一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法技术

本公开公开一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法，具体涉及间充质干细胞抗衰应用领域；一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法包括破碎器具、破碎方法、充质干细胞培养方法；通过在充质干细胞上施加剪切力，来使充质干细胞的细胞膜和细胞壁发生破碎，从而使位于细胞膜和细胞核之间的包浆流出；通过在将间充质干细胞置于容器内，并用搅拌棒对其进行搅拌，来实现对间充质干细胞的破碎；通过将提取出来的包浆置于培养基中，来加速间充质干细胞的分化速度和活性；通过将造血干细胞和间充质干细胞共同输入人体内，提高移植的成功率，加速造血重建。

【技术实现步骤摘要】
一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法
本公开属于间充质干细胞抗衰应用领域，具体涉及一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法。
技术介绍
随着现在科技的不断发展，干细胞研究越来越深入，干细胞研究促进了再生医学的发展，这是继药物治疗和手术治疗之后的有一场医疗革命；人体的干细胞种类较多，其中间充质干细胞对皮肤抗衰老具有显著的效果；间充质干细胞是属于中胚层的一类多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量最为丰富，由于骨髓是其主要来源，因此统称为骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞具有以下特性：一、具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。二、具有免疫调节功能，通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应，从而发挥免疫重建的功能。三、具有来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，不存在免疫排斥的特性。四、面目模糊，表面抗原不明显，异体移植排异较轻，配型要求不严格。正是由于间充质干细胞所具备的这些免疫学特性，使其在血液病治疗方面具有广阔的临床应用前景。通过自体移植可以重建组织器官的结构和功能，并且可避免免疫排斥反应。细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁。常见的细胞破碎方法包括机械破碎、化学破碎和超声波破碎。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本公开的目的在于提供一种基于间充质干细胞破碎胞浆的皮肤抗衰方法，解决了现有技术中间充质干细胞培养分化速度不足的问题。本公开的目的可以通过以下技术方案实现：一种基于间充质干细胞破碎包浆的皮肤抗衰方法，包括间充质干细胞破碎方法，所述间充质干细胞破碎方法为：通过在间充质干细胞充质干细胞细胞膜上施加挤压力和剪切力，包浆沿着剪切力的方向破碎而出。进一步的，完成所述充质干细胞破碎方法的器具包括：搅拌棒和容器；进一步的，所述搅拌棒下端部设置有外球体，所述容器下端部设置有内球面，外球体与内球面相匹配。进一步的，所述间充质干细胞的培养方法包括：S1：准备明胶包被培养板；S2：将从液氮中取出的冻存管快速浸入37℃温水中,快速摇动,使其在1～2min内快速解冻；S3：离心：将其逐滴加入含有干细胞培养基的15mL离心管中，1000rpm离心3min，培养基中包括血清间充质干细胞破碎得到的包浆；S4：重悬：离心后弃上清加1mL人多能干细胞培养基对干细胞沉淀进行吹吸混匀；S5：接种：吹吸均匀后，将已经平衡好的即用型明胶弃掉，将吹打均匀的干细胞悬液加入到已经包被好的6孔板中，并补全每孔2mL培养体系；S6：水平十字轻轻晃动6孔板使细胞均匀分布。并置于37℃，5％CO2的恒温培养箱培养，第2天观察细胞贴壁情况；S7：换液：从复苏的时间开始每24h换液一次。进一步的，将所述培养皿中培养出的间充质干细胞与造血干细胞一同输入人体皮肤组织。进一步的，所述明胶包被培养板的制作方法包括：根据实验需要明胶包被液稀释至适当浓度溶液；明胶包被液用于细胞培养时，包被至少5min；包被完成后，吸除明胶包被液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥，通风橱内吹风至少10分钟完成干燥。本公开的有益效果：加快间充质干细胞分化速度。附图说明为了更清楚地说明本公开实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本公开实施例的细胞破碎示意图；图2是本公开实施例的细胞破碎器具示意图。