环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用，属于生物技术领域。本发明专利技术应用ADPKD模型证明，羟丙基‑β‑环糊精清除多囊肾囊肿组织细胞膜表面的小窝结构后，使小窝蛋白‑1(CAV1)表达降低，进而达到治疗和/或预防基因突变引起的常染色体显性多囊肾病的目的。

【技术实现步骤摘要】
环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用
本专利技术属于生物
，尤其涉及环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。
技术介绍
多囊肾病最主要为常染色体显性多囊肾病，常染色体显性多囊肾病(ADPKD)是最常见的单基因遗传性肾脏病，主要由pkd1(约占78％)或pkd2(约占15％)基因突变引起，在全球发病率约1/2500～1/1000。ADPKD是一种系统性疾病，临床表现主要为肾脏囊肿不可控地增长最终引起肾脏功能的丧失导致终末期肾脏病，同时在肾外还表现为肝囊肿、胰腺囊肿、高血压及颅内血管瘤等。据统计，在常见的导致需肾脏替代治疗的肾脏疾病中，ADPKD排第4位。目前，对于ADPKD仍缺乏有效的治疗技术，已上市的托伐普坦主要针对的是肾脏的AVP受体靶点，但其引起多尿、脱水及价格昂贵等因素限制其使用。胞膜窖(caveolae)，即小窝，是细胞膜表面存在的小囊泡是一类富含鞘磷脂和胆固醇的脂筏。小窝蛋白-1(CAV1)是小窝的一种主要组成蛋白，其分子质量为21～24kD，长178AA，编码基因定位于7q31.1，处于D7S522与D7S2460位点之间，其参与小窝的形成、介导膜泡运输、维持细胞胆固醇稳态。目前，对小窝蛋白-1的研究表明小窝蛋白-1与肿瘤发生、发展和转移有关，并且表明其与细胞的增殖、分子信号转导有关。环糊精能有效地增加一些水溶性不良的药物在水中的溶解度和溶解速度，如前列腺素-CD包合物能增加主药的溶解度从而制成注射剂；还能提高药物(如肠康颗粒挥发油)的稳定性和生物利用度；减少药物(如穿心莲)的不良气味或苦味；降低药物(如双氯芬酸钠)的刺激和毒副作用；以及使药物(如盐酸小檗碱)缓释和改善剂型。目前并未发现环糊精在治疗多囊肾病方面的研究。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用，所述环糊精包括羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)，该羟丙基-β-环糊精可显著抑制多囊肾组织细胞膜表面小窝蛋白-1的表达，达到治疗和/或预防基因突变引起的ADPKD的目的。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。优选的，所述多囊肾病包括：常染色体显性遗传性多囊肾病、常染色体隐性遗传性多囊肾病。本专利技术提供了环糊精在制备治疗和/或预防pkd1基因或pkd2基因引发的常染色体显性多囊肾病药物中的应用。优选的，所述环糊精为α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或上述三种的衍生物。本专利技术提供了一种治疗和/或预防多囊肾病的药物，含有有效剂量的环糊精及其药学上可接受的载体。本专利技术提供了抑制组织细胞膜表面小窝蛋白-1表达的试剂在治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。优选的，所述抑制组织细胞膜表面小窝蛋白-1表达的试剂包括：特异性干扰小窝蛋白-1表达的抑制剂、拮抗剂、阻断剂。优选的，所述特异性干扰小窝蛋白-1表达的抑制剂包括：环糊精、与环糊精具有相似或相同活性功能的化合物。本专利技术提供了一种治疗和/或预防多囊肾病的药物，含有有效剂量的抑制组织细胞膜表面小窝蛋白-1表达的试剂及其药学上可接受的载体。优选的，所述有效剂量为0.4～10mg/g。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供的环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用，所述环糊精包括羟丙基-β-环糊精，该羟丙基-β-环糊精可显著抑制多囊肾组织细胞膜表面小窝蛋白-1的表达，达到治疗和/或预防基因突变引起的ADPKD的目的。