【技术实现步骤摘要】
一种干细胞高密度培养方法
本专利技术涉及细胞培养领域,具体涉及一种可以促进干细胞增殖、避免细胞老化的干细胞高密度培养方法。
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞,具有再生各种组织器官和人体组织的潜在功能,医学界称为″万用细胞″,诸多研究表明干细胞有望成为治疗人类疑难疾病的有效手段。另一方面,虽然干细胞在正常成体组织中含量甚微,但广泛分布于哺乳动物的各个组织器官,这些组织或器官包括但不局限于骨髓、脐带、脂肪组织、脑组织、视网膜、心脏、肝脏、肺以及皮肤等。大量研究表明,这些低含量的干细胞可在体外通过适当的方法进行进一步扩增,因此,在体外如何快速扩增与培养干细胞是研究干细胞的作用机制及探索其在治疗人类疾病治疗方法中的重要技术。目前,最常规的干细胞体外培养的方法就是将干细胞加入添加有胎牛血清的培养基中进行培养。然而,采用这种培养基培养的干细胞,所含营养成分、促生长成分不足或浓度设置不合理,导致干细胞生长比较缓慢,而且传递次数超过5代之后其分化成功能细胞的潜能大大降 ...
【技术保护点】
1.一种干细胞高密度培养方法,其特征在于,包括如下步骤:/nS1,采用质量浓度为0.3-0.5%的包被液包被培养皿;/nS2,在培养皿中加入培养基,并在湿度95%、5%CO
【技术特征摘要】
1.一种干细胞高密度培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1,采用质量浓度为0.3-0.5%的包被液包被培养皿;
S2,在培养皿中加入培养基,并在湿度95%、5%CO2的培养箱中于37℃温育平衡30分钟,所述培养基由基础培养基和添加剂组成,所述基础培养基为10%FBS的DMEM/F12的培养液,所述添加剂为:转铁蛋白、成纤维细胞生长因子、谷氨酰胺;
S3,调节培养基的pH至7.0,在培养皿中接种预先处理后的干细胞,放置于37℃、5%CO2培养箱培养3-5天,期间每需要24小时更换一次培养基。
2.根据权利要求1所述的一种干细胞高密度培养方法,其特征在于,在步骤S1中,所述包被液主要成分选自胶原蛋白、明胶、多聚赖氨酸、层粘连蛋白、玻表粘连蛋白的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的一种干细胞高密度培养方法,其特征在于,所述包被液为质量浓度0.4%的明胶溶...
【专利技术属性】
技术研发人员:牟浩,郭巧,王熙凯,
申请(专利权)人:中康再生医学科技海南有限公司,
类型:发明
国别省市:海南;46
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