一种干细胞诱导分化的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种干细胞诱导分化的培养方法，包括如下步骤：混合溶液制备：首先将用于提取干细胞的组织样本从放样口放入到安装箱内，从而通过预处理机构将样本清洗并切割为小块组织，接着通过细胞分散机构将组织块分散为单个细胞结构，然后通过隔离清理机构将混合溶液注入到收集试管，干细胞分离：将收集试管放入到离心机内进行离心处理，本发明专利技术实现了组织样本自动便捷的清洗和切块处理，有效的避免了这些技术含量低且操作繁琐的步骤需要操作人员手动进行，有效的提高了组织预处理的效率，减轻了操作人员的负担，使操作人员可以将更多的时间投入到高技术含量的步骤内，进而提高了干细胞诱导分化的成品质量。

【技术实现步骤摘要】
一种干细胞诱导分化的培养方法
本专利技术涉及干细胞诱导分化
，具体为一种干细胞诱导分化的培养方法。
技术介绍
干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞，能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞，目前大多数生物学家和医学家认为干细胞是来自于胚胎、胎儿或成体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞，同时还能分化为祖细胞，在进行干细胞诱导分化过程中，需要先从成体组织样本内提取相应的干细胞；但是干细胞提取阶段的成体组织样本清洗和剪切过程技术含量低，但操作繁琐，需要花费操作人员大量的时间，从而延长了整个细胞诱导分化的时间，降低了干细胞诱导分化的效率，使得操作人员无法将更更多的时间使用在高技术含量的操作上，间接的降低了干细胞诱导分化得到的成品品质。
技术实现思路
本专利技术提供一种干细胞诱导分化的培养方法，可以有效解决上述
技术介绍
中提出的干细胞提取阶段的成体组织样本清洗和剪切过程技术含量低，但操作繁琐，需要花费操作人员大量的时间，从而延长了整个细胞诱导分化的时间，降低了干细胞诱导分化的效率，使得操作人员无法将更更多的时间使用在高技术含量的操作上，间接的降低了干细胞诱导分化得到的成品品质的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种干细胞诱导分化的培养方法，包括如下步骤：S1、混合溶液制备：首先将用于提取干细胞的组织样本从放样口放入到安装箱内，从而通过预处理机构将样本清洗并切割为小块组织，接着通过细胞分散机构将组织块分散为单个细胞结构，然后通过隔离清理机构将混合溶液注入到收集试管；S2、干细胞分离：将收集试管放入到离心机内进行离心处理，使收集试管内的组织细胞和干细胞分层，然后通过注射器将干细胞从收集试管内抽出；S3、原代培养：将离心得到的干细胞接种到相应的培养基内进行原代培养；S4、传代培养：将原代培养得到干细胞接种到新的培养基进行培养；S5、定向诱导分化：向培养基内加入相应的诱导分化的试剂，使干细胞进行定向分化；S6、分化细胞鉴定：对分化得到的细胞进检测，从而得到相应的细胞。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术结构科学合理，使用安全方便：1.启动冲洗泵将冲洗液箱内的冲洗液导入方形管内，并经由喷液头将冲洗液喷洒到冲洗槽内，从而实现对组织样本的冲洗，并经由冲洗盒底部的回流软管重新流入到冲洗液箱内，重新流入冲洗液箱内的冲洗液经由细胞滤网过滤便可以进行重复使用，从而有效的提高了组织样本的冲洗效率，同时对冲洗液的循环利用提高了冲洗液的使用效率，避免了冲洗液的浪费；通过两个驱动齿轮与传动齿轮的啮合传动，使得横向切割辊和纵向切割辊进行同向同步转动，从而通过横向切割辊将组织样本切割成条状，继而通过纵向切割辊将条状的组织样本切割为小块状，最后使得切割好的小块状组织样本掉落到导料斗内部，完成组织样本的清洗和切割；通过各机械结构的配合，实现了组织样本自动便捷的清洗和切块处理，有效的避免了这些技术含量低且操作繁琐的步骤需要操作人员手动进行，有效的提高了组织预处理的效率，减轻了操作人员的负担，使操作人员可以将更多的时间投入到高技术含量的步骤内，进而提高了干细胞诱导分化的成品质量。