用于蛋白提取的方法和系统技术方案

本发明专利技术涉及从包含蛋白的沉淀物以高收率提取蛋白的方法和系统，特别是免疫球蛋白，其来自人或非人来源，如血浆。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于蛋白提取的方法和系统
本专利技术涉及从沉淀物提取蛋白的方法和系统，所述蛋白特别是重组和/或血浆来源的蛋白，包括免疫球蛋白(Ig)，如免疫球蛋白G(IgG)。
技术介绍
对纯化的蛋白如特异性抗体的需求已大大增加。这类纯化的蛋白可以用于治疗和/或诊断目的。人血浆已在工业上使用了数十年，用于生产广泛建立和接受的血浆-蛋白产品，例如人白蛋白(HSA)、免疫球蛋白(IgG)、凝血因子浓缩物(凝血因子VIII、凝血因子IX、凝血酶原复合物等)和抑制剂(抗凝血酶、C1-抑制剂等)。在这类血浆来源的药物的开发过程中，已经建立了血浆分级分离方法，导致富集某些蛋白部分的中间产物，其然后用作血浆-蛋白产品的起始组合物。典型方法在例如“人蛋白的分子生物学”(SchultzeH.E.，HeremansJ.F.；VolumeI：NatureandMetabolismofExtracellularProteins1966，ElsevierPublishingCompany；第236-317页)中综述，并且给出这类方法的简化示意图。这些类型的分离技术允许从同一血浆本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从沉淀物提取所关注的蛋白的方法，所述方法包括：/na.在第一罐(1)中将所述沉淀物与液体混合以形成具有第一稀释因子的悬浮液；/nb.将所述悬浮液进料至第一过滤单元(5)中，所述第一过滤单元(5)包含适合产生第一保留物和富集了所关注的蛋白的第一渗透物的动态滤器元件；/nc.通过添加液体来稀释第一罐(1)中的悬浮液至第二稀释因子，任选地通过使第一保留物(13)流入第一罐来进行稀释；以及/nd.在第二罐(7)中回收富集了所关注的蛋白的第一渗透物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180517 EP 18172904.71.一种从沉淀物提取所关注的蛋白的方法，所述方法包括：
a.在第一罐(1)中将所述沉淀物与液体混合以形成具有第一稀释因子的悬浮液；
b.将所述悬浮液进料至第一过滤单元(5)中，所述第一过滤单元(5)包含适合产生第一保留物和富集了所关注的蛋白的第一渗透物的动态滤器元件；
c.通过添加液体来稀释第一罐(1)中的悬浮液至第二稀释因子，任选地通过使第一保留物(13)流入第一罐来进行稀释；以及
d.在第二罐(7)中回收富集了所关注的蛋白的第一渗透物。


2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括：
e.使第二罐(7)中的第一渗透物在包含错流滤器元件的第二过滤单元中进行连续浓缩过程，从而产生富集了所关注的蛋白的第二保留物和消耗了所关注的蛋白的第二渗透物；
f.任选地通过使第二渗透物流至第一罐(1)来稀释第一罐(1)中的悬浮液，从而将所述悬浮液稀释至第二稀释因子；以及
g.使富集了所关注的蛋白的第二保留物返回第二罐(7)和/或收集富集了所关注的蛋白的第二保留物。


3.一种以高收率从沉淀物提取所关注的蛋白的工业规模的方法，所述方法包括：
a.在第一罐中将所述沉淀物与液体混合以形成具有第一稀释因子的悬浮液；
b.将所述悬浮液连续进料至第一过滤单元中，所述第一过滤单元包含旋转错流滤器元件，所述旋转错流滤器元件包含具有陶瓷膜的滤盘，所述陶瓷膜具有5nm-5000nm的平均孔径，所述滤器元件适合产生第一保留物，以及富集了所关注的蛋白的第一渗透物；
c.部分地通过使第一保留物流入第一罐来添加液体来稀释第一罐中的悬浮液至第二稀释因子；
d.在第二罐中回收富集了所关注的蛋白的第一渗透物；和
e.使第二罐中的第一渗透物在包含错流滤器元件的第二过滤单元中进行连续浓缩过程，从而产生富集了所关注的蛋白的第二保留物和消耗了所关注的蛋白的第二渗透物；
f.任选地通过使第二渗透物连续流至第一罐来稀释第一罐中的悬浮液，从而将所述悬浮液稀释至第二稀释因子；以及
g.使富集了所关注的蛋白的第二保留物返回第二罐和/或收集富集了所关注的蛋白的第二保留物。


4.根据权利要求2或3所述的方法，其中
将所述第一渗透物连续进料至浓缩过程中。


5.根据权利要求2或3所述的方法，其中
所述浓缩过程是在第二过滤单元中进行的超滤。


6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
将所述第一渗透物收集在第二罐中，并且一旦将第一罐中的悬浮液完全过滤，就使来自第二罐的第一渗透物进行连续浓缩过程。


7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
重复步骤b)至c)或步骤b)至f)直至达到第一罐中的悬浮液的第二稀释因子或蛋白浓度的预定值。


8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
所述第一稀释因子是至少3(1∶3；包含蛋白的组合物的份数∶总量)，优选1-10，优选3-9，优选3-5，优选约3、5、6、7、9或10。


9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
预定的第二稀释因子(包含蛋白的沉淀物的重量比总稀释液的重量)为6-70、10-70、20-50，优选30-40、约10、约20、约30、约40、约50、约60或约70(1∶70；份数沉淀物∶总量)。


10.根据权利要求8-10中任一项所述的方法，其中
蛋白浓度的预定值为0.1g/L以下，优选约0.001-0.1g/L。


11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
所述沉淀物是醇分级分离过程的中间产物，优选血浆，更优选人血浆的醇分级分离过程。


12.根据权利要求11所述的方法，其中
所述中间产物选自Cohn部分I(FrI)、Cohn部分II+III(FrII+III)、Cohn部分I+II+III(FrI+II+III)或Kistler/Nitschmann沉淀物A(KNA)，或者KNA与FrI、FrII+III和FrI+II+III中的一种或多种的组合。


13.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中
所述沉淀物是培养上清液或发酵产物。


14.根据前述权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：易卜拉欣·埃尔门亚韦，
申请(专利权)人：瑞士杰特贝林生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH