用于确定对金属植入物的可能的不相容性的生物标记物制造技术

本公开涉及一种用于预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的方法。当前公开的目的在于，改善使用金属植入物时可能的并发症的预测。为了实现该目的，本公开提供了一种用于在受测者中预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的方法，其中在包括受测者的遗传物质的离析样品中：a)检查编码白细胞介素1β的基因中的单核苷酸变异rs1143627 AGCCTCCTACTTCTGCTTTTGAAAGC[C/T]ATAAAAACAGCGAGGGAGAACTGG(SEQ ID NO:1)，并且确定单核苷酸变异的位置处是否存在C；和/或b)检查编码IL1受体拮抗剂IL1‑AN的基因中具有重复单元ATCCTGGGGAAAGTGAGGGAAATATGGACATCACATGGAACAACATC‑CAGGAGAC TCAGGCCTCTAGGAGTAACTGGGTAGTGTGC(SEQ ID NO:2)的VNTR多态性rs2234663，并且确定重复单元是否存在五次。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定对金属植入物的可能的不相容性的生物标记物
本公开涉及用于预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的一种方法和一种试剂盒。
技术介绍
植入物例如在矫形外科和牙科领域中起着越来越重要的作用。这种植入物通常由金属(例如纯钛)或者说金属合金制成。然而，随之而来的是植入物不相容反应数量的升高[1-4]。举例而言，甚至例如镍等金属中的微量杂质或者外部材料都会导致炎症反应或者变态反应。巨噬细胞和单核细胞吸收的磨损颗粒或者腐蚀过程也会触发炎症反应。然而，在内假体中也确认了不能归因于诸如腐蚀产物或者磨损产物或者感染等已知原因的并发症。因此，确认了迄今为止令人费解的过度炎症反应，其例如可能伴随有肿胀、关节反复积液、疼痛、行动受限、植入物松动或者失灵。根据JACOBI-GRESSERE.等(《基因和免疫标记物预测钛植入物失灵：回顾性研究》(Geneticandimmunologicalmarkerspredicttitaniumimplantfailure:aretrospectivestudy)；Int.J.OralMaxillofac.Surg.(2013)42(4)537-543)，评估了诊断标记物，以便预言钛植入物的失灵。在109位接受了钛植入物外科手术的受检者中评估植入物结果，其在治疗过程中接受了IL1A-889C/T(rs1800587)、IL1B+3954C/T(rs1143634)、IL1RN+2018T/C(rs419598)和TNFA-308G/A(rs1800629)基因分型、体外-IL-1β/TNF-α释放试验和淋巴细胞转化试验。根据RAMIREZ-PEREZS.等(《白细胞介素-1受体拮抗剂(IL1RN)的86bp可变数目串联重复(VNTR)多态性与类风湿性关节炎的易感性和临床活性的联系》(Associationof86bpvariablenumberoftandemrepeat(VNTR)polymorphismofinterleukin-lreceptorantagonist(IL1RN)withsusceptibilityandclinicalactivityinrheumatoidarthritis)；Clin.Rheumatol.(2017)36(6)1247-1252)，报告了多项研究在包括类风湿性关节炎(RA)风险的IL1RN基因的内含子2中具有可变数量的串联重复单元(VNTR)86bp(rs2234663)。在当前研究中，要在患有RA的患者和对照人员(CS)中确定该多态性的频率并且在西部墨西哥人群中确定其与RA的联系。进行了分析性横断面研究，其中包含了350位患有RA的患者和307位CS。借助于聚合酶链反应(PCR)进行了IL1RNVNTR多态性的鉴定，并且基因型与临床变量(DAS28和CRP)有联系。根据JACOBI-GRESSERE.等(《根据实验室参数预测钛植入物的愈合率——回顾性研究》(PrognosederEinheilquotevonTitanimplantatenanhandvonLaborparametern-eineretrospektiveStudie)；umweltmedizin-gesellschaft26(2/2013)98-103)，作者在其研究中评估了用于预言钛植入物失灵的诊断标记物。回顾性地在109位接受过钛植入物手术的受检者中评估植入物结果，其在治疗过程中接受了IL1A-889C/T(rs1800587)、IL1B+3954C/T(rs1143634)、IL1RNN+2018T/C(rs419598)和TNFA-308G/A(rs1800629)基因分型、体外IL-1β/TNF-a释放试验和淋巴细胞转化试验。基于钛刺激的TNF-a和体外IL-1β释放明显高于忍受植入物损失的患者(TNF-a：256.89pg/ml比81.4pg/ml；p<0.0001；IL-1β：159.96pg/ml比54.01pg/ml；p<0.0001)。