尿液分析校准品以及抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用制造技术

本发明专利技术涉及抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用，另外本发明专利技术还提供了一种尿液分析校准品，包括如下组分：抗坏血酸氧化酶0.1～1%w/v、尿素0.05～0.25%w/v、醋酸钠0.05～0.45%w/v、表面活性剂0.5～100mg/L、防腐剂0.5～250mg/L，余量为水。本发明专利技术将抗坏血酸氧化酶应用于尿液分析校准品中，与配方中的其他物质相互配合，极大的提高了精确度，并且重复性好，极大的提高了检测结果的准确性。极大的提高了检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
尿液分析校准品以及抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用


[0001]本专利技术涉及尿液检测领域，具体涉及一种尿液分析校准品以及抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用。

技术介绍

[0002]校准品是用于体外诊断仪器或检测系统的测量标准物质，是实现体外诊断试剂临床检测及监督检验结果一致的主要工具，也是保证量值传递的实物计量标准。在用试纸条检测尿液样本前，要对仪器和试纸条采用校准品进行校准。而现有的用于尿液分析的校准品精确度较低，导致检测结果不准确。

技术实现思路

[0003]本专利技术克服了现有技术中的不足，在于提供一种精确度高的尿液分析校准品。
[0004]本专利技术的具体技术方案如下：抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用。
[0005]一种尿液分析校准品，包括如下组分：抗坏血酸氧化酶0.1～1% w/v、尿素0.05～0.25%w/v、醋酸钠0.05～0.45%w/v、表面活性剂0.5～100mg/L、防腐剂0.5～250mg/L，余量为水。
[0006]优选的，所述表面活性剂选自吐温系列、曲拉通系列中的一种。
[0007]优选的，所述防腐剂选自乳酸钠、叠氮钠、牛白蛋白、PC300、甘露醇中的一种。
[0008]优选的，所述抗坏血酸氧化酶采用如下方法制备而成：（1）将新鲜植物茎叶清洗干净，经离心、过滤后，所得滤液进行静置；（2）取上清液进行盐析，获得沉淀物，沉淀物溶于缓冲溶液后进行离心、过滤；（3）步骤（2）所得滤液中加入稳定剂，然后冻干，制得抗坏血酸氧化酶。
[0009]优选的，步骤（1）中，于5000～11000r/min条件下离心15～45min，过滤后，所得滤液进行静置40～50h。
[0010]优选的，步骤（2）中，沉淀物溶于TRIS/PBS缓冲液中、搅拌溶解16h～30h后，常温放置16～30h，使得沉淀物更好的溶解并便于杂质析出；然后于5000～11000r/min条件下离心15～45min，过滤。沉淀物溶于TRIS/PBS缓冲液时，对沉淀物的浓度没有特别要求，只要保证沉淀物全部溶解即可。
[0011]优选的，步骤（3）中，稳定剂的加入量占滤液质量的1～5%，冻干温度为
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40～
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60℃，冻干时间为36～60h；冻干时间太短的话冻干不充分活性低，时间过长会导致冻干性状发生改变。
[0012]优选的，所述新鲜植物茎叶选自南瓜、冬瓜、辣根中的一种，所述稳定剂选自蔗糖、甘露醇、海藻糖、葡萄糖、叠氮钠、AES中的一种或两种以上任意比例混合。
[0013]优选的，所述盐析用的盐选自氯化钠、硫酸铵、氯化钙、氯化镁中的一种或两种以
上任意比例混合，盐析时盐的浓度为0.1～226g/L；更优选的，盐析时盐的浓度为40～226g/L。
[0014]本专利技术所述的抗坏血酸氧化酶制备方法操作简便、成本低，利用盐析法得到的抗坏血酸氧化酶其纯度达到70
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80%.，可以应用于尿液分析校准品中。
[0015]本专利技术将抗坏血酸氧化酶应用于尿液分析校准品中，与配方中的其他物质相互配合，极大的提高了精确度，并且重复性好，极大的提高了检测结果的准确性。
具体实施方式
[0016]下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0017]实施例1一种抗坏血酸氧化酶的制备方法，包括如下步骤：（1）准备新鲜南瓜茎叶（生长周期1个月，收取1
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3小时以内）；（2）将新鲜南瓜茎叶用4℃的纯化水反复冲洗5次，然后除去根部、花朵、果实等杂质，保留南瓜茎叶；（3）将步骤（2）得到的南瓜茎叶于11000r/min条件下离心35min，滤布过滤，所得滤液常温静置48h；（4）取步骤（3）得到的上清液采用氯化钠进行盐析，氯化钠的浓度为58.44g/L，获得沉淀物，沉淀物溶于TRIS/PBS缓冲液中、利用磁力搅拌器对其进行搅拌溶解16h，常温放置16h；然后于10000r/min条件下离心35min，过滤；（5）步骤（4）所得滤液中加入占滤液质量1%的海藻糖、占滤液质量1.5%的甘露醇，然后于
