一种以铁蛋白为载体肿瘤纳米探针的制备方法技术

本发明专利技术公开一种以铁蛋白为载体制备具有肿瘤靶向作用荧光探针的方法，所述铁蛋白载体包含人重链铁蛋白。将笼状结构的人重链铁蛋白解聚为单体状态；向解聚的人重链铁蛋白中加入具有荧光性质的香豆素‑6使其与铁蛋白结合；将结合有香豆素‑6的所述解聚人重链铁蛋白重新聚合为纳米颗粒。本发明专利技术所制备的纳米探针具有生物相容性好，可特异性地在过表达转铁蛋白受体1(TfR1)的肿瘤细胞表面富集，利用香豆素‑6的荧光特性为给药系统的体内示踪提供一种高效的检测方法。

【技术实现步骤摘要】
一种以铁蛋白为载体肿瘤纳米探针的制备方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种具有靶向肿瘤细胞的荧光探针的制备方法，通过在铁蛋白内部装载荧光染料香豆素-6制备具有肿瘤靶向的荧光探针，用于肿瘤细胞或活体的肿瘤靶向荧光成像等检测。
技术介绍
为了实现药物的高效利用和体内示踪，并且减少其对人体各个组织的副作用伤害，荧光标记法以追踪药物的吸收和运转情况已成为一种重要的方法。研究者们希望能够找到合适的载体和合适的控释方法，使其在特定时间、特定地点进行释放。不但要求载体有良好的靶向性，还要求其有良好的生物相容性，以及较大的载物量。以无机非金属纳米探针、金属纳米探针、高分子材料、脂质体、生物膜等作为载体的纳米给药系统，能够有效穿透脑屏障、网状内皮组织等，但这些载体靶向性差，为了提高载体的靶向性，最常见的方法是通过共价化学修饰，将靶向分子与载体骨架相结合，制备一种具有靶向的纳米药物给药系统。但化学修饰相对复杂，易灭活包载物和破坏纳米药物给药系统。包载物的释放方法则常常使用温度、磁场、光、pH、特定分子、受体、特异性蛋白等刺激信号使药物定向释放。铁蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.本专利技术公开一种以铁蛋白为载体制备具有肿瘤靶向作用的荧光探针的方法，其中所述铁蛋白载体包含人重链铁蛋白，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将人重链铁蛋白解聚，将香豆素-6加入至解聚的铁蛋白中，将结合有香豆素-6的所述解聚人重链铁蛋白重新聚合为纳米颗粒。/n

【技术特征摘要】
1.本发明公开一种以铁蛋白为载体制备具有肿瘤靶向作用的荧光探针的方法，其中所述铁蛋白载体包含人重链铁蛋白，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将人重链铁蛋白解聚，将香豆素-6加入至解聚的铁蛋白中，将结合有香豆素-6的所述解聚人重链铁蛋白重新聚合为纳米颗粒。


2.根据权利要求1所述的以铁蛋白为载体装载香豆素-6的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)铁蛋白的获得：将含有人重链铁蛋白基因(HFtn)的表达质粒pET20b-HFtn转化入大肠杆菌E.coliBL21(DE3)，37℃恒温下、210r/min振荡培养，待OD600值达0.6-0.8时，加入终浓度为0.5mmol/LIPTG诱导蛋白表达，将菌液8000r/min离心5min后收集菌体，超声破碎后，以10000r/min离心20min收集上清，将上清于60℃水浴热处理后再以10000r/min离心20min，收集上清，然后将上清与镍柱结合，利用含有2.0-7.5mM咪唑、3.5-1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张瑜，马原蒙，李瑞珂，戚岚岚，王飞，李迅，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32