根据LIUY.H.等(《中国台湾患者中白细胞介素-1β(IL1B)多态性与甲状腺眼病的联系》(Associationofinterleukin-1beta(IL1B)polymorphismswithGraves'ophthalmopathyinTaiwanChinesepatients)；Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.(2010)51(12)6238-46)，研究了是否可以将IL1B基因中的变异与患有格雷夫斯氏病(GD)的患者的甲状腺眼病(GO)相关联。在所研究的IL1BSNP中，rs1143634的C等位基因与GD有联系，而SNPrs1143634和rs16944的T/T基因型与疾病的联系较小。具有最强相互作用的SNPrs3917368和rs1143643的A/A基因型会提高GO的风险(P＝0.024或者说P＝0.017)。鉴定出了多种GD敏感和不敏感单倍体型IL1B，并且由八个SNP构成并且与低循环IL1β值有关的Ht4-GCGCCTCC单倍体型可以防止GO的发展(P＝0.025)。IL1B多态性的数据以及GD和GO与血浆IL1β的联系表明了，IL1B多态性可能与GD和GO的发展有联系。
技术实现思路
当前公开的目的在于，改善使用金属植入物时可能的并发症的预测。为了实现该目的，本公开提供了一种用于在受测者中预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的方法，其中在包括受测者的遗传物质的离析样品中：a)检查编码白细胞介素1β的基因中的单核苷酸变异rs1143627AGCCTCCTACTTCTGCTTTTGAAAGC[C/T]ATAAAAACAGCGAGGGAGAACTGG(SEQIDNO:1)，并且确定单核苷酸变异的位置处是否存在C；和/或b)检查编码IL1受体拮抗剂IL1-RN的基因中具有重复单元ATCCTGGGGAAAGTGAGGGAAATATGGACATCACATGGAACAACATCCAGGAGACTCAGGCCTCTAGGAGTAACTGGGTAGTGTGC(SEQIDNO:2)的VNTR多态性rs2234663，并且确定重复单元是否存在五次。令人惊讶地证实，多态性rs1143627和rs2234663适合作为生物标记物，用以测定应接受或者已经接受金属植入物的人表现出与植入物的不相容性的可能提高的风险。在此，如果在单核苷酸变异rs1143627中，C而不是T在单核苷酸变异的位置处，和/或如果在VNTR多态性rs2234663中，重复单元(“repeat”)串联式依次存在五次，则可以认为风险提高。不相容性可以特别地表现在提高的发炎倾向，其导致植入物松动(伴随骨质溶解)、疼痛、积液、功能恶化(例如关节假体的活动性降低)。为了不受特定理论的束缚，假定生物标记物显示出由遗传基因决定的炎症调节失衡。这导致对“异物”植入物的不相容性。人类免疫系统对同一炎症刺激(例如细菌、植入物材料)也会有不同程度的反应，其中免疫应答的进程由在防御机制中起本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于在受测者中预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的方法，其中在包括受测者的遗传物质的离析样品中：/na)检查编码白细胞介素1β的基因中的单核苷酸变异rs1143627AGCCTCCTACTTCTGCTTTTGAAAGC[C/T]ATAAAAACAGCGAGGGAGAACTGG(SEQ ID NO:1)，并且确定单核苷酸变异的位置处是否存在C；和/或/nb)检查编码IL1受体拮抗剂IL1-RN的基因中具有重复单元ATCCTGGGGAAAGTGAGGGAAATATGGACATCACATGGAACAACATCCAGGAGACTCAGGCCTCTAGGAGTAACTGGGTAGTGTGC(SEQ ID NO:2)的VNTR多态性rs2234663，并且确定重复单元是否存在五次。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180223 DE 102018104133.01.一种用于在受测者中预测对金属植入物的不相容倾向提高的风险提高的方法，其中在包括受测者的遗传物质的离析样品中：
a)检查编码白细胞介素1β的基因中的单核苷酸变异rs1143627AGCCTCCTACTTCTGCTTTTGAAAGC[C/T]ATAAAAACAGCGAGGGAGAACTGG(SEQIDNO:1)，并且确定单核苷酸变异的位置处是否存在C；和/或
b)检查编码IL1受体拮抗剂IL1-RN的基因中具有重复单元ATCCTGGGGAAAGTGAGGGAAATATGGACATCACATGGAACAACATCCAGGAGACTCAGGCCTCTAGGAGTAACTGGGTAGTGTGC(SEQID...

【专利技术属性】
技术研发人员：伯克哈德·祖默，彼得·托马斯，西尔维亚·斯贝克，戴安娜·维特曼，
申请(专利权)人：慕尼黑大学医院，
类型：发明
国别省市：德国;DE