一种末梢微量血维生素D质谱检测方法技术

本发明专利技术涉及一种末梢微量血维生素D质谱检测方法，包括血清标本收集、准备检测材料和化学制品、校准标准品、静脉血清、微量血清25‑羟基维生素D检测方法、数据分析、HPLC‑MS/MS方法的分析性能评价、静脉和微量血HPLC‑MS/MS分析方法的结果验证、静脉和微量血中25‑羟基维生素D水平、静脉和微量血标本中25‑羟基维生素D浓度结果比较。优点在于：通过同时采集同一对象的微量血和常量血，用高效液相色谱‑串联质谱法同时检测常量血和微量血25‑羟基维生素D水平，采用直线回归分析法分析两者25‑羟基维生素D的相关性及转换系数，从而得出转换公式；可以通过公式将常量血和微量血25‑羟基维生素D浓度相互转换；为临床上用微量血取代常量血进行VitD检测提供可靠依据。

【技术实现步骤摘要】
一种末梢微量血维生素D质谱检测方法
本专利技术涉及末梢微量血维生素D检测
，特别是涉及一种末梢微量血维生素D质谱检测方法。
技术介绍
维生素D是一种脂溶性维生素，具有类固醇激素的功能。维生素D(VitD)缺乏是儿童健康面临的重大公共卫生问题。研究表明：6-12月龄婴儿VitD缺乏不足率高达35％-40％。维生素D缺乏诊断标准是依据血清中的25-羟基维生素D浓度。目前国际公认液相色谱-串联质谱法是检测25-羟基维生素D最可靠的方法，具有很高的灵敏度、特异性和准确性，并且可同时测定血清25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3浓度。临床上测定血清VitD通常需采集静脉血(常量血)，由于低龄儿童尤其是新生儿及婴幼儿的血管比较细，常规采取静脉血的过程中会哭闹等，依从性差，且家长顾虑孩子年龄小，不愿意一次抽取2mL的静脉血，常规采集静脉血比较困难。因此，采取微量血进行检测，可以缓解儿童采血过程的痛苦，提高患者和家长的依从性。但由于微量血采集受采血部位深浅、组织液干扰等因素影响，与常量血检测结果有差异，目前尚无法用微量血方法来本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种末梢微量血维生素D质谱检测方法，其特征在于，所述末梢微量血维生素D质谱检测方法包括以下步骤：/n(1)血清标本收集：/n静脉血样本通过静脉穿刺进入含有凝血激活剂的试管；取指尖血放入EP试管中，再向EP试管中加入抗凝剂乙二胺四乙酸(EDTA)，血清分离，在-20℃避光中保存；/n(2)准备检测材料和化学制品：/n25-羟基维生素D2(100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D3(100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D2-d3(25-羟基维生素D2的内标，100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D3-d6(25-羟基维生素D3的内标，0....

【技术特征摘要】
1.一种末梢微量血维生素D质谱检测方法，其特征在于，所述末梢微量血维生素D质谱检测方法包括以下步骤：
(1)血清标本收集：
静脉血样本通过静脉穿刺进入含有凝血激活剂的试管；取指尖血放入EP试管中，再向EP试管中加入抗凝剂乙二胺四乙酸(EDTA)，血清分离，在-20℃避光中保存；
(2)准备检测材料和化学制品：
25-羟基维生素D2(100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D3(100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D2-d3(25-羟基维生素D2的内标，100μg/mL，purity98％)、25-羟基维生素D3-d6(25-羟基维生素D3的内标，0.5mg，purity95％)、甲酸、标准物质(SRM2972、SRM972a)、有机溶剂正己烷和甲醇(高效液相色谱级)、硫酸锌(ZnSO4)；
(3)校准标准品：
在甲醇浓度为6.25/6.25、12.5/12.5、25/25、50/50、125/125、250/250和500/500nmol/L(25-羟基维生素D2/25-羟基维生素D3)时制备混合校准标准品，每批校准品均作为样品处理；
(4)静脉血清、微量血清25-羟基维生素D检测方法：
采用高效液相色谱串联质谱法定量测定血清25-羟基维生素D浓度，检测仪器为高效液相色谱串联质谱仪；
(5)数据分析：
采用HPLC-MS/MS方法对静脉血、微量血的血清标本进行25-羟基维生素D检测；统计分析两种方法的均值偏差；评估25-羟基维生素D状态之间的一致性；
(6)HPLC-MS/MS方法的分析性能评价：
通过静脉血清样本、末梢微量血样本的HPLC-MS/MS色谱图，采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：余晓丹，焦先婷，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心，
类型：发明
国别省市：上海;31