捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法、微流体装置及其应用制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法、微流体装置及其应用，所述制备方法包括以下步骤：S1、硅纳米线芯片的制备；S2、微流体芯片的制备；S3、硅纳米线芯片和微流体芯片的组装；S4、肿瘤细胞的捕获和释放。本发明专利技术技术方案解决了传统CTC计数的灵敏度不高的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法、微流体装置及其应用
本专利技术涉及生物材料和临床检测
，特别涉及一种捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法、微流体装置及其应用。
技术介绍
循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell，CTC)是从原发性肿瘤或转移部位脱落并作为转移瘤的细胞来源在外周血中循环的癌细胞。目前用于癌症诊断的金标准需要侵入性活组织检查和随后对活检样品进行的组织病理学分析。然后，在早期转移或复发时，收集组织活检样品难以确定转移/复发部位。因此，CTC可被认为是肿瘤的“液体活组织检查”，其能够在致命性转移发生之前方便地获得肿瘤细胞。目前临床CTC检测已被公认为人体肿瘤细胞检测及其预后诊断的最好检测手段之一，其主要的技术挑战在于从血液样品的大量(109个细胞/mL)血细胞中有效且特异性地捕获丰度极低(数个至数百个细胞/mL)的CTC。随着领域内日益增长的需求和可能性，第一代CTC计数的局限性所带来的各种问题和困扰正在被更多更新颖的CTC技术所解决和克服。首先，在CTC研究中检测灵敏度还是至关重要的影本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/nS1、硅纳米线芯片的制备：在硅基底上旋转涂覆PMMA-A8光阻胶，并通过标准光刻方法限定蚀刻区域，干燥备用；然后通过NH

【技术特征摘要】
1.一种捕获和释放肿瘤细胞的微流体系统的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
S1、硅纳米线芯片的制备：在硅基底上旋转涂覆PMMA-A8光阻胶，并通过标准光刻方法限定蚀刻区域，干燥备用；然后通过NH4F/AgNO3试剂引入金属纳米颗粒于所述蚀刻区域，以在所述硅基底上形成纳米离子膜；然后对所述硅基底进行H2O2/NH4F蚀刻，蚀刻时长1～20分钟，依次经过体积之比为45～85:15～55的浓硫酸/双氧水混合溶液和去离子水洗涤，得到具有纳米线的硅纳米线基底；用无水乙醇进一步洗涤，然后于超净环境下进行N2吹干备用；制备质量浓度为0.1～10％的新鲜的3-氨基丙基三乙氧基硅烷的甲苯溶液，并将上述备用的硅纳米线基底浸没于上述甲苯溶液中进行键合反应，至反应完全，无水乙醇清洗，N2吹干，得表面键合3-氨基丙基三乙氧基硅烷的硅纳米线基底；制备质量浓度为20～100ng/mL的新鲜的N-羟基琥珀酰亚胺-PEG-生物素基的PBS溶液，并将上述表面键合3-氨基丙基三乙氧基硅烷的硅纳米线基底浸没于所述PBS溶液中再次进行键合反应，至反应完全，无水乙醇清洗，N2吹干，得硅纳米线芯片；
S2、微流体芯片的制备：设计和打印具有微流体信道区域的微流体通道结构和鱼骨结构的掩模板；在硅材料上旋转涂覆SU-8光刻胶，光刻胶的厚度为10～150um，干燥，然后对准微流体通道结构的掩模板和光刻胶上对应的微流体通道结构的光刻区域，光照，成像得微流体通道结构；于上述硅材料上再次旋转涂覆SU-8光刻胶，光刻胶的厚度为50～200um，干燥，然后对齐鱼骨结构的掩模板和光刻胶上对应的微流体信道的光刻区域，光照，成像得构建在所述微流体通道结构的微流体信道区域的鱼骨结构；清洗并干燥微流体通道结构的光刻胶模板，减压气体蒸镀三氯(1H，1H，2H，2H全氟辛基)硅烷，无尘环境保存；采用Sylgardelastomer试剂盒浇筑上述光刻胶模板，所述微流体通道结构的整体厚度为3～6mm；并将所述微流体通道结构裁切成与所述硅纳米线芯片大小相适配，得所需微流体芯片；
S3、硅纳米线芯片和微流体芯片的组装：将所述微流体芯片上的微流体信道区域对齐所述硅纳米线芯片上蚀刻有硅纳米线的区域，然后通过夹具夹紧所述硅纳米线芯片和所述微流体芯片；
S4、肿瘤细胞的捕获和释放：制备1.0～10.0uM...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯双，罗群皓，吴冬霞，
申请(专利权)人：侯双，
类型：发明
国别省市：北京;11