【技术实现步骤摘要】
基于整体斑马鱼模型体内脂质三维质谱成像的方法
本专利技术涉及质谱检测
,特别涉及基于整体斑马鱼模型体内脂质三维质谱成像的方法。
技术介绍
MALDI质谱成像技术是一种可视化分析检测的新型技术,它将质谱的组分鉴别能力与计算机辅助影像可视化技术相结合,在组织、细胞或亚细胞水平上通过采用不同的基质,可以实现对小分子化合物、多肽、蛋白、核酸、脂类等多种分子及其代谢物进行原位成像分析。该方法无需复杂前处理即可实现组织样本中多种分子的原位定性、定量分析,并绘制出它们的二维或三维空间分布图,具有高灵敏度,高分析速度和高化学特异性的优点。近年来,MALDI质谱成像技术取得了巨大进步,已被全世界公认作为检测和鉴定生物样品中多种复杂分子的有效工具,广泛应用于生命、生物医药、环境等研究领域。目前MALDI质谱成像技术的应用大部分是二维MALDI质谱成像方面的研究,但是二维MALDI质谱成像方法只能够提供样品的一个截面的质谱成像信息,由于单个横截面很难体现模型整个器官完整性,因此很有可能丢失与疾病相关的一些重要分子信息。而三维MALD ...
【技术保护点】
1.基于斑马鱼模型体内脂质三维质谱成像的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n步骤1:取C1型尼曼匹克纯合子的斑马鱼和野生型的斑马鱼,包埋后,分别获得NPC1
【技术特征摘要】
1.基于斑马鱼模型体内脂质三维质谱成像的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:取C1型尼曼匹克纯合子的斑马鱼和野生型的斑马鱼,包埋后,分别获得NPC1-/-组和WT组的冰冻组织切片,基质沉积后采集MALDI质谱成像数据;
步骤2:经SCiLS处理,调节x、y轴使所述冰冻组织切片能够按照生物原始形貌准确堆叠:
步骤3:对比NPC1-/-组和WT组的冰冻组织切片检测到的质荷比m/z的三维成像结果,获得具有空间分布差异的m/z值;并采集其MALDI二级碎片信息;
步骤4:搜索脂质组学质谱数据库,结合所述MALDI二级碎片信息,获得所述空间分布差异的m/z值所对应的脂质。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中所述包埋包括:取C1型尼曼匹克纯合子的斑马鱼和野生型的斑马鱼用包埋剂将整条斑马鱼包埋,置于-80℃凝固;于-20℃每隔56μm取一片厚度为14μm的冰冻组织切片样本粘附于ITO板,确保所取冰冻组织切片包括斑马鱼的所有完整器官组织;NPC1-/-组和WT组分别取至少20片所述冰冻组织切片。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述包埋剂包括10%羧甲基纤维素钠和10%明胶的混合物。
4.如权利要求1至3任一项所述的方法,其特征在于,步骤1中所述基质沉积采用的基质为浓度为7mg/mL的N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐和50%甲醇。
5.如权利要求1至4任一项所述的方法,其特征在于,步骤1中所述基质沉积的条件包括:喷雾功率的35%;调制为20%;沉积时间...
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