一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法技术

本发明专利技术涉及尿液分析检测领域，具体涉及一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法。本发明专利技术的目的是解决现有的检测方法测试含抗坏血酸的样本易出现假阴性的问题，而提供一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法，本发明专利技术提供的尿潜血检测试纸，包括支撑层和固定在支撑层上的检测试剂块，该检测试剂块是将滤纸先经过浸液A浸湿干燥后，再经过浸液B浸湿干燥后得到的，本发明专利技术提供的尿潜血检测试纸使得抗坏血酸浓度不高于5.0mmol/L时，尿潜血检测没有干扰，临床上不出现假阴性结果。

【技术实现步骤摘要】
一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法
本专利技术涉及尿液分析检测领域，具体涉及一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法。
技术介绍
尿潜血（尿隐血）是指尿液中存在肉眼观察不到的潜在的红细胞。正常人尿液中无红细胞或偶有微量红细胞，每高倍镜视野0～2个，在剧烈运动、重体力劳动或久站后，尿中可出现一过性微量红细胞，这种情况属正常没有临床意义。但是如果尿液中经常出现较多的红细胞则提示异常，应密切加以检查，血尿绝大多数是由于泌尿系统本身疾病所致。尿红细胞增加是一个危险的信号，尿红细胞增多常见的原因有结核、肿瘤、外伤、急性肾盂肾炎、泌尿系结石、急性肾小球炎、慢性肾炎等，因此建立准确、灵敏、快速的尿红细胞检测方法对潜在的泌尿系统肿瘤、肾功能病变以及尿毒症患者的及时、准确的诊断具有重要的意义。对于尿潜血的检测主要有三种方式，分别为显微镜检查、干化学尿液分析仪、尿红细胞检测方法，主要采用显微镜检查、干化学尿液分析仪、流式细胞尿液分析仪等方法进行检测。其中干化学检测是通过其颜色的变化对样品进行定性和半定量测定，与其它方法比较，干化学法操作简单，成本低廉，出结果迅速，不需要专业人士即可操作，实用性广泛。干化学检测主要原理是利用血红蛋白中的亚铁血红素的假过氧化物酶活性催化分解过氧化物，产生新生态的氧，氧化指示剂，使指示剂显色，从显色的强度可以得知尿液中血的浓度。基于氧化还原原理的尿潜血检测方法，存在一定的干扰因素，当样本中存在某些氧化性污染物，会影响氧化还原反应的进行，例如次氯酸盐会导致测试结果出现假阳性。伴随尿道感染而出现的分泌物也会引起假阳性结果，干扰临床诊断结果。强还原剂抗坏血酸（VC）是尿潜血检测过程中主要的干扰因素，VC因其具有强还原性可与反应体系中的过氧化氢竞争与色源底物发生反应，使得检测结果偏低；另外临床尿液样本中，由于患者饮食或服用药物等因素，会造成尿液中含有大量的VC。综上所述，在尿潜血检测中VC是很主要的干扰因素，其存在直接影响检测结果的准确性，因此解决VC的干扰作用对于提高临床检测的准确性是至关重要的。为解决尿潜血试纸的VC干扰问题，尝试了各种解决办法。公开号为CN106198527的专利中写明在试纸中加入碘酸钾可提高其抗VC干扰能力，但是碘酸钾与缓冲液中的磷酸二氢钾会发生反应，试纸外观会出现灰绿色斑点，影响实验结果及试纸显色。除此之外，在尿试纸检测项目中加入VC检测项目，对尿液中VC含量进行测定，进而以此为基础对尿潜血测值进行评估，以判定试纸测值是否存在试纸测值偏低或假阴性现象。但此方法并不能提升尿潜血试纸的检测性能，因此提高尿潜血试纸块的抗VC干扰能力对准确的评估被检样本中的尿潜血含量是至关重要的，也是目前急需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有的检测方法测试含抗坏血酸的样本易出现假阴性的问题，而提供一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸及其制备方法。本专利技术提供的尿潜血检测试纸使得抗坏血酸浓度不高于5.0mmol/L时，尿潜血检测没有干扰，临床上不出现假阴性结果。本专利技术提供一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸，包括支撑层和固定在支撑层上的检测试剂块，所述的检测试剂块是将滤纸先经过浸液A浸湿干燥后，再经过浸液B浸湿干燥后得到的：所述的浸液A包括：缓冲液、表面活性剂A、强氧化剂；所述的缓冲液的体积(ml):表面活性剂A的质量(mg):强氧化剂的质量(mg)为(300～350):(65～70):(80～90)；所述的浸液B包括：表面活性剂B、色原、过氧化物、敏化剂、染料、乙醇；所述的浸液B中的表面活性剂B的质量(g):色原的质量(g):过氧化物的体积(ml):敏化剂的体积(ml):染料的质量(mg):乙醇的体积(ml)为(10～12):(0.1～0.7):(0.1～0.5):(12～14):(110～120):(350～450)。按照本专利技术，所述的缓冲液包括磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，更优选为柠檬酸盐缓冲液，最优选为柠檬酸和柠檬酸钠。所述的柠檬酸的浓度优选为0.01-0.07mmol/L，柠檬酸钠的浓度优选为1-4mmol/L；所述的缓冲液的PH优选为6.2～7.3。按照本专利技术，所述的表面活性剂A和表面活性剂可以相同也可以不同，优选为十二烷基硫酸钠或聚乙烯吡咯烷酮，更优选为十二烷基硫酸钠。按照本专利技术，所述的强氧化剂优选为碘酸盐，更优选为碘酸钾。