一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒和疫苗制造技术

本发明专利技术属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明专利技术还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒和疫苗
本专利技术涉及兽用生物制品
，特别涉及表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒以及制备方法和疫苗。
技术介绍
传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病毒(Infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)引起的一种急性、高传染性、免疫抑制性疾病。该病毒有两种血清型即I型和II型血清型，但只有I型血清型对鸡有致病作用。它主要侵害3-6周龄雏鸡的中枢神经系统和法氏囊器官中的B细胞，引起法氏囊充血坏死，免疫抑制，继发其它感染性疾病，是造成全球家禽业重大损失的重要病原之一。IBDV是一种具有二十面体核衣壳结构的无包膜双链RNA(dsRNA)病毒，属于双链RNA病毒科，双链RNA病毒属[1]。病毒基因组由大片段A和小片段B两段双链RNA组成。IBDV全基因组成如图1所示。目前，商业鸡中的IBD是通过弱毒和灭活的IBDV疫苗来控制的。弱毒活疫苗存在一定的安全隐患，弱毒的活病毒在环境中的传播可以造成病毒突变和重组形成新的毒株，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，其特征在于，所述重组病毒在病毒rDHN3-mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3-mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。/n

【技术特征摘要】
1.一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，其特征在于，所述重组病毒在病毒rDHN3-mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQIDNO：2所述，所述病毒rDHN3-mF的序列表如SEQIDNO：1所述。


2.根据权利要求1所述的重组病毒，其特征在于，所述重组病毒由基因片段F1、F2、F3、F4通过同源重组的的方法得到质粒pBR322-DHN3mF-IBDVvp2，并将质粒pBR322-DHN3mF-IBDVvp2通过转染细胞得到；
所述基因片段F1的序列表如SEQIDNO：3所述；
所述基因片段F2的序列表如SEQIDNO：4所述；
所述基因片段F3为VP2蛋白编码基因；
所述基因片段F4的序列表如SEQIDNO：5所述。


3.一种如权利要求2所述的重组病毒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将基因片段F1、F2、F3、F4进行同源重组得到重组产物pBR322-DHN3mF-IBDVvp2；
将质粒pBR322-DHN3mF-IBDVvp2通过转染细胞得到重组病毒。


4.根据权利要求3所述的重组病毒的制备方法，其特征在于，重组过程中各物质用量为：30ng基因片段F1、97ng基因片段F2、30ng基因片段F3、200ng基因片段F4、4μl5xCEMultiSBuffer、2μlExnaseMultiS，d...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈瑞爱，杜倩茹，刘定祥，黄梅，王楠楠，叶俊贤，罗琼，任广彩，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44