2.通过布液横管将胶原酶溶液喷洒到切割板、横向切割辊和纵向切割辊外侧，既对切割板、横向切割辊和纵向切割辊外侧进行了润滑，同时也可以将切割板、横向切割辊和纵向切割辊外侧残留的组织冲刷到导料斗，减少了组织样本原料的浪费；同时横向切割辊、纵向切割辊和清理梳的配合，先使用横向切割辊对组织样本进行切条，由于条状的组织样本个体仍然具有较大的重量，从而有效的避免了其卡塞于横向切割刃之间的间隙中，通过纵向切割辊与清理梳之间的配合，在通过纵向切割辊对组织样本进行切丁的同时，通过清理梳对纵向切割辊的切割刃间隙处进行清理，从而使组织样本可以顺利的掉落到导料斗内，从而优化了预处理机构的使用过程。3.通过步进电机带动分散罐进行间歇转动，在分散罐转动的同时通过搅拌板对混合溶液进行搅拌，从而加速组织细胞的分散，通过收缩垂直伸缩杆带动支撑座及其上安装的各组件下降，通过通液方孔将分散罐内腔与导液锥管内腔接通，使得分散罐内部的混合液能够从导液锥管底部排出，进而通过定位圆孔排放到底部的收集试管内，避免了操作人员手动转移混合液的繁琐操作，从而提高了组织到细胞的分散效率，优化了混合液的转移过程，使混合液从分散罐到收集试管内的速度更加迅速；通过导料圆顶的设计将掉落的组织块和胶原酶溶液导向分散罐内部，同时对步进电机与分散罐的连接处进行防护，从而确保细胞分散机构的正常使用，通过隔热箱对步进电机进行隔离，从而有效的阻止了步进电机工作产生的热量传递到分散罐内导致分散罐内溶液温度过高，影响组织内细胞的活性的现象，进一步优化了组织细胞的分散过程。4.通过沿导向盒抽动滑移底板将放置架连同放置在其上的各组件从安装箱内部抽出，通过使用拇指和中指扣动上安装圆盒顶端两侧的提拉板将下安装圆盒和上安装圆盒从放置架上提起，通过食指下压驱动压杆，使下安装圆盒在下压驱动压杆的驱动下克服固定弹簧的拉力向下滑动，在下安装圆盒下移的过程中，通过驱动导柱和弧形导槽的配合带动下安装圆盒进行转动，从而使下夹紧弧板与上夹紧弧板之间相互分离，进而取消对收集试管的约束，使收集试管掉落到离心机的放置槽内，从而有效的提高了收集试管的转移速度，使收集试管的转移更加便捷。5.通过循环风机带动加热箱内部的空气进行流动，通过电热管对流经加热箱内的空气进行加热，加热后的空气经由热风导管进入导风细管内部，对安装箱内部进行加热，从而确保了安装箱内部在设备运行的过程中能够持续保持适宜组织细胞存活的温度，提高了细胞的存活率；同时导风细管内部的气流经由送风管运输到排风平管内部，并经由吹风头吹入冲洗槽，通过回风管和吸风盒将吹向冲洗槽的空气重新抽吸导入加热箱内，在加速冲洗后的组织样本干燥的同时，实现气流的内部循环，同时在循环过程中通过过滤板的反复过滤，可以有效的减少循环气流中的杂质，确保了安装箱内部循环气流的清洁度，避免了干细胞提取过程中被外界空气中的杂质污染，有效的提高了干细胞诱导分化产物的产品质量；同时通过过滤板和电热管的交错设计，使得电热管在加热空气的同时对过滤板进行加热，使得空气在加热箱内的加热区域更大，从而提高了空气的加热效率，从而有效的提高了热能的利用率，减少了能源的利用率。6.通过清洗泵将清洗液箱内的清洗液运输到送液管内部，通过上喷淋管和下喷淋管将清洗液喷洒到切割板、横向切割辊和纵向切割辊上对其进行清洗，通过环形喷淋管将清洗液喷洒到分散罐内部对其进行清洗，从而确保了安装箱内部的清洁度，同时优化了设备内部各组件的清理过程；同时通过限位侧板和隔离斜板的设计，对安装箱内部进行分割，使限位侧板顶部的清理废液从排液槽口进入到收集平盒内，而分散罐内部的清理废液从分散罐底部的导液锥管排出后，会通过排液圆孔进入到收集底本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