一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法及其应用技术

本发明专利技术属于病害防治技术领域，公开了一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法及其应用，所述阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法具体通过阻断雌性鸡和雄性鸡的体内病毒通过种蛋传给下一代实现。本发明专利技术通过干扰受精过程，阻断鸡禽白血病的垂直传播，能够实现简单有效且快速的效果；不需要费时费力建立无病鸡群，通过阻断亲本鸡将病毒传给种蛋从而阻断了禽白血病在下一代的传播。相较于建立无病鸡群进行阻断禽白血病的垂直传播省时省力，并且在鸡饲料中添加肝素、细胞松弛素D、甲基‑β‑环糊精物质也可以降低禽白血病的发病率。本发明专利技术提供一种简单有效且快速阻断鸡禽白血病垂直传播的方法和应用，解决了禽白血病对世界养禽业威胁。

【技术实现步骤摘要】
一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法及其应用
本专利技术属于病害防治
，尤其涉及一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法及其应用。
技术介绍
目前：禽白血病(Avianleukosis)是由禽C型反录病毒群的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称，二类传染病、寄生虫病。主要是淋巴细胞性白血病，其次是成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病。此外还可引起骨髓细胞瘤、结缔组织瘤、上皮肿瘤、内皮肿瘤等。是威胁世界养禽业的主要疾病之一，给世界养禽业带来巨大损失。传染源是病鸡和带毒鸡。有病毒血症的母鸡，其整个生殖系统都有病毒繁殖，以输卵管的病毒浓度最高，特别是蛋白分泌部，因此其产出的鸡蛋常带毒，孵出的雏鸡也带毒。这种先天性感染的雏鸡常有免疫耐受现象，它不产生抗肿瘤病毒抗体，长期带毒排毒，成为重要传染源。后天接触感染的雏鸡带毒排毒现象与接触感染时雏鸡的年龄有很大关系。雏鸡在2周龄以内感染这种病毒，发病率和感染率很高，残存母鸡产下的蛋带毒率也很高。4～8周龄雏鸡感染后发病率和死亡率大大降低，其产下的蛋也不带毒。10周龄以上的鸡感染后不发病，产下的蛋也不带毒。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法，其特征在于，所述阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法包括以下步骤：/n步骤一，分别取雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液，使用ALV试剂盒进行鸡禽白血病病毒的检测；/n所述使用ALV试剂盒进行鸡禽白血病病毒的检测包括以下步骤：/n(1.1)提取鸡雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液的基因组DNA；/n(1.2)利用ALV试剂盒对提取的雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液的基因组DNA进行PCR扩增，并进行荧光标记；/n(1.3)将扩增产物与ALV试剂盒的基因芯片进行杂交；杂交后进行清洗、处理、扫描，即可得检测结果；/n步骤二，淘汰鸡禽白血病病毒阳性鸡，分别...

【技术特征摘要】
1.一种阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法，其特征在于，所述阻断鸡禽白血病病毒垂直传播的方法包括以下步骤：
步骤一，分别取雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液，使用ALV试剂盒进行鸡禽白血病病毒的检测；
所述使用ALV试剂盒进行鸡禽白血病病毒的检测包括以下步骤：
(1.1)提取鸡雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液的基因组DNA；
(1.2)利用ALV试剂盒对提取的雌性鸡的生殖道上皮细胞和雄性鸡的精液的基因组DNA进行PCR扩增，并进行荧光标记；
(1.3)将扩增产物与ALV试剂盒的基因芯片进行杂交；杂交后进行清洗、处理、扫描，即可得检测结果；
步骤二，淘汰鸡禽白血病病毒阳性鸡，分别进行鸡禽白血病阳性雌性鸡和鸡禽白血病阳性雄性鸡的选择；
步骤三，对鸡禽白血病阳性雌性鸡和鸡禽白血病阳性雄性鸡进行喂养，喂养饲料里添加肝素、细胞松弛素D、甲基-β-环糊精，抑制细胞摄取外泌体；
所述喂养饲料的制备方法包括：
(3.1)将高粱、麸皮、稻谷、豆粕按照2:3:2:1的比例进行混合，加入水，进行充分搅拌，得到预混饲料；
(3.2)将肝素、细胞松弛素D、甲基-β-环糊精进行混合，然后加入预混饲料中；
(3.3)将混合饲料置于搅拌机中匀速搅拌30min，即可得到液态专用喂养饲料；
(3.4)将得到的液态专用喂养饲料置于造粒机中，进行造粒，得到专用喂养饲料；
步骤四，进行外泌体抗体疫苗的制备；
所述进行外泌体抗体疫苗的制备包括：
(4.1)对鸡禽白血病病毒阴性鸡进行鸡禽白血病病毒的注射，并对其进行饲养；
(4.2)对注射鸡禽白血病病毒的鸡进行检测，保留鸡禽白血病病毒阳性雄鸡和鸡禽白血病病毒阳性雌鸡；
(4.3)分别进行鸡禽白血病病毒阳性雄鸡和鸡禽白血病病毒阳性雌鸡外泌体的获取；
(4.4)对获取的外泌体进行离心、沉淀，滤除沉淀，取上清液，得到外泌体抗体疫苗；
步骤五，对鸡禽白血病阳性雄性鸡注射步骤四制备的外泌体抗体疫苗，封闭或阻断鸡禽白血病阳性雄性鸡的精液外泌体；
步骤六，在步骤二选择的鸡禽白血病阳性雌性鸡进行受精前，进行外泌体抗体疫苗的注射，然后将其与步骤五注射外泌体抗体疫苗后的鸡禽白血病阳性雄性鸡进行受精；
步骤七，在步骤六受精结束后，对鸡禽白血病阳性雌性鸡进行外泌体抗体疫苗的二次注射，封闭或阻断鸡禽白血病阳性雌性鸡的外泌体，进行生殖道和受精卵的隔离。


2....

【专利技术属性】
技术研发人员：潘淑惠，王璇，文正常，张晓可，吴玙彤，姜兆芳，陈亚亚，张杨子，
申请(专利权)人：贵州省畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：贵州;52