按照本专利技术，所述的色原优选为四甲基联苯胺及其衍生物，更优选为3,3',5,5'-四甲基联苯胺。按照本专利技术，所述的过氧化物更优选为二叔丁基过氧化异丙基苯。按照本专利技术，所述的敏化剂优选为喹啉及其衍生物，更优选为6-甲氧基喹啉或3-甲氧基喹啉。在本专利技术中，为了使试纸显色明显，在浸液B中添加黄色系染料，更优选为肼黄、日落黄或橙黄G中的一种或几种组合。本专利技术还提供一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸的制备方法，该方法包括：步骤一：将膜材料浸入检测试剂A中，浸渍5-30秒后取出放入65-95℃的烘箱中进行首次烘干，时间为25-40分钟；步骤二：将烘干后的膜材料浸入检测试剂B中，浸渍5-30秒后取出放入45-65℃的烘箱中进行再次烘干，时间为10-20分钟；步骤三：将第二次干燥后的滤纸与基板固定，得到一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸。所述试纸抗坏血酸干扰性能验证方法为：配制两组具有浓度梯度的尿潜血标准液，在其中一组每梯度添加5.0mmol/L的抗坏血酸，对试纸条进行测试，用尿液分析仪进行判读，结果两组测值偏差不超过一梯度。本专利技术的有益效果本专利技术提供抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸，其技术关键点是利用通过将试纸浸入到由缓冲液、强氧化剂、表面活性剂、色原、过氧化物、敏化剂、染料和乙醇组成的浸液，得到可以显著提高尿潜血检测试纸抗VC干扰能力，增强检测结果的灵敏度和准确性的尿液潜血试纸。使尿潜血检测结果不受浓度为5.0mmol/L以下抗坏血酸的干扰。本专利技术提供的抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸的制备方法，性能稳定，适应性广泛，可排除由于患者饮食或服用药物等因素造成病人尿液样本含有中5.0mmol/L以下抗坏血酸的干扰，测试结果准确。具体实施方式以下通过具体实施例进一步对本专利技术进行阐述，实施例的具体细节仅用于解释本专利技术，不应理解为对本专利技术总的技术方案的限定。实施例1配制浸液A：柠檬酸0.03g，柠檬酸钠1.5g，纯化水50mL，十二烷基硫酸钠0.8g，碘酸钾0.9g。配制浸液B：乙醇200mL，十二烷基硫酸钠8g，3,3',5,5'-四甲基联苯胺1.5g，二叔丁基过氧化异丙基苯1.0g，6-甲氧基喹啉6mL,肼黄170mg，橙黄G70mg。将A液和B液配制完成，先将滤纸充分浸入浸渍液A液后取出，于70℃条件下干燥30分钟，然后将干燥后的滤纸浸入B液于60℃条件下干燥10分钟，将干燥后的滤纸与基板固定，裁成矩形纸条，得到一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸1。将制备所得的试纸1，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸，包括支撑层和固定在支撑层上的检测试剂块，所述的检测试剂块是将滤纸先经过浸液A浸湿干燥后，再经过浸液B浸湿干燥后得到的：/n所述的浸液A包括：缓冲液、表面活性剂A、强氧化剂；所述的缓冲液的体积(ml):表面活性剂A的质量(mg):强氧化剂的质量(mg)为(300～350):(65～70):(80～90)；/n所述的浸液B包括：表面活性剂B、色原、过氧化物、敏化剂、染料、乙醇；所述的浸液B中的表面活性剂B的质量(g):色原的质量(g):过氧化物的体积(ml):敏化剂的体积(ml):染料的质量(mg):乙醇的体积(ml)为(10～12):(0.1～0.7):(0.1～0.5):(12～14):(110～120):(350～450)。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗坏血酸干扰的尿潜血检测试纸，包括支撑层和固定在支撑层上的检测试剂块，所述的检测试剂块是将滤纸先经过浸液A浸湿干燥后，再经过浸液B浸湿干燥后得到的：
所述的浸液A包括：缓冲液、表面活性剂A、强氧化剂；所述的缓冲液的体积(ml):表面活性剂A的质量(mg):强氧化剂的质量(mg)为(300～350):(65～70):(80～90)；
所述的浸液B包括：表面活性剂B、色原、过氧化物、敏化剂、染料、乙醇；所述的浸液B中的表面活性剂B的质量(g):色原的质量(g):过氧化物的体积(ml):敏化剂的体积(ml):染料的质量(mg):乙醇的体积(ml)为(10～12):(0.1～0.7):(0.1～0.5):(12～14):(110～120):(350～450)。


2.根据权利要求1，所述的缓冲液包括磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，更优选为柠檬酸盐缓冲液，最优选为柠檬酸和柠檬酸钠。


3.所述的柠檬酸的浓度优选为0.01-0.07mmol/L，柠檬酸钠的浓度优选为1-4mmol/L；所述的缓冲液的PH优选为6.2～7.3。


4.根据权利要求1，所述的表面活性剂A和表面活性剂可以相同也可以不同，优选为十二烷基硫酸钠或聚乙烯吡咯烷酮，更优选为十二烷基硫酸钠。


5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘潇璐，徐李鹏，刘玲，
申请(专利权)人：吉林基蛋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22