淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I的医药用途制造技术

本发明专利技术公开了淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I的一种医药用途，具体是淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I在制备治疗骨骼肌萎缩药物中的应用。本发明专利技术通过体内外实验证明了淫羊藿苷的酶解产物或宝藿苷I可显著降低骨骼肌萎缩的程度，包括增大肌纤维横截面积、腓肠肌湿重/体质量比值和有氧运动能力，并能通过调节自噬体系上调骨骼肌蛋白含量，极具应用前景。

The enzymatic hydrolysate of icariin and the pharmaceutical application of its main component baohuo I

【技术实现步骤摘要】
淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I的医药用途
本专利技术属于医药及中药
，涉及淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I的医药用途，具体涉及一种淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I用于制备治疗骨骼肌萎缩的药物中的应用。
技术介绍
淫羊藿是临床常用中药，全草供药用，又名仙灵脾、刚前，《神农本草经》列为中品，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿功效，用于肾阳虚衰所致阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛。淫羊藿苷(Icariin，ICA)为淫羊藿主要化学成分，具有抗骨质疏松、免疫调节、抗肿瘤和改善心血管系统功能等多种药理活性。淫羊藿苷抗骨质疏松活性明确，其药效主要通过降低钙流失、刺激成骨细胞增殖、抑制骨吸收、促进骨形成等途径发挥。宝藿苷I是淫羊藿苷的主要代谢物，淫羊藿苷脱去一分子葡萄糖后生成宝藿苷I。研究发现，宝藿苷Ⅰ可以促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向成骨分化，与淫羊藿苷相比，宝藿苷Ⅰ增加碱性磷酸酶活力的效能更为显著，宝藿苷Ⅰ对大鼠破骨细胞的分化有较好的抑制作用，其抑制作用优于淫羊藿苷好。近年来关于宝藿苷Ⅰ的药理学研究主要聚焦于对成骨细胞的作用。宝藿苷Ⅰ可以延长细胞生长周期，调节免疫和内分泌系统，改善机体代谢功能，从不同方面延缓老化进程和防止老年病的发生。宝藿苷Ⅰ能靶向Nrf2信号传导，抑制小胶质细胞活性，缓解神经炎症；有效保护激素诱导的的兔早期股骨头坏死；促进成骨细胞增殖；诱导小鼠脂肪干细胞分化为成骨细胞；促进软骨细胞增殖。随着老龄化的进展，骨骼肌萎缩也是老年人常见疾病，发生骨骼肌萎缩的概率越来越高，70岁以下人群中有13～24％遭受肌肉萎缩之苦，80岁以上肌肉萎缩则超过50％，严重影响老年人运动系统功能，降低生活质量，并诱发或加剧代谢综合症、慢性心衰、慢性阻塞性肺病及肿瘤等。因此研制防治骨骼肌萎缩的药物，能在较短时间内产生较显著的社会效益和经济效益。尽管近来对淫羊藿及其化学成分对骨质疏松症的治疗作用报道较多，但是未见淫羊藿苷的酶解产物及其主要成分宝霍苷I用于防治骨骼肌萎缩症方面的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种淫羊藿苷的酶解产物及其主要组分宝藿苷I的医药新用途，具体为用于制备治疗骨骼肌萎缩药物中的应用。灌胃淫羊藿苷的酶解产物或宝藿苷I可显著降低地塞米松注射后小鼠肌萎缩的程度，包括增大肌纤维横截面积、腓肠肌湿重/体质量比值和有氧运动能力，并能通过调节自噬体系上调骨骼肌蛋白含量。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：淫羊藿苷的酶解产物(IcarisidM)及其主要组分宝藿苷I(IcarisidII)在制备治疗骨骼肌萎缩药物中的应用。宝藿苷I的分子式为C27H30O10，结构式如下式所示：作为优选的技术方案：如上所述的应用，所述淫羊藿苷的酶解产物是通过β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷获得的。酶解方法为：淫羊藿苷和β-葡萄糖苷酶于pH＝4、38～42℃条件下反应，萃取取有机相，干燥、浓缩、结晶得宝霍苷I粗品；重结晶得宝霍苷I精制品。