一种用于预防或治疗癌症的抗体制造技术

本发明专利技术属于抗体技术领域，提供了一种用于预防或治疗癌症的抗体，所述抗体特异性结合人密蛋白18.2，本发明专利技术还提供了包含该抗体的药物组合物及其用途、编码该抗体的核酸分子、包含该核酸分子的载体和宿主细胞，以及制备该抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防或治疗癌症的抗体
本专利技术涉及一种用于预防或治疗癌症，尤其是晚期胃癌的抗体，属于生物

技术介绍
胃癌在全世界范围内是发病率最高的癌症之一，是中国的第二大常见肿瘤。据2017年4月在北京召开的第12届国际胃癌大会上披露，中国胃癌每年新发现病例约为68万例，占全球发病总数的一半左右，同比2012年公布的44.65万例，年平均增长率超过了13％。中国胃癌死亡率是欧美发达国家的4～8倍，约每2～3分钟就有1名中国人死于胃癌。相比其他国家，中国的胃癌形势更加严峻。中国大部分胃癌患者确诊时，病情已经进入中晚期，手术后效果极不理想，且预后极差，是临床上极为棘手的恶性肿瘤。细胞间紧密连接(tightjunction，TJs)是一种跨膜蛋白复合体，紧密连接的稳定需要几种不同蛋白的协调活动来维持，而Claudin蛋白是保证紧密连接渗透性具有特异性的主要蛋白。迄今在哺乳动物中已发现27个Claudin家族成员。Claudin蛋白家族分子量为20～27KD，结构中包括4个跨膜区域、两个细胞外环和一个细胞内环，其N端和C末端在胞浆内。两个细胞外环使其成为理想的抗体靶点。Claudin蛋白是构成紧密连接结构的骨架蛋白，位于相临细胞间隙顶侧，其分布具有组织器官特异性，功能主要为细胞间粘附、维持细胞极性、调节细胞旁通透性及参与细胞增殖、分化调节。Claudin18蛋白分子量约为26KD，可以通过选择性剪切使Claudin蛋白变成具有不同特性的Claudin亚型：Claudin18.1和Claudin18.2。Claudin18.1和Claudin18.2的第一胞外结构域之间虽然只有八个氨基酸的差异，但表达分布却不同，Claudin18.1在正常肺和胃的上皮中选择性表达，Claudin18.2只在短暂分化的胃上皮细胞上表达，在任何其他正常人器官中完全检测不到，但是Claudin18.2在多种恶性肿瘤中有显著上调，包括80％的胃肠道腺瘤、60％的胰腺肿瘤、30％食道癌以及25％非小细胞肺癌。在肿瘤中，细胞间的紧密连接遭到破坏，Claudin18.2无法发挥其正常功能。因此，Claudin18.2是一个合适的肿瘤治疗靶标。
技术实现思路
本专利技术的第一方面，提供一种抗体，所述抗体可以结合紧密蛋白18.2(Claudin18.2)，所述抗体包括重链高变区(HCDR)和轻链高变区(LCDR)，所述重链高变区包括：氨基酸序列为GYSFTNYG的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2，以及氨基酸序列为AX1X2GX3GNAMX4Y的HCDR3；所述轻链高变区包括：氨基酸序列为X5X6LX7NX8GNQKXY的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2，以及氨基酸序列为QNDYX9YPX10T的LCDR3，其中所述HCDR3中氨基酸X1选自K或R，X2选自I或L，X3选自Y或F，X4选自E或D；所述LCDR1中氨基酸X5选自N、Q或T，X6选自T或N，X7选自I或L，所述X8选自T、N或S；所述LCDR3中氨基酸X9选自T或S，X10选自I或L。一个优选的实施方案中，所述重链高变区包括：氨基酸序列为GYSFTNYG的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2，以及氨基酸序列为AX1X2GX3GNAMX4Y的HCDR3；所述轻链高变区包括：氨基酸序列为X5X6LX7NX8GNQKXY的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2，以及氨基酸序列为QNDYX9YPX10T的LCDR3，其中所述HCDR3中氨基酸X1为R，X2为L，X3为F，X4为D；所述LCDR1中氨基酸X5选自N或Q，X6为T，X7选自I或L，所述X8选自T或S；所述LCDR3中氨基酸X9选自T或S，X10为L。一个更为具体的实施方案中，所述抗体包含如下所述的HCDR和LCDR：(1)氨基酸序列为GYSFTNYG(NO：1)的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2(NO：2)，氨基酸序列为ARLGFGNAMDY(NO：3)的HCDR3；以及氨基酸序列为NTLINTGNQKNY(NO：4)的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2(NO：5)，氨基酸序列为QNDYTYPLT(NO：6)的LCDR3；(2)氨基酸序列为GYSFTNYG(NO：1)的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP(NO：2)的HCDR2，氨基酸序列为ARLGFGNAMDY(NO：3)的HCDR3；以及氨基酸序列为QTLLNTGNQKNY(7)的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2(NO：5)，氨基酸序列为QNDYTYPLT(NO：6)的LCDR3；(3)氨基酸序列为GYSFTNYG(NO：1)的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP(NO：2)的HCDR2，氨基酸序列为ARLGFGNAMDY(NO：3)的HCDR3；以及氨基酸序列为QTLLNSGNQKNY(NO：8)的LCDR1，氨基酸序列为WAT(NO：5)的LCDR2，氨基酸序列为QNDYSYPLT(NO：9)的LCDR3。具体地，所述结合Claudin18.2的抗体，具有如下所述的VH和VL序列：(1)氨基酸序列为SEQIDNO：10所述的VH，以及SEQIDNO：11所述的VL；(2)氨基酸序列为SEQIDNO：10所述的VH，以及SEQIDNO：12所述的VL；(3)氨基酸序列为SEQIDNO：10所述的VH，以及SEQIDNO：13所述的VL。一个具体的实施方案中，本专利技术所述抗体名称、对应序列如下表：重链：QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYSFTNYGMNWVKQAPGKGLKWMGWINTNTGEPTYAEEFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCAX1X2GX3GNAMX4YWGQGTSVTVSS；轻链：DIVMTQSPSSLTVTAGEKVTMSCKSX5X6LX7NX8GNQKXYLTWYQQKPGQPPKLLIYWATTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDYX9YPX10TFGAGTKLELK表1结合Claudin18.2的人源化抗体名称及对应的VH、VL序列BY0-0的VH及VL氨基酸序列(VH的氨基酸序列如SEQIDNO:14所示，VL的氨基酸序列如SEQIDNO:15所示)VH高变区(或称互补决定区)：CDR1:GYTFTNYG，CDR2:INTNTGEP；CDR3:ARLGFGNAMDYVH框架区：FR1：QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKAS；FR2：MNWVKQAPGKGLKWMGW；FR3：TYAEEFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFC；FR4：WGQGTSVTVSSVL高变区(或称互补决定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预防或治疗癌症的抗体，所述抗体包括重链高变区(HCDR)和轻链高变区(LCDR)，所述重链高变区包括：/n氨基酸序列为GYSFTNYG的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2，以及氨基酸序列为AX1X2GX3GNAMX4Y的HCDR3；所述轻链高变区包括：/n氨基酸序列为X5X6LX7NX8GNQKXY的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2，以及氨基酸序列为QNDYX9YPX10T的LCDR3，/n其中所述HCDR3中氨基酸X1选自K或R，X2选自I或L，X3选自Y或F，X4选自E或D；/n所述LCDR1中氨基酸X5选自N、Q或T，X6选自T或N，X7选自I或L，所述X8选自T、N或S；/n所述LCDR3中氨基酸X9选自T或S，X10选自I或L。/n