、混合溶液制备：首先将用于提取干细胞的组织样本从放样口(3)放入到安装箱(2)内，从而通过预处理机构(5)将样本清洗并切割为小块组织，接着通过细胞分散机构(7)将组织块分散为单个细胞结构，然后通过隔离清理机构(8)将混合溶液注入到收集试管(914)；/nS2、干细胞分离：将收集试管(914)放入到离心机内进行离心处理，使收集试管(914)内的组织细胞和干细胞分层，然后通过注射器将干细胞从收集试管(914)内抽出；/nS3、原代培养：将离心得到的干细胞接种到相应的培养基内进行原代培养；/nS4、传代培养：将原代培养得到干细胞接种到新的培养基进行培养；/nS5、定向诱导分化：向培养基内加入相应的诱导分化的试剂，使干细胞进行定向分化；/nS6、分化细胞鉴定：对分化得到的细胞进检测，从而得到相应的细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、混合溶液制备：首先将用于提取干细胞的组织样本从放样口(3)放入到安装箱(2)内，从而通过预处理机构(5)将样本清洗并切割为小块组织，接着通过细胞分散机构(7)将组织块分散为单个细胞结构，然后通过隔离清理机构(8)将混合溶液注入到收集试管(914)；
S2、干细胞分离：将收集试管(914)放入到离心机内进行离心处理，使收集试管(914)内的组织细胞和干细胞分层，然后通过注射器将干细胞从收集试管(914)内抽出；
S3、原代培养：将离心得到的干细胞接种到相应的培养基内进行原代培养；
S4、传代培养：将原代培养得到干细胞接种到新的培养基进行培养；
S5、定向诱导分化：向培养基内加入相应的诱导分化的试剂，使干细胞进行定向分化；
S6、分化细胞鉴定：对分化得到的细胞进检测，从而得到相应的细胞。


2.根据权利要求1所述的一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，所述安装箱(2)底端固定连接有安装底板(1)，所述安装箱(2)顶端中部开设有放样口(3)，所述安装箱(2)正面底部开设有取样口(4)，所述安装箱(2)内侧顶部设置有预处理机构(5)；
所述预处理机构(5)包括安装横板(501)、冲洗液箱(502)、冲洗泵(503)、冲洗方形管(504)、水平伸缩杆(505)、冲洗盒(506)、冲洗槽(507)、收集孔(508)、回流软管(509)、细胞滤网(510)、切割板(511)、切割电机(512)、横向切割辊(513)、纵向切割辊(514)、清理梳(515)、驱动齿轮(516)、传动齿轮(517)、溶液箱(518)、溶液泵(519)和布液横管(520)；
所述安装箱(2)内侧顶部一侧通过螺钉安装有安装横板(501)，所述安装横板(501)顶端固定安装有冲洗液箱(502)，所述洗液箱(502)一侧面底部对应安装箱(2)外部一侧位置处通过管道连接有冲洗泵(503)，所述冲洗泵(503)的输入端与外部电源的输出端电性连接，所述冲洗泵(503)顶部对应安装箱(2)内侧顶端位置处固定安装有冲洗方形管(504)；
所述安装箱(2)内侧对应冲洗液箱(502)顶部两侧对称固定安装有水平伸缩杆(505)，位于所述安装箱(2)内部两侧的水平伸缩杆(505)末端均固定安装有冲洗盒(506)，所述冲洗盒(506)顶端设置有冲洗槽(507)，所述冲洗槽(507)底端边部均匀开设有收集孔(508)，两个所述冲洗盒(506)底端中部分别通过回流软管(509)连接到冲洗液箱(502)两侧，所述冲洗液箱(502)内侧中部固定安装有细胞滤网(510)；
所述安装箱(2)内侧对应冲洗盒(506)顶部位置处固定安装有切割板(511)，所述安装箱(2)背面对应切割板(511)一侧固定安装有切割电机(512)，所述切割电机(512)输入端与外部电源的输出端电性连接，所述切割电机(512)的输出轴一端对应切割板(511)一侧位置处固定连接有横向切割辊(513)，所述安装箱(2)内侧对应横向切割辊(513)底部位置处转动连接有纵向切割辊(514)，所述安装箱(2)内部对应纵向切割辊(514)一侧位置处固定连接有清理梳(515)；
