、IgD、IgA、IgE五类，其中IgG在血浆中的含量为7～16g/L，占免疫球蛋白总量75％～80％；IgM在抗体介导的体液免疫反应中表现出极强的抗原中和及免疫调节作用等，是机体抗感染和免疫刺激后首先产生的抗体。自2019年12月以来爆发的新型冠状病毒肺炎，国家卫生健康委发布的诊疗方案中提及诊断标准中在原有核酸检测和测序基础上增加血清检测为依据，即新型冠状病毒特异性IgM和IgG抗体的检测。而新型冠状肺炎的后续治疗也表明：特异性抗体、特异性免疫球蛋白及基础的非特异性免疫球蛋白对于新型冠状病毒的治疗各有效果。研究表明特异性抗体输入人体能起中和并清除新型冠状病毒的目的，而免疫球蛋白(IgM和IgG)则在于抑制细胞因子风暴，在临床上取得了可喜的效果。那么本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，其特征在于：调节去冷胶血浆的pH值为6.3～7.0，调节去冷胶血浆的电导率为9～12mS/cm，进行阴离子交换层析，得到第一次流穿液和吸附有IgM蛋白的阴离子凝胶填料；/n调节第一次流穿液的pH值为5.4～5.6，调节第一次流穿液的电导率为2.0～4.0mS/cm，进行阳离子交换层析，得到第二次流穿液和吸附有IgG蛋白的阳离子凝胶填料。/n

【技术特征摘要】
1.一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，其特征在于：调节去冷胶血浆的pH值为6.3～7.0，调节去冷胶血浆的电导率为9～12mS/cm，进行阴离子交换层析，得到第一次流穿液和吸附有IgM蛋白的阴离子凝胶填料；
调节第一次流穿液的pH值为5.4～5.6，调节第一次流穿液的电导率为2.0～4.0mS/cm，进行阳离子交换层析，得到第二次流穿液和吸附有IgG蛋白的阳离子凝胶填料。


2.根据权利要求1所述的一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，其特征在于：所述去冷胶血浆的制备方式：冷冻血浆融化后，在0-3℃的温度环境下连续离心，去除冷胶，得到的上清液即为去冷胶血浆。


3.根据权利要求1所述的一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，其特征在于：调节去冷胶血浆pH为6.5、电导率为10mS/cm；调节第一次流穿液pH为5.5、电导率3.0-4.0mS/cm。


4.根据权利要求1所述的一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的方法，其特征在于：所述阴离子交换层析时，用含磷酸盐的平衡缓冲液平衡阴离子凝胶填料，平衡缓冲液的pH、电导率均和去冷胶血浆的一致。


5.根据权利要求1所述的一种从血浆中提取并分离IgM和IgG的...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖岚，刘余江，张海梦，任虹，滕世超，张宝献，
申请(专利权)人：华兰生物工程重庆有限公司，华兰基因工程有限公司，华兰生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50