本专利技术通过羟丙基-β-环糊精缓解小鼠pkd1基因敲除引起的多囊肾表型的研究结果表明，羟丙基-β-环糊精组的早期诱导模型和晚期诱导模型的多囊肾小鼠肾脏大小较对照组明显减小，肾脏/体重比、囊肿指数、肾功能均有明显改善。本专利技术通过免疫组化和Westernblot的方法分析小窝蛋白-1(CAV1)在人癌旁肾组织、人多囊肾组织中的表达，结果表明CAV1在人多囊肾组织中显著增加，可知CAV1的表达与多囊肾病有一定的关系。本专利技术通过免疫组化、免疫荧光、电镜方法分析早期诱导pkd1条件敲除小鼠的肾组织CAV1的表达，结果表明予以羟丙基-β-环糊精处理的早期诱导敲除pkd1小鼠肾组织中CAV1表达显著降低。附图说明图1羟丙基-β-环糊精对早期诱导敲除pkd1小鼠大体肾脏和肾组织切片全面扫描结果。图2羟丙基-β-环糊精对晚期诱导敲除pkd1小鼠大体肾脏结果。图3免疫组化分析人癌旁肾组织和人多囊肾组织中CAV1表达情况。图4Westernblot分析人癌旁肾组织和人多囊肾组织中CAV1表达情况。图5免疫组化和免疫荧光分析敲除pkd1小鼠模型中CAV1的表达情况。图6电镜观察早期诱导敲除pkd1小鼠上皮细胞内小窝结构情况。图7免疫荧光分析羟丙基-β-环糊精对早期诱导敲除pkd1小鼠肾组织CAV1表达情况。具体实施方式本专利技术提供了环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。在本专利技术中，所述环糊精包括α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或上述三种的衍生物；所述环糊精的衍生物还包括葡萄糖-β-环糊精、甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺基烷基醚β-环糊精、羟丙基-α-环糊精等。所述环糊精优选为羟丙基-β-环糊精。本专利技术对所述环糊精的来源没有特殊限定，可以通过从自然界生物体中分离、化学合成，也可通过市售获得的。在本专利技术中，所述多囊肾病优选为常染色体显性遗传性多囊肾病、常染色体隐性遗传性多囊肾病，更优选为常染色体显性遗传性多囊肾病。本专利技术提供了环糊精在制备治疗和/或预防pkd1基因或pkd2基因引发的常染色体显性多囊肾病药物中的应用。在本专利技术中，所述的环糊精与上述应用中环糊精完全一致，在此不做赘述。所述pkd1基因位于人类第16染色体短臂1区3带(16p13)编码序列有12912bp，含46个外显子，蛋白质产物是由4302个氨基酸残基构成的糖蛋白，称为多囊蛋白1。所述pkd1基因表达的多囊蛋白1在ADPKD的发生发展中起着重要的作用，主要表现为：突变的多囊蛋白1参与多条信号转导途径异常，扰乱调节增生/凋亡的信号，使囊肿上皮细胞不断增生；突变的多囊蛋白1在细胞表面缺失，细胞间黏附断裂，导致肾小管极性改变；突变的多囊蛋白1促进肾脏组织内炎症通路异常激活，导致肾脏发生炎症性纤维化等。所述pkd2是一个单拷贝基因，基因定位于4号染色体(4q21-23)，有15个外显子，其编码蛋白产物为968个氨基酸的多囊蛋白2(PC2)，属于钙离子通道的组成亚单位，约15％的ADPKD患者由于pkd2基因突变致病。本专利技术提供了一种治疗和/或预防多囊肾病的药物，含有有效剂量的环糊精及其药学上可接受的载体。在本专利技术中，所述的环糊精与上述应用中环糊精完全一致，在此不做赘述。在本专利技术中，所述药物优选为环糊精或其药学上可接受的载体。本专利技术对环糊本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.环糊精在制备治疗和/或预防多囊肾病药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，所述多囊肾病包括：常染色体显性遗传性多囊肾病、常染色体隐性遗传性多囊肾病。


3.环糊精在制备治疗和/或预防pkd1基因或pkd2基因引发的常染色体显性多囊肾病药物中的应用。


4.根据权利要求1-3任意一项所述的应用，其特征在于，所述环糊精为α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或上述三种的衍生物。


5.一种治疗和/或预防多囊肾病的药物，其特征在于，含有有效剂量的环糊精及其药学上可接受的载体。


6.抑制组织细胞膜表面小窝蛋白-1表达的...

【专利技术属性】
技术研发人员：梅长林，陈思秀，徐德超，宋书伟，付莉莉，
申请(专利权)人：梅长林，
类型：发明
国别省市：上海;31