【技术特征摘要】
1.一种预防或治疗癌症的抗体，所述抗体包括重链高变区(HCDR)和轻链高变区(LCDR)，所述重链高变区包括：
氨基酸序列为GYSFTNYG的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2，以及氨基酸序列为AX1X2GX3GNAMX4Y的HCDR3；所述轻链高变区包括：
氨基酸序列为X5X6LX7NX8GNQKXY的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2，以及氨基酸序列为QNDYX9YPX10T的LCDR3，
其中所述HCDR3中氨基酸X1选自K或R，X2选自I或L，X3选自Y或F，X4选自E或D；
所述LCDR1中氨基酸X5选自N、Q或T，X6选自T或N，X7选自I或L，所述X8选自T、N或S；
所述LCDR3中氨基酸X9选自T或S，X10选自I或L。


2.根据权利要求1所述的抗体，所述抗体包括重链高变区(HCDR)和轻链高变区(LCDR)，所述重链高变区包括：
氨基酸序列为GYSFTNYG的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2，以及氨基酸序列为AX1X2GX3GNAMX4Y的HCDR3；所述轻链高变区包括：
氨基酸序列为X5X6LX7NX8GNQKXY的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2，以及氨基酸序列为QNDYX9YPX10T的LCDR3，
其中所述HCDR3中氨基酸X1为R，X2为L，X3为F，X4为D；
所述LCDR1中氨基酸X5选自N或Q，X6为T，X7选自I或L，所述X8选自T或S；
所述LCDR3中氨基酸X9选自T或S，X10为L。


3.根据权利要求2所述的抗体，所述抗体包含如下所述的HCDR和LCDR：
(1)氨基酸序列为GYSFTNYG(NO：1)的HCDR1，氨基酸序列为INTNTGEP的HCDR2(NO：2)，氨基酸序列为ARLGFGNAMDY(NO：3)的HCDR3；以及氨基酸序列为NTLINTGNQKNY(NO：4)的LCDR1，氨基酸序列为WAT的LCDR2(NO：5)，氨基酸序列为QNDYTYPLT(NO：6)的LCDR3；
(2)氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁爽，刘珊，侯建华，
申请(专利权)人：北京亦庄国际蛋白药物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11