【技术实现步骤摘要】
一种家蚕血液型脓病的智能检测系统及方法
本专利技术属于家蚕疾病检测
,尤其涉及一种家蚕血液型脓病的智能检测系统及方法。
技术介绍
目前,养蚕后特别是发生过脓病的蚕室、蚕具等,如不经消毒重复使用,则容易导致传染而发病。养蚕室、簇室、贮桑室等,如消毒不彻底,都能成为病毒传染来源。不洁水源若来源于洗过蚕具的塘水,未经消毒即用作蚕室和贮桑室用水,同样可以成为传染源。病毒传染的主要途径有食下传染和创伤传染2种。病蚕流出的浓汁或病蚕尸体,发现尚未流出浓汁的病蚕,如立即拾除,可消灭再传染的机会;病蚕排出的蚕粪中带有大量病毒,会污染蚕座内的桑叶,造成蚕座内的传染,使病毒迅速蔓延。病毒经食下或创伤侵入蚕体后,能否引起发病及发病率高低与蚕体本身的许多因素及环境条件有密切关系。蚕体对疾病的抵抗能力一方面取决于自身遗传基因,另一方面也受到生长发育过程中周边环境的影响。为了检测血液型脓病,家蚕血液型脓病的智能检测系统发挥着关键性的作用。但是现有技术中室内多品种家蚕血液型脓病的智能试验过程中,易受到外部因素的影响,降低检测的结果。同时现有技术中室 ...
【技术保护点】
1.一种家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,所述家蚕血液型脓病的智能检测方法包括:/n步骤一,剪去蚕的尾角或腹足,制作血液样本,对蚕的尾角或腹足进行研磨,滴入相应的溶液,再进行精细研磨检测样品;/n步骤二,将制作完成的检测样品放置在专门的温度调节保温箱内部,分成3份,一份作为检测样品,另两份作为备用样品;/n步骤三,利用电子显微镜获取检测样品的样品图像,并对所获取的检测样品图像进行处理;/n步骤四,将一份备用样品加入少量磷酸缓冲液过滤,滤液使用差速离心法反复离心至乳白色,收集沉淀,用少量的PBS悬浮静置;/n步骤五,溶于适量TE中,加入等体积碱解液,37℃碱解4h;1 ...
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,所述家蚕血液型脓病的智能检测方法包括:
步骤一,剪去蚕的尾角或腹足,制作血液样本,对蚕的尾角或腹足进行研磨,滴入相应的溶液,再进行精细研磨检测样品;
步骤二,将制作完成的检测样品放置在专门的温度调节保温箱内部,分成3份,一份作为检测样品,另两份作为备用样品;
步骤三,利用电子显微镜获取检测样品的样品图像,并对所获取的检测样品图像进行处理;
步骤四,将一份备用样品加入少量磷酸缓冲液过滤,滤液使用差速离心法反复离心至乳白色,收集沉淀,用少量的PBS悬浮静置;
步骤五,溶于适量TE中,加入等体积碱解液,37℃碱解4h;10%HAc调pH值至7~8;加SDS和蛋白酶K至终浓度分别为0.5%100μg/mL,37℃水浴3h;
步骤六,加1/10体积的3mol/L醋酸钠溶液;加3倍体的冰乙醇沉淀DNA,漂洗、风干后的基因组DNA溶于TE,贮存备用;
步骤七,在不同浓度的反应组分和不同反应时间条件下,在实时浊度仪中进行LAMP反应,每隔6s测定1次浊度值,根据浊度值绘制浊度变化曲线,当浊度值大于0.25即可判为阳性;
步骤八,根据家蚕血液型脓病试验获取的图像样本对检测样品图像进行识别,对检测输出的样品结果进行输出,若检测血液样本出现六角形,大小均匀,折光性较强,则判定为家蚕血液型脓病;
步骤九,通过利用扬声器,用以对结果和实验操作过程,进行提示播音;通过显示器,显示出检测过程中有关的数据;
步骤十,通过数据储存模块对图像进行分类存储,并通过信号传输模块与云服务器连接,实现数据的传输、下载和共享。
2.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,步骤一中,精细研磨采用的具体方法为:
将粗磨完成的家蚕血液型脓病检测样品放置在研磨槽中,将研磨棒垂直放置;
手持中间位置,顺时针研磨三圈,逆时针研磨三圈,不断重复操作;
在研磨过程中,不断对研磨的检测样品进行观察。
3.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,步骤三中,对所获取的检测样品图像进行处理的具体过程为:
获取相应的样品图像检测去噪训练样本,确定样品图像中的圆形邻域;
计算圆形邻域样品图像的灰度值,并对灰度值进行排序,取其中间值作为中心像素灰度的新值;
通过圆形邻域对整体图像进行平滑处理。
4.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,步骤六中,冰乙醇沉淀DNA时为-20℃沉淀,过夜;然后利用预冷的75%乙醇漂洗2次,风干后的基因组DNA溶于TE,-20℃贮存备用。
5.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,步骤七中,不同浓度的反应组分为2~12mmol/LMgSO4、0.2~1.2mol/LBetaine和0.6~1.6mmol/LdNTPs;
不同反应时间为20min、40min、60min和80min。
6.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法,其特征在于,所述数据储存模块对图像进行分类存储的方法为:
技术研发人员:孙运朋,任晓晓,杨万军,卿卓,罗朝斌,
申请(专利权)人:贵州省蚕业研究所贵州省辣椒研究所,
类型:发明
国别省市:贵州;52
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