脂质体颗粒、制备所述脂质体颗粒的方法以及其用途技术

被称为小单层囊泡(SUV)的脂质体可在20‑50nm大小范围内合成，但遭遇如不稳定性和导致颗粒间融合的聚集的挑战。这限制其作为治疗递送剂的用途。经由连接阴离子实体如DNA/RNA来增加SUV的表面负电荷使这些囊泡的胶体稳定性提高。另外，不同于其线性对应物，核酸的致密球形布置和径向取向表现出独特的化学和生物特性。这些脂质体是无毒的，并且虽然是阴离子的，但能够以非免疫原性方式有效地进入细胞而无需辅助阳离子转染剂的帮助。这些例外特性允许其用作不同疗法中的基因调控的递送剂并且提供金属核心球形核酸的替代平台。

【技术实现步骤摘要】
脂质体颗粒、制备所述脂质体颗粒的方法以及其用途分案说明本申请为申请日为2014年12月3日，申请号为201480072672.1，题目为“脂质体颗粒、制备所述脂质体颗粒的方法以及其用途”的专利申请的分案申请。相关申请的交叉引用根据美国法典第35篇第119条(e)款，本申请要求2013年12月3日提交的美国临时申请第61/911,334号和2014年4月21日提交的美国临时申请第61/982,269号的优先权，其公开内容以引用的方式整体并入本文。政府利益声明本专利技术是根据由美国国防部高级研究计划局(DefenseAdvancedResearchProjectAgency)授予的HR0011-13-2-0018和由美国国立卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)授予的CA151880在政府支持下进行的。政府对本专利技术具有某些权利。序列表本申请含有呈计算机可读形式的序列表(文件名：2013-201_SeqListing.txt；创建：2014年12月3日；1,893字节)作为公开内容的单独部分，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脂质体颗粒，所述脂质体颗粒具有大致上球形的几何形状，所述脂质体颗粒包含：包括第一脂质和第二脂质的脂质双层；以及与所述脂质体颗粒的表面连接的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸上调toll-样受体(TLR)9的活性，其中所述寡核苷酸各自为含有一个亲脂性栓系基团的寡核苷酸-脂质缀合物，所述亲脂性栓系基团锚定至所述脂质双层的外侧中，其中所述脂质体颗粒的直径小于或等于50纳米，并且其中所有的寡核苷酸为单链。/n

【技术特征摘要】
20131203 US 61/911,334;20140421 US 61/982,2691.一种脂质体颗粒，所述脂质体颗粒具有大致上球形的几何形状，所述脂质体颗粒包含：包括第一脂质和第二脂质的脂质双层；以及与所述脂质体颗粒的表面连接的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸上调toll-样受体(TLR)9的活性，其中所述寡核苷酸各自为含有一个亲脂性栓系基团的寡核苷酸-脂质缀合物，所述亲脂性栓系基团锚定至所述脂质双层的外侧中，其中所述脂质体颗粒的直径小于或等于50纳米，并且其中所有的寡核苷酸为单链。


2.一种脂质体颗粒，所述脂质体颗粒具有大致上球形的几何形状，所述脂质体颗粒由脂质双层以及与所述脂质体颗粒的表面连接的寡核苷酸组成，其中所述寡核苷酸上调toll-样受体(TLR)9的活性，其中所述寡核苷酸各自为含有一个亲脂性栓系基团的寡核苷酸-脂质缀合物，所述亲脂性栓系基团锚定至所述脂质双层的外侧中，其中所述脂质体颗粒的直径小于或等于50纳米，并且其中所有的寡核苷酸为单链。


3.如权利要求1所述的脂质体颗粒，其中所述第一脂质和所述第二脂质包含选自由下述组成的组的脂质：脂质的磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油以及磷脂酰乙醇胺家族，优选地1,2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DOPC)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-磷脂酰胆碱(DMPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-磷脂酰胆碱(POPC)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(DSPG)、1,2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(DOPG)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二-(9Z-十八烯酰基)-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DOPE)或1,2-双十六烷酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DPPE)。


4.如权利要求1所述的脂质体颗粒，其中所述亲脂性栓系基团包含生育酚或胆固醇。


5.如权利要求1所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒的直径在25纳米至40纳米之间。


6.如权利要求1至5中任一项所述的脂质体颗粒，其中所述寡核苷酸是SEQIDNo.8(5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’)。


7.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述第一脂质和所述第二脂质相同。


8.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述第一脂质和所述第二脂质是DOPC。


9.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒的所述直径小于或等于40纳米。


10.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒的所述直径小于或等于35纳米。


11.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒的所述直径小于或等于30纳米。


12.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒在其表面上包含至少10个寡核苷酸。


13.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒在其表面上包含10至80个寡核苷酸。


14.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒在其表面上包含70个寡核苷酸。


15.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述脂质体颗粒在其表面上包含30个寡核苷酸。


16.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述寡核苷酸是修饰的寡核苷酸。


17.如权利要求6所述的脂质体颗粒，其中所述寡核苷酸具有硫代磷酸酯主链。

【专利技术属性】
技术研发人员：查德·A·米尔金，松兵·T·恩吉耶，雷沙姆·辛格·邦加，纳塔利·切尔尼亚克，谢尔盖·格里亚兹诺夫，亚历山大·拉多维奇莫雷诺，克里斯托弗·梅德，
申请(专利权)人：西北大学，埃克西奎雷股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US