定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法技术

本发明专利技术提供了一种定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法，其步骤为：(1)、取骨髓间充质干细胞，置于不含血清的培养基进行血清饥饿处理12～24小时；之后置于培养基A中预培养5～6小时；(2)、预培养结束后，转至培养基B中进行培养2～4周；所述培养基A以DMEM/F12培养基为基础培养基，并添加5～10μmol的极低密度脂蛋白、1～3nmol成纤维细胞生长因子‑2和8～12nmol L‑谷氨酰胺。本发明专利技术可以有效的提高诱导后细胞的ALP水平，还可以显著的提高Runx2的表达水平，因此，可以有效的定向诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。

【技术实现步骤摘要】
定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法
本专利技术属于生物
，涉及细胞培养技术，具体涉及一种定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法。
技术介绍
间充质干细胞是一类具有自我复制能力和多向分化能力的干细胞，可修复做种组织器官损伤，是干细胞治疗的优选种子细胞。间充质干细胞存在于各种组织和器官，其中包括骨髓、毛囊、脐带、牙髓、心脏等组织，尤以骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞最常见。骨髓间充质干细胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)是存在于骨髓组织中的一类具有自我更新、增殖能力强，及多向分化能力的间充质干细胞。骨髓干细胞的可以分化成各种间充质来源的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肝细胞、肌细胞、神经细胞等，是未来干细胞在医疗应用上具有巨大潜力的理想种子细胞。研究表明RUNX2是成骨细胞分化的主要转录调节因子，其在调节成骨细胞成熟和体内平衡中起基础性作用。据报道，Runx2缺陷型小鼠显示弱钙化骨而没有可检测到的成骨细胞，RUNX2通过上调骨基质形成的表达来促进骨形成，包括I型胶原、骨桥蛋白、骨钙蛋白、骨涎蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法，其特征在于，所述分化培养方法是将骨髓间充质干细胞定向诱导向成骨细胞分化，所述方法包括如下步骤：/n(1)、取骨髓间充质干细胞，置于不含血清的培养基进行血清饥饿处理12～24小时；之后置于培养基A中预培养5～6小时；/n(2)、预培养结束后，转至培养基B中进行培养2～4周；/n所述培养基A以DMEM/F12培养基为基础培养基，并添加5～10μmol的极低密度脂蛋白、1～3nmol成纤维细胞生长因子-2和8～12nmol L-谷氨酰胺；/n所述培养基B以DMEM/F12培养基为基础培养基，并添加5～8ng/ml尼克酰胺、13～15ng/ml激活素A、...

【技术特征摘要】
1.一种定向诱导骨髓间充质干细胞的分化培养方法，其特征在于，所述分化培养方法是将骨髓间充质干细胞定向诱导向成骨细胞分化，所述方法包括如下步骤：
(1)、取骨髓间充质干细胞，置于不含血清的培养基进行血清饥饿处理12～24小时；之后置于培养基A中预培养5～6小时；
(2)、预培养结束后，转至培养基B中进行培养2～4周；
所述培养基A以DMEM/F12培养基为基础培养基，并添加5～10μmol的极低密度脂蛋白、1～3nmol成纤维细胞生长因子-2和8～12nmolL-谷氨酰胺；
所述培养基B以DMEM/F12培养基为基础培养基，并添加5～8ng/ml尼克酰胺、13～15ng/ml激活素A、1～2ng/ml地塞米松、100～150ng/ml骨形态蛋白-2和5～8ng/mlβ-甘油磷酸钠。


2.根据权利要求1所述的分化培养方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋筱荭，邹弼丞，钟立武，汪敬雄，王峰，
申请(专利权)人：四川省恩乐生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51