一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法技术

本发明专利技术提出了一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法，包括抗体芯片点制、活细胞质检、芯片封闭、活细胞收集、活细胞染色、活细胞与抗体芯片孵育、芯片清洗及晾干、芯片扫描及数据处理等步骤，通过抗体芯片和染色后活细胞进行反应，在较短时间内筛选得到能够和细胞表面靶点相结合的抗体，实验操作难度低，适用性广泛，各种能制备成单细胞悬液的样本均可适用该发明专利技术，且成本较传统靶点开发方法大大降低。

【技术实现步骤摘要】
一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法
本专利技术涉及生物
，具体为一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法。
技术介绍
在活细胞筛选过程中，药物作用靶点涉及受体、酶、离子通道、转运体、免疫系统、基因等，相对于未知的药物靶点来说，已知的药物靶点只不过是冰山一角，如何能在众多的未知里发现并找到有效的药物靶点是当今医药领域的难题，新靶点的开发在整个药物研发过程中起着至关重要的作用，现代药物研究中，新靶点的建立往往是新药创新的前提和保障，而目前大部分医药公司都缺乏新靶点开发的有效手段，目前人类已发现的靶点停滞在500个左右，新靶点发现和确认的周期一般在三到五年左右，不仅周期较长、可重复性和通量较低，而且进行抗体开发需进行后续验证，开发成本高。
技术实现思路
针对
技术介绍
中指出的问题，本专利技术提出一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法。本专利技术的技术方案是这样实现的：一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.抗体芯片点制：用博奥醛基修饰基片和6万个抗体库，采用点样仪点制抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1.抗体芯片点制：用博奥醛基修饰基片和6万个抗体库，采用点样仪点制抗体芯片；/nS2.活细胞质检：用显微镜观察细胞是否长势良好，并对细胞计数和采用台盼蓝对细胞染色，以确认细胞的个数以及细胞的存活率；/nS3.芯片封闭：采用封闭液对抗体芯片进行封闭，并置于摇床1.5h；/nS4.活细胞收集：每150ml皿中加入6ml EDTA对细胞消化，消化后将细胞进行离心处理，离心后去除上清液，随后加入IXPBS重悬细胞形成活细胞悬液；/nS5.活细胞染色：按照每1ml活细胞悬液加0.2ul的DNA染料对细胞进行染色，染色时间0.5h...

【技术特征摘要】
1.一种基于高通量抗体芯片的活细胞筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.抗体芯片点制：用博奥醛基修饰基片和6万个抗体库，采用点样仪点制抗体芯片；
S2.活细胞质检：用显微镜观察细胞是否长势良好，并对细胞计数和采用台盼蓝对细胞染色，以确认细胞的个数以及细胞的存活率；
S3.芯片封闭：采用封闭液对抗体芯片进行封闭，并置于摇床1.5h；
S4.活细胞收集：每150ml皿中加入6mlEDTA对细胞消化，消化后将细胞进行离心处理，离心后去除上清液，随后加入IXPBS重悬细胞形成活细胞悬液；
S5.活细胞染色：按照每1ml活细胞悬液加0.2ul的DNA染料对细胞进行染色，染色时间0.5h，染色完成后离心并去除上清液，加入1mlIXPBS重悬细胞后再次离心，再次加入1mlIXPBS重悬细胞形成重悬细胞液；
S6.活细胞与抗体芯片孵育：取出抗体芯片，正面向上平放于反应容器中，缓慢加入所述重悬细胞液，室温下静置0.5h；
S7.芯片清洗及晾干：取出抗体芯片，在IXPBS中清洗，放...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟逊，
申请(专利权)人：普众发现医药科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31