所述横向切割辊(513)和纵向切割辊(514)外侧靠近切割电机(512)的一端均套接有驱动齿轮(516)，所述安装箱(2)内侧对应两个驱动齿轮(516)之间位置处转动连接有传动齿轮(517)；
所述安装箱(2)背面中部固定安装有溶液箱(518)，所述溶液箱(518)顶端通过管道连接有溶液泵(519)，所述溶液泵(519)的输入端与外部电源的输出端电性连接，所述溶液泵(519)顶部对应切割板(511)顶端位置处固定连接有布液横管(520)。


3.根据权利要求2所述的一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，所述冲洗方形管(504)内侧对应冲洗槽(507)顶部位置处均固定连接有喷液头，所述喷液头指向冲洗槽(507)底部，两个所述冲洗盒(506)之间紧密贴合且侧面均设置有密封胶条，所述冲洗槽(507)底面为中间高两侧低的弧形结构；
所述纵向切割辊(514)上的切割刃与清理梳(515)上的梳齿之间交错分布，且梳齿的宽度尺寸小于两个切割刃之间的距离尺寸，所述传动齿轮(517)分别与两个驱动齿轮(516)相啮合；
所述布液横管(520)靠近横向切割辊(513)的一侧均匀设置有溶液喷头，所述溶液喷头的出口指向切割板(511)顶部斜面。


4.根据权利要求2所述的一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，所述安装箱(2)内侧对应切割板(511)底部位置处焊接有导料斗(6)，所述安装箱(2)内侧对应导料斗(6)底部位置处设置有细胞分散机构(7)；
所述细胞分散机构(7)包括支撑横板(701)、垂直伸缩杆(702)、支撑座(703)、隔热箱(704)、步进电机(705)、分散罐(706)、导料圆顶(707)、搅拌板(708)、密封弹簧(709)、升降环(710)、导液锥管(711)、通液方孔(712)、驱动弹簧(713)、支撑圆块(714)、定位圆孔(715)和限位扁块(716)；
所述安装箱(2)内侧对应导料斗(6)底部位置处固定连接有支撑横板(701)，所述支撑横板(701)顶端中部固定连接有垂直伸缩杆(702)，所述垂直伸缩杆(702)顶端中部固定连接有支撑座(703)，所述支撑座(703)顶端边部固定安装有隔热箱(704)，所述支撑座(703)顶端对应隔热箱(704)内侧位置处固定安装有步进电机(705)，所述步进电机(705)的输入端与外部电源的输出端电性连接，所述步进电机(705)输出轴顶部通过螺栓固定安装有分散罐(706)，所述分散罐(706)内侧中部套接有导料圆顶(707)，所述分散罐(706)内侧圆周方向均匀固定安装有搅拌板(708)；
所述分散罐(706)底端边部圆周方向均匀固定连接有密封弹簧(709)，所述密封弹簧(709)底端固定连接有升降环(710)，所述升降环(710)顶端对应密封弹簧(709)一侧位置处均匀固定连接有限位扁块(716)，所述升降环(710)顶端对应限位扁块(716)一侧位置处均匀固定连接有导液锥管(711)，所述导液锥管(711)顶部直筒段圆周方向均匀开设有通液方孔(712)；
所述升降环(710)底端圆周方向均匀固定连接有驱动弹簧(713)，所述驱动弹簧(713)底端固定连接有支撑圆块(714)，所述支撑横板(701)顶端对应导液锥管(711)底端位置处均匀开设有定位圆孔(715)，所述定位圆孔(715)的直径大于导液锥管(711)外径；
所述导液锥管(711)贯穿分散罐(706)底部，且导液锥管(711)顶端平面与分散罐(706)内侧底端平面齐平。


5.根据权利要求4所述的一种干细胞诱导分化的培养方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙震颖，
申请(专利权)人：孙震颖，
类型：发明
国别省市：广东;44