具体实施方式下面将结合本公开实施例中的附图，对本公开实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本公开一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本公开中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本公开保护的范围。一种基于间充质干细胞破碎包浆皮肤抗衰方法包括间充质干细胞破碎方法；细胞破碎是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术，是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质的基础。如图1所示，在本实施例中，采用挤压剪切法对间充质干细胞3进行破碎处理，通过对间充质干细胞3的细胞膜和细胞壁上施加剪切力4，从而时细胞膜和细胞壁沿着剪切力的方向发生破碎，位于细胞膜和细胞核之间的包浆5流出，即完成了对间充质干细胞的破碎和包浆提取。如图2所示，为本实施例中，完成对间充质干细胞的细胞膜和细胞壁破碎的器具，包括搅拌棒1和容器2，搅拌棒1的上端部设置有手柄11，便于对充质干细胞的搅拌工作，搅拌棒1的下端部设置有外球体12，容器2的底部设置有内球面21，搅拌棒1上设置的外球体12与容器2内的内球面21相匹配；当要对间充质干细胞3细胞膜和细胞壁进行破碎时，现将充质干细胞放置在容器2的底部内球面21上，然后将搅拌棒1伸进容器2内，直至搅拌棒1上设置的外球体12与容器2底部的内球面21接触，此时搅动搅拌棒1上端部设置的手柄11，同时对搅拌棒1施加一个朝向外球体12的挤压力，位于容器2底部内球面21上的充质干细胞受到挤压力和剪切力4的作用而发生破碎，使得位于充质干细胞细胞膜和细胞核之间的包浆5流出，进而完成对包浆5的提取。在一些公开中，通过采用化学方法来破坏间充质干细胞3的细胞膜和细胞壁，如酶溶法，使得位于细胞膜和细胞核之间的包浆5流出，这种包浆5的提取方法不唯一，只要能够用实现对包浆5的提取，同时不破坏包浆5中的细胞器即可。间充质干细胞3的培养方法：1、基质胶包被培养板；2、将从液氮中取出的冻存管快速浸入37℃温水中,快速摇动,使其在1～2min内快速解冻；3、离心：将其逐滴加入含有干细胞培养基的15mL离心管中，1000rpm离心3min，培养基中除了包括血清等营养物，还包括间充质干细胞3破碎得到的包浆5；4、重悬：离心后弃上清加1mL人多能干细胞培养基对干细胞沉淀进行吹吸混匀5、接种：吹吸均匀后，将已经平衡好的即用型明胶弃掉，将吹打均匀的干细胞悬液加入到已经包被好的6孔板中，并补全每孔2mL培养体系6、水平十字轻轻晃动6孔板使细胞均匀分布，并置于37℃，5％CO2的恒温培养箱培养，第2天观察细胞贴壁情况；7、换液：从复苏的时间开始每24h换液一次。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于间充质干细胞破碎包浆的皮肤抗衰方法，包括间充质干细胞(3)破碎方法，其特征在于，所述间充质干细胞(3)破碎方法为：通过在间充质干细胞充质干细胞(3)细胞膜上施加挤压力和剪切力(4)，包浆(5)沿着剪切力(4)的方向破碎而出。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于间充质干细胞破碎包浆的皮肤抗衰方法，包括间充质干细胞(3)破碎方法，其特征在于，所述间充质干细胞(3)破碎方法为：通过在间充质干细胞充质干细胞(3)细胞膜上施加挤压力和剪切力(4)，包浆(5)沿着剪切力(4)的方向破碎而出。


2.根据权利要求1所述的一种基于间充质干细胞破碎包浆的皮肤抗衰方法，其特征在于，完成所述充质干细胞(3)破碎方法的器具包括：搅拌棒(1)和容器(2)；
所述搅拌棒(1)下端部设置有外球体(12)，所述容器(2)下端部设置有内球面(21)，外球体(12)与内球面(21)相匹配。


3.根据权利要求1所述的一种基于间充质干细胞破碎包浆的皮肤抗衰方法，其特征在于，所述间充质干细胞(3)的培养方法包括：
S1：准备明胶包被培养板；
S2：将从液氮中取出的冻存管快速浸入37℃温水中,快速摇动,使其在1～2min内快速解冻；
S3：离心：将其逐滴加入含有干细胞培养基的15mL离心管中，1000rpm离心3min；
S4：重悬：离心后弃上清加1mL人多能干细胞培养基对干细胞沉淀...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊志军，刘文，虞炎志，
申请(专利权)人：安徽惠恩生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34