溶质载体家族7成员7在制备防治肠道病毒71型感染药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医学技术领域，具体是一种抗肠道病毒71型感染的新靶点及应用。本发明专利技术以人结肠癌细胞(Caco‑2)作为靶细胞，采用RNA干扰技术下调靶细胞转运相关膜蛋白的表达，来寻找可有效抑制EV71感染人结肠癌细胞的宿主因子，达到从源头(肠道)阻断EV71感染的目的。本发明专利技术通过实验发现溶质载体家族7成员7(SLC7A7)在EV71感染Caco‑2细胞中发挥着重要的作用，下调SLC7A7的表达，能明显抑制EV71的感染。本发明专利技术提供了SLC7A7在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用，为临床预防和治疗因EV71感染所导致的手足口病、脑膜炎、脑干脑炎或脊髓灰质炎等疾患提供了新的靶点和治疗方案。

【技术实现步骤摘要】
溶质载体家族7成员7在制备防治肠道病毒71型感染药物中的应用
本专利技术涉及生物医学
，具体地说，是一种抗肠道病毒71型感染的新靶点及应用。
技术介绍
肠道病毒71型(enterovirus71，EV71)属于小核糖核酸病毒科肠道病毒属人肠道A类病毒，是导致手足口病(Hand-foot-mouthdisease,HFMD)的主要病原体之一。目前，手足口病在世界多个地区暴发并流行，尤其是亚太地区。在我国，自2008年几大省市暴发手足口病疫情以来，该病的感染人数和死亡率一直居高不下，每年报告发病数超过100万例，死亡数近1000例。手足口病主要发病人群为5岁以下婴幼儿，临床表现为发热，手、足、臀部以及口腔粘膜等部位出现疱疹等症状；少数患儿可发展为重症患者，出现中枢神经系统(centralnervoussystem，CNS)病变，包括无菌性脑膜炎、脑干脑炎、脑脊髓炎以及神经源性肺水肿等，严重威胁着婴幼儿的生命健康[SolomonT,etal.Virology,epidemiology,pathogenesis,andcontrolofenterovirus71.LancetInfectDis.2010,10(11):778-90]。手足口病特别是重症病例多由肠道病毒71型(EV71)感染所致。然而，目前关于EV71引起手足口病的治疗尚无特异高效的抗病毒药物，临床上仍以对症治疗为主，在预防方面也无有效疫苗问世。EV71的传播以粪-口途径最广，在此传播途径中，肠道是人体抵御病原体的第一道屏障。动物实验研究证实，EV71经口腔接种小鼠后，最先在小肠组织表现出病原体阳性[ChenYC,etal.Amurineoralenterovirus71infectionmodelwithcentralnervoussysteminvolvement.JournalofGeneralVirology,2004,85(1):69-77]。因此，EV71首先通过对肠道系统进行感染，在小肠道细胞内大量快速复制，随后入血导致病毒血症并引发其它器官的感染。然而，在EV71到达人体肠道系统后，病毒如何侵入肠道细胞的机制尚不清楚。小肠作为人体消化系统重要器官，主要负责营养物质的消化与吸收，其腔面最外层为小肠粘膜上皮细胞，对于抵御病原体的起着至关重要的作用。作为人结肠癌细胞系，Caco-2在形态学和生理学功能方面与人小肠粘膜上皮细胞相似，培养成熟的Caco-2为致密的单层细胞，具有与正常的小肠粘膜上皮细胞相同的极性和紧密连接、微绒毛结构；且作为肿瘤细胞，比小肠粘膜上皮细胞更易培养。因此，探明EV71感染Caco-2的机制并以此寻找新的抗病毒靶点，对于防治EV71感染至关重要。而目前关于EV71感染Caco-2的具体分子机制仍不清楚。病毒在感染宿主时，必须利用宿主细胞的各种分子及相关信号通路才能完成自身的生命周期。其中，细胞膜上转运相关分子对病毒的入侵，复制，以及释放出有感染性的子代病毒颗粒具有重要意义。比如，A解联蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白10(ADisintegrinandmetalloproteinasedomain-containingprotein，ADAM10)在HIV的核转运和复制中具有重要作用[EndsleyMA,etal.NucleartraffickingoftheHIV-1pre-integrationcomplexdependsontheADAM10intracellulardomain,Virology.2014,454-455:60-6；FriedrichBM,etal.AfunctionalroleforADAM10inhumanimmunodeficiencyvirustype-1replication.Retrovirology.2011,8:32]。