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50℃条件下冻干50h，制得抗坏血酸氧化酶。
[0018]一种尿液分析校准品，包括如下组分：前述制得的抗坏血酸氧化酶0.80%w/v、尿素0.09%w/v、醋酸钠0.4%w/v、曲拉通X
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100 3 mg /L、PC300 0.5 mg /L。
[0019]配制校准品的具体操作为：量取900ml纯化水于烧杯中，分别加入尿素、醋酸钠，前述制得的抗坏血酸氧化酶，搅拌溶解；再加入曲拉通X
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100、PC300搅拌混匀，加入纯化水定容至1L得到尿液分析校准品。
[0020]校准品在尿液分析仪上的应用测试校准品：实施例1制得的尿液分析校准品、试纸条（由长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产）。
[0021]测试仪器：迪瑞H
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300尿液分析仪具体操作为，设置参数，将校准品进行梯度稀释，使用尿液分析试纸条分别测试梯度样本中抗坏血酸氧化酶含量，以波长的大小检测，阴性、阳性的形式表现。
[0022]标准曲线的设定：分别将已知阴、阳性范围的尿试纸（），即：
“‑”“
+”“2+”“3+”放在尿液分析仪中，设置参数，得到以下数据。
[0023]表1（实施例1）原液0.52.05.010水9.58.05.00
测值
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+2+3+表2（已知尿试纸）原液0.52.05.010水9.58.05.00测值
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+2+3+取30例不同尿试纸对实施例1和已知尿试纸平行进行检测，得到以下数据（表3）。
[0024]表3尿液编号实施例1已知尿试纸尿液1++尿液2
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尿液3++尿液42+2+尿液5++尿液6++尿液7++尿液8
‑‑
尿液9
‑‑
尿液10
‑‑
尿液112+2+尿液12++尿液133+3+尿液142+2+尿液15++尿液16
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尿液17
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尿液18
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尿液192+2+尿液20
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尿液21++尿液22
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尿液232+2+尿液24
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尿液252+2+尿液26++尿液27++尿液282+2+尿液29++尿液303+3+表3的结果表明，实施例1制得的尿液分析校准品与已知尿试纸测值一致。
[0025]校准尿液分析仪，检测同一尿液样本，反复校准10次，通过检测10次的结果观察重复性。结果见表4。
[0026]表4从表4数据可以看出，实施例1对同一样本的测定结果，重复性和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗坏血酸氧化酶在尿液分析校准品中的应用。2. 一种尿液分析校准品，其特征在于包括如下组分：抗坏血酸氧化酶0.1～1% w/v、尿素0.05～0.25%w/v、醋酸钠0.05～0.45%w/v、表面活性剂0.5～100mg/L、防腐剂0.5～250mg/L，余量为水。3.根据权利要求2所述的尿液分析校准品，其特征在于，所述表面活性剂选自吐温系列、曲拉通系列中的一种。4.根据权利要求2所述的尿液分析校准品，其特征在于，所述防腐剂选自乳酸钠、叠氮钠、牛白蛋白、PC300、甘露醇中的一种。5.根据权利要求2所述的尿液分析校准品，其特征在于，所述抗坏血酸氧化酶采用如下方法制备而成：（1）将新鲜植物茎叶清洗干净，经离心、过滤后，所得滤液进行静置；（2）取上清液进行盐析，获得沉淀物，沉淀物溶于缓冲溶液后进行离心、过滤；（3）步骤（2）所得滤液中加入稳定剂，然后冻干，制得抗坏血酸氧化酶。6.根据权利要求5所述的尿液分析校准品，其特征在于，步骤（1）中，于5000～11000r...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐李鹏，刘玲，倪志华，李昊，尹志超，
申请(专利权)人：吉林基蛋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：