捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法及微流体装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法及微流体装置，所述制备方法包括如下步骤：1)硅纳米线芯片的蚀刻、表面修饰和生物功能化；2)微流体芯片的制备；3)硅纳米线芯片和微流体芯片的组装。本发明专利技术技术方案中，通过设计硅纳米线芯片和微流体芯片，并对其进行组装，解决了传统CTC计数的灵敏度不高的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法及微流体装置
本专利技术涉及生物材料和临床检测
，特别涉及一种捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法及微流体装置。
技术介绍
随着污染程度的增加，肿瘤的患病几率已经高于三分之一的比例。对于肿瘤的诊断方法主要包括：病理学(活检切片)；影像学(超声、X光、CT或PET等)和血清学(血清肿瘤相关蛋白，如CA-125、CA-199或CEA等)。然而这些方法对存在自身的缺陷，不能为不断变化肿瘤和诊断预警提供帮助。目前临床公认的人外周血循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCell，简称CTC)检测已被公认为最好检测手段之一。在2004年，美国药品与食品监督管理局首次批准通过了第一个有关CTC富集和计数的技术产品。这一产品是利用细胞表面所表达的上皮细胞粘附分子(EpCAM)来完成细胞的分选的。EpCAM在绝大多数的上皮细胞上都有表达，因此，在来源于上皮细胞的肿瘤细胞中也有表达。修饰有anti-EpCAM的磁珠与固化的血液细胞相互作用，这样一来所有表达EpCAM的细胞表面都会附着一些磁珠本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/n1)硅纳米线芯片的蚀刻、表面修饰和生物功能化/nS1、在硅基底上旋转涂覆光阻胶，干燥备用；/nS2、对涂覆的光阻胶进行O

【技术特征摘要】
1.一种捕获和富集循环肿瘤细胞的微流体系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
1)硅纳米线芯片的蚀刻、表面修饰和生物功能化
S1、在硅基底上旋转涂覆光阻胶，干燥备用；
S2、对涂覆的光阻胶进行O2反应离子蚀刻，以形成点状纳米结构；
S3、对点状纳米结构进行CF4蚀刻，依次用体积之比为55～85:15～45浓硫酸/双氧水混合液以及去离子水洗涤，得到硅纳米线基底；
S4、无水乙醇进一步清洗硅纳米线基底，N2吹干备用；
S5、制备质量浓度为0.1～10％的新鲜的巯丙基三甲氧基硅烷的甲苯溶液，并将步骤S4中吹干的硅纳米线基底浸没于上述甲苯溶液中进行键合反应，至反应完全，无水乙醇清洗，N2吹干，得表面键合巯丙基三甲氧基硅烷的硅纳米线基底；
S6、制备质量浓度为20ng/mL～1mg/mL的新鲜的马来酰亚胺-聚乙二醇-生物素基的DMSO溶液，并将表面键合巯丙基三甲氧基硅烷的硅纳米线基底浸没于上述DMSO溶液进行二次键合反应，至反应完全，无水乙醇清洗，N2吹干，得硅纳米线芯片；
2)微流体芯片的制备
S1、设计和打印具有微流体信道区域的微流体通道结构和鱼骨结构的掩模板；
S2、在硅材料上旋转涂覆光刻胶，光刻胶的厚度为10～150um，干燥，然后对准微流体通道结构的掩模板和光刻胶上对应的微流体通道结构的光刻区域，光照，成像得微流体通道结构；
S3、于步骤S2中的硅材料上再次旋转涂覆光刻胶，光刻胶的厚度为50～200um，干燥，然后对齐鱼骨结构的掩模板和光刻胶上对应的微流体信道的光刻区域，光照，成像得构建在所述微流体通道结构的微流体信道区域的鱼骨结构；
S4、清洗并干燥微流体通道结构的光刻胶模板，减压气体蒸镀三氯(1H，1H，2H，2H全氟辛基)硅烷，无尘环境保存；
S5、采用Sylgardelastomer试剂盒浇筑步骤S4中的光刻胶模板，所述微流体通道结构的整体厚度为3～6mm；并将所述微流体通道结构裁切成与所述硅纳米线芯片大小相适配；
3)硅纳米线芯片和微流体芯片的组装
将所述微流体芯片上的微流体信道区域对齐所述硅纳米线芯片上蚀刻有硅纳米线的区域，然后通过夹具夹紧所述硅纳米线芯片和所述微流体芯片。


2.如权利要求1所述的捕获和富集循环肿瘤细胞的微...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯双，罗群皓，吴冬霞，
申请(专利权)人：侯双，
类型：发明
国别省市：北京;11