具体的制备方法为：将使用的淫羊藿苷和β-葡萄糖苷酶分别溶于0.2MpH＝4.0的醋酸缓冲液中，40℃搅拌8h，反应液用适量乙酸乙酯萃取3次，收集上层溶液，用无水硫酸钠干燥，旋蒸浓缩，浓缩液转移至4℃冰箱静置结晶；结晶在40℃下真空干燥3h，得宝霍苷I粗品；甲醇重结晶得宝霍苷I精制品。如上所述的应用，所述淫羊藿苷的酶解产物中宝藿苷I的含量为40～98wt％。如上所述的应用，所述制备治疗骨骼肌萎缩的药物的剂型包括：片剂、注射剂、胶囊和口服液(颗粒剂、混悬或脂质体等)中的一种以上。本专利技术的保护范围并不仅限于此，此处仅列举部分可行的技术方案，其可采用本领域公知的常规生产方法制成各种剂型，采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、腹腔注射、肌肉注射等中的一种或多种)进行肌少症及其相关疾病的预防、保护、治疗或科学研究。本专利技术还提供一种制备治疗骨骼肌萎缩的药物，所述药物含有有效量的有效组分，所述有效组分包括淫羊藿苷的酶解产物和宝藿苷I中的至少一种。有益效果：本专利技术以淫羊藿苷的酶解产物(IcarisidM)和/或宝藿苷I(IcarisidII)作为制备治疗骨骼肌萎缩药物的活性组分，研究发现，IcarisidM及IcarisidII对地塞米松诱导C2C12肌管细胞萎缩均能起到保护作用，其中以1000nM的IcarisidII和8000nM的IcarisidM的保护作用最为显著，IcarisidM及IcarisidII对地塞米松诱导小鼠骨骼肌萎缩均能起到保护作用，IcarisidM和IcarisidII的最小有效剂量分别为1mg/kg和0.5mg/kg，即说明了IcarisidM或IcarisidII能够有效治疗骨骼肌萎缩的药物，同时其有效作用剂量较小且效果良好，在骨骼肌萎缩治疗领域具有较为广阔的应用前景。附图说明图1为淫羊藿次苷I(ICAI)、淫羊藿次苷II(ICAII)、淫羊藿苷(ICA)和淫羊藿素(AICT)对照品HPLC色谱图；图2为本专利技术的淫羊藿苷的酶解产物的HPLC色谱图；图3为不同浓度的宝藿苷I及淫羊藿苷酶解物(即淫羊藿苷的酶解产物)对模型细胞增殖率的影响；图4为宝藿苷I对肌管细胞MyHC免疫荧光化学染色及肌管直径的影响；图5为宝藿苷I对模型细胞myhcmRNA相对表达的影响；图6为宝藿苷I对模型细胞MyHC蛋白表达的影响；图7为宝藿苷I对模型细胞超微结构的影响；图8为宝藿苷I及淫羊藿苷酶解物(即淫羊藿苷的酶解产物)对模型小鼠肌力的影响；图9为宝藿苷I及淫羊藿苷酶解物(即淫羊藿苷的酶解产物)对模型小鼠腓肠肌湿重/体质量比的影响；图10为宝藿苷I对模型小鼠腓肠肌形态学的影响；图11为宝藿苷I对模型小鼠腓肠肌横截面积的影响；图12为宝藿苷I对模型小鼠myhcmRNA表达的影响；图13为宝藿苷I对模型小鼠MyHC蛋白表达的影响。具体实施方式下面结合附图，对本专利技术的具体实施方式做进一步阐述。实施例1一种淫羊藿苷的酶解产物(主要组分为宝霍苷I)的制备方法，其具体步骤如下：称取淫羊藿苷和β-葡萄糖苷酶各约50mg溶于10mL0.2MpH＝4.0的醋酸缓冲液中40℃搅拌8h，反应液用50mL乙酸乙酯萃取3次，收集上层溶液，用无水硫酸钠干燥，旋蒸浓缩，浓缩液转移至4℃冰箱静置结晶；结晶在40℃下真空干燥3h，得宝霍苷I粗品；甲醇重结晶得宝霍苷I的精制品(宝霍苷I的粗品及精制品均为淫羊藿苷的酶解产物)。采用HPLC检测淫羊藿苷的酶解产物(宝霍苷I的粗品及精制品)中宝霍苷I的含量，具体为以如图2所示的淫羊藿苷的酶解产物的HPLC色谱图，参考如图1所示的对照品HPLC色谱图，测得宝霍苷I的粗品中宝霍苷I的含量为63.4％，宝霍苷I的精制品中宝霍苷I的含量为94.2％。实施例2测试淫羊藿苷的酶解产物及宝藿苷I对地塞米松诱导C2C12肌管细胞萎缩的保护作用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.淫羊藿苷的酶解产物在制备治疗骨骼肌萎缩药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.淫羊藿苷的酶解产物在制备治疗骨骼肌萎缩药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述淫羊藿苷的酶解产物是通过β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷获得的。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述淫羊藿苷的酶解产物中宝藿苷I的含量为40～98wt％。


4.宝藿...

【专利技术属性】
技术研发人员：张彤，龚张斌，丁越，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：上海;31