一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性引物对、试剂盒和方法技术

技术编号:26408514 阅读:40 留言:0更新日期:2020-11-20 14:01
本发明专利技术公开了一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性序列,所述特异性序列为(AT)6A(AT)6。本发明专利技术利用11种检疫性实蝇的基因组数据,发现枣实蝇的物种特异性SSR序列位点,并通过软件设计引物,PCR扩增后只在枣实蝇检测到特异性条带。最终分子生物学实验验证了枣实蝇的物种特异性SSR序列位点及其引物可以有效地区分出枣实蝇,对枣实蝇的高效率快速鉴定提供具有理论指导意义。

【技术实现步骤摘要】
一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性引物对、试剂盒和方法
本专利技术涉及分子生物学领域,尤其涉及一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性引物对、试剂盒和方法。
技术介绍
实蝇是植食性昆虫,幼虫均为潜食性,绝大多数种类为水果、蔬菜、花卉作物的害虫,严重影响我国农业经济。传统的昆虫检疫鉴定以形态学鉴定为主,但对于个体微小、形态相近的形态鉴定困难的样品,在口岸检疫时的存在一定的局限性。一方面,对于形态近似的隐存种、复合种,形态差异非常小,需要有长期鉴定经验的专一类群的鉴定专家才可能给出准确判定;另一方面,对于检疫截获的形态特征模糊的样本,如幼体及受损样本或非成虫虫体,则难以通过形态学方法有效鉴定。另外,实蝇存在大量复合种的现象,其复合种的鉴定十分困难,目前还没有一个能够涵盖所有桔小实蝇复合种的分类检索表。随着现代分子生物学技术及生物信息学的快速发展,越来越多基于DNA的鉴定体系被应用于物种识别鉴定中。目前在实蝇类昆虫中最常用的是线粒体基因,其特点是基因两端序列相对保守,而密码子第三位碱基可以自由变异,在不同物种之间差异较大,因此常用于区分相近物种,但隐存种和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性序列,其特征在于,所述特异性序列为(AT)6A(AT)6。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于快速鉴定枣实蝇的特异性序列,其特征在于,所述特异性序列为(AT)6A(AT)6。


2.一种根据权利要求1所述的用于快速鉴定枣实蝇特异性序列获得的特异性引物对,其特征在于,所述引物对的序列如SEQIDNO:1-2所示。


3.一种用于快速鉴定枣实蝇的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的特异性序列,以及权利要求2所述的特异性引物对序列。


4.权利要求2所述的特异性引物在鉴定枣实蝇物种中的应用。


5.权利要求3所述的试剂盒在鉴定枣实蝇物种中的应用。


6.一种基于快速鉴定枣实蝇的特异性序列设计引物鉴定的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)根据物种特异性SSR序列位点,利用软件设计引物,并在测序实蝇的基因组内进行比对,筛选出枣实蝇的特异性引物;
(2)利用实蝇基因组DNA作为模板,进行PCR扩增;
(3)PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳检测是否存在...

【专利技术属性】
技术研发人员:王书平何容张小菊梁帆李飞
申请(专利权)人:上海海关动植物与食品检验检疫技术中心浙江大学乌鲁木齐海关技术中心广州海关技术中心
类型:发明
国别省市:上海;31

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