基于EV71毒株的感染性cDNA克隆及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，提供了稳定的、基于一株临床分离的EV71毒株的感染性cDNA克隆及其含有各类报道基因的衍生克隆、及以其为母本构建的各种突变克隆；以及利用这些克隆产生的各种重组病毒、亚单位病毒颗粒；以及利用这些克隆产生的各种重组病毒感染动物建立的动物模型；以及利用这些病毒或亚单位病毒颗粒用于疫苗的开发及诊断试剂的应用；以及利用此病毒作为基因治疗载体或表达载体。本发明专利技术为EV71病毒感染的检测、预防、免疫提供了新的工具和途径，为利用此EV71毒株感染性克隆作为病毒载体进行基因治疗及疫苗开发提供了可能性。

【技术实现步骤摘要】
基于EV71毒株的感染性cDNA克隆及其应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及基于一株临床分离的EV71毒株(js1)的感染性cDNA克隆的构建，以及利用此cDNA克隆及其衍生克隆产生的病毒及其带有报告基因的病毒及建立的动物模型在抗病毒药物研发，疫苗研发，病毒诊断方面的应用。
技术介绍
现有技术公开了肠道病毒是一类病毒的总称，包括脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)的3个分型、柯萨奇病毒(CoxsackievirusA)的23个分型、柯萨奇(CoxsackievirusB)病毒的6个分型、埃可病毒(ECHOvirus)的31个分型、肠病毒(Enterovirus)的68-71个分型，共67种类型。传统分型以后发现的肠道病毒﹐按照发现顺序命名，现在已经发现的新型肠道病毒有68﹑69﹑70﹑71和72型肠道病毒。新型肠道病毒71型，简称EV71，属于小RNA病毒科，肠道病毒属，其于1969年从澳大利亚和美国分离出，于1973在日本分离出，并被认为是儿童手足口病爆发流行的主要病原体(Schmidtetal.JInfectDis1974,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种cDNA，其特征在于它包含EV71毒株的核酸序列和一个低拷贝质粒骨架的核酸序列；/n其中，EV71毒株的核酸序列涵盖EV71病毒5′到3′正向极性序列，包含病毒5′及3′非编码区及一个编码病毒蛋白的开放阅读框。/n

【技术特征摘要】
1.一种cDNA，其特征在于它包含EV71毒株的核酸序列和一个低拷贝质粒骨架的核酸序列；
其中，EV71毒株的核酸序列涵盖EV71病毒5′到3′正向极性序列，包含病毒5′及3′非编码区及一个编码病毒蛋白的开放阅读框。


2.如权利要求1所述的cDNA，其特征在于，它还包括在EV71毒株核酸序列中插入的报道基因荧光素酶或者荧光蛋白的序列。


3.如权利要求1所述的cDNA，其特征在于，所述的病毒蛋白开放阅读框的氨基酸序列如SEQIDNO4所示。


4.如权利要求1所述的cDNA，其特征在于，所述的低拷贝质粒骨架的编码序列如SEQIDNO3所示。


5.如权利要求1所述的cDNA，其特征在于，所述的EV71毒株的核酸序列如SEQIDNO2所示。


6.如权利要求1所述的cDNA，其特征在于，其序列如SEQIDNO1所示。


7.权利要求1-6中任一种cDNA的表达产物。


8.一种重组病毒，其特征在于，它含有权利要求1-6中任意一种cDNA。


9.一种亚基因组复制子，其特征在于，其cDNA序列如权利要求1-6中任意一种所示。


10.一种双链DNA，其特征在于，它能产生权利要求1-6中任一种的cDNA。

【专利技术属性】
技术研发人员：易志刚，宋志刚，张惠英，袁正宏，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31