近年来研究也发现ADP核糖基化因子6(ADPribosylationfactor6，ARF6)分子在柯萨奇病毒A9型的感染过程中发挥着重要的作用[O,etal.InternalizationofcoxsackievirusA9ismediatedbybeta2-microglobulin,dynamin,andARF6butnotbycaveolin-1orclathrin.JVirol.2010,84(7):3666-81]。还有研究表明EV71主要利用细胞膜上小窝蛋白1(CAV1)依赖的内吞途径(caveolar-dependentendocytosis)感染JurkatT淋巴细胞[LinHY,etal.CaveolarendocytosisisrequiredforhumanPSGL-1-mediatedenterovirus71infection.JVirol.2013,87(16):9064-76]。此外，还有研究发现绒毛蛋白2(VIL2或Ezrin)参与细小病毒的复制与扩散[NüeschJP,etal.Ezrin-radixin-moesinfamilyproteinsareinvolvedinparvovirusreplicationandspreading.JVirol.2009,83(11):5854-63]。因此，细胞膜上转运相关分子已成为抗病毒药物筛选的重要靶标。ATP结合盒跨膜转运亚家族C成员3(ATPbindingcassettetransmembranetransportersubfamilyCmember3，ABCC3)属于ABC转运家族成员，可以转运葡糖苷酸、谷胱甘肽和硫酸盐等的结合物以及单阴离子胆汁酸。人类ABCC3在肝脏、肠道、胰腺、胆囊和肾中表达，也存在于人类的几种癌症中，如肝细胞癌、肺腺癌、卵巢癌、胰腺癌和白血病细胞。据报道，人类ABCC3可以通过转运依托泊苷、替尼泊苷和长春新碱等药物参与多种抗肿瘤药的耐药[KobayashiK,etal.FunctionalanalysisofnonsynonymoussinglenucleotidepolymorphismtypeATP-bindingcassettetransmembranetransportersubfamilyCmember3.PharmacogenetGenomics.2008,18(9):823-33]。过表达ABCC3可以促进细胞增殖，耐药性和有氧糖酵解并与肿瘤进展和预后相关[LiuX,etal.OverexpressionofABCC3promotescellproliferation,drugresistance,andaerobicglycolysisandisassociatedwithpoorprognosisinurinarybladdercancerpatients.TumourBiol.2016,37(6):8367-74；Carrasco-TorresG,etal.ThetransmembranetransporterABCC3participatesinlivercancerprogressionandisapotentialbiomarker.Tu本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.溶质载体家族7成员7在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.溶质载体家族7成员7在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用。


2.根据就权利要求1所述的溶质载体家族7成员7在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用，其特征在于，所述的溶质载体家族7成员7在制备预防或治疗由肠道病毒71型感染导致的包括但不限于手足口病、脑膜炎、脑干脑炎或脊髓灰质炎的药物中的应用。


3.根据就权利要求1所述的溶质载体家族7成员7在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用，其特征在于，所述的药物是通过抑制或下调溶质载体家族7成员7的表达量抑制肠道病毒71型感染的药物。


4.抑制或下调溶质载体家族7成员7的表达量的试剂在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用。


5.根据权利要求4所述的抑制或下调溶质载体家族7成员7的表达量的...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱勇喆，周勇涛，施赟杰，刘延刚，戚中田，赵平，任浩，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海;31