【技术实现步骤摘要】
一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法
本专利技术涉及细胞组织鉴定
,特别涉及一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法。
技术介绍
传统的病理石蜡切片基本步骤包括组织固定,脱水,透明,浸蜡,包埋,切片,染色等步骤,每个步骤基本至少1小时以上,全程至少16小时以上,如果是在冬天由于室温较低,操作时间更长。脱水和透明是切片中最为关键的步骤,脱水完全近六小时,再进行二甲苯透明近1小时。如果组织脱水不完全,组织呈现雾状,操作还需要适当重复。脐带干细胞诱导成完整的软骨细胞需要耗时20天左右,且软骨球体积微小,约为0.1*0.1*0.1cm。如果使用传统石蜡切片判断诱导实验结果,实验过程漫长,脱水透明过程不易掌控,容易导致组织脱水不够彻底,从而影响切片质量。所以传统的石蜡切片技术不是很适用于此类干细胞诱导分化实验结果的形态学鉴定。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法,其优点在于缩短鉴定时间,控制分子高频振动明显加快了固定和脱水等步骤,组织结构及细胞形态保存完整,提高实验的进度和结果质量。< ...
【技术保护点】
1.一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:/nS1、先预热水:采用微波加热将水预热到水温60℃,使用恒温干燥箱融化蜡块I与蜡块II;/nS2、组织的处理:将组织转移到干净的培养皿上,用清水洗去表面培养基;/nS3、组织的固定:将组织放入到试管中,之后在其中加入快速固定液微波加热;/nS4、组织的脱水:将试管中的组织依次转移到浓度为60%、70%、80%和90%的乙醇中脱水;/nS5、完全脱水:将组织转移到丙酮中微波加热脱水;/nS6、组织透明处理:将组织依次转移到放有二甲苯I的试管中和放有二甲苯II的试管中分别进行微波加热;/nS7、组织浸蜡处理:首先蜡 ...
【技术特征摘要】
1.一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、先预热水:采用微波加热将水预热到水温60℃,使用恒温干燥箱融化蜡块I与蜡块II;
S2、组织的处理:将组织转移到干净的培养皿上,用清水洗去表面培养基;
S3、组织的固定:将组织放入到试管中,之后在其中加入快速固定液微波加热;
S4、组织的脱水:将试管中的组织依次转移到浓度为60%、70%、80%和90%的乙醇中脱水;
S5、完全脱水:将组织转移到丙酮中微波加热脱水;
S6、组织透明处理:将组织依次转移到放有二甲苯I的试管中和放有二甲苯II的试管中分别进行微波加热;
S7、组织浸蜡处理:首先蜡块I(52度)蜡块II(55度)在恒温干燥箱中融化,之后将组织依次转移到蜡块I中和蜡块II中微波加热;
S8、组织石蜡切片制作:使用蜡块II对组织进行包埋,之后将包埋完成的组织放入切片机中切出所需的蜡片,将蜡片放在水中漂片,然后用带粘附剂的载玻片贴片,完成贴片后对蜡片烤片,最后切片进行脱蜡复水的步骤,再进行染色;
S9、组织结果判断:使用显微镜在观察组织。
2.根据权利要求1所述的一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法,其特征在于:在步骤S1中,使用200ml烧杯加水150ml,将水加热1min,选用容积为100ml的烧杯融化蜡块I(52度)与蜡块II(55度)。
3.根据权利要求1所述的一种软骨球快速石蜡切片鉴定方法,其特征在于:在步骤S3中,快速固定液配方为:乙醇、乙醚、醋酸、聚乙二醇-40、丙三醇、水杨酸、EDTA和木糖,各组分的浓度为...
【专利技术属性】
技术研发人员:焦阳,王铁,朱迪·德瓦库玛,杨丽华,王妍,
申请(专利权)人:江苏瑞思坦生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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