一种利用白酒糟生产粪肠球菌的技术方法技术

本发明专利技术公开了一种利用白酒糟生产粪肠球菌的技术方法，属于发酵工程技术领域，包括：菌种活化、一级种子培养、白酒糟预处理、配制发酵培养基、固体发酵，得到粪肠球菌培养物；本发明专利技术发酵过程采用固态发酵生产粪肠球菌的方法，整个发酵过程遵循无菌操作规程，使粪肠球菌的固态培养生产实现了纯种培养，可实现大规模放大生产。本发明专利技术涉及的发酵培养基解决了以白酒糟为主要原料发酵中存在的活菌数量低的问题，及液体培养中容易污染杂菌，营养利用率低，菌体及代谢物难分离的问题，大大提高了粪肠球菌的产量。

【技术实现步骤摘要】
一种利用白酒糟生产粪肠球菌的技术方法
本专利技术涉及发酵工程
，特别是涉及一种利用白酒糟生产粪肠球菌的技术方法。
技术介绍
随着白酒工业的发展，白酒生产的副产品——白酒糟的利用已成为行业工作的重点。固态酒糟是白酒生产的主要副产物，也是白酒生产的主要污染物。由于一般采用高粱、小麦等原料，白酒糟的酸度高，含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素以及各种微量元素。实践已经证明，白酒糟综合利用程度直接影响企业的发展，如果处理不好，对环境的压力是巨大的；而白酒糟加工饲料的水平又关系到国家饲料政策的落实。长期以来，白酒糟主要是直接用作农村饲料，对促进农村饲养业的发展及生物链的良性循环，发挥了重要的作用。但是，鲜白酒糟的营养结构已经不能满足饲养业科学喂养的要求及规模发展的需要，特别是鲜白酒糟含水量高达65％以上，贮存极其困难，管理不好极易霉变，大量的白酒糟任意堆放严重污染环境，困扰了企业的发展。现有技术中已有一些专利等公开的文献，利用白酒酒糟通过发酵制备培养物，并应用到饲料中，但是发酵过程中，一般采用多种类的混合菌：比如酵母菌、霉菌、乳酸菌、枯草芽孢杆菌等中的多种混合发酵培养，由于多个菌种的培养条件不一致，需要采用不同的培养条件进行2-3期的培养才能获得最终的培养物，过程复杂和繁琐；另外，虽然采用了多种菌种混合进行发酵，但是最终的活菌含量并不高，经分析可能因为多种菌的适宜培养条件差异较大，可能在不同培养条件下，造成部分菌种不适应环境而死亡，因此最终的活菌数量并不高，进而导致在饲料中的应用价值有待考究；由于上述的原因，还可能导致酒糟的发酵不彻底，得到的发酵培养物的蛋白含量提高并不是很明显。因此，针对酒糟酸性的特殊条件，制备一种基于白酒酒糟的发酵培养物以高效的应用到动物饲料中很有必要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用白酒糟生产粪肠球菌的技术方法，以解决上述现有技术存在的问题。为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：本专利技术提供一种粪肠球菌微生态制剂，包括：载体，所述载体为粪肠球菌培养物和微藻的干燥遗体；薄膜，所述薄膜用于包覆所述载体；以及，多种益生菌，所述益生菌位于薄膜层中；其中，所述薄膜层是由所述益生菌与所述载体在室温条件下共同培养，使所述益生菌聚集在所述载体表面形成的；所述粪肠球菌培养物利用白酒糟生产得到，包括以下步骤：(1)菌种活化：将-80℃保存的粪肠球菌菌种在固体种子培养基平板上划线，在温度为35-40℃的条件下培养20-24h；所述菌种为粪肠球菌；(2)一级种子培养：将活化的粪肠球菌，用接种环挑取三到五环接种于液体种子培养基中，置于摇床中，震荡培养20-24h，制得一级种子菌；(3)白酒糟预处理：将白酒糟与水按照质量比1:1-1:2混合均匀，加入碳酸氢钠调整pH值至6.4-7.0，接种一级种子菌，生料发酵，培养3-7天，得到预处理的白酒糟；(4)配制发酵培养基；(5)固体发酵：在所述发酵培养基中接种8-10％的一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度和温度，培养20-24h，得到二级种子菌；(6)将所述二级种子菌，按照步骤(5)进一步发酵，干燥，得到粪肠球菌培养物。进一步地，所述微藻为扁藻、小球藻、拟球藻、角刺藻、骨条藻、等鞭金藻、裂壶藻、螺旋藻和/或席藻；所述益生菌为比菲德氏菌、所述粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳酸杆菌、乳酸球菌、胚芽乳酸杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、枯草杆菌、沼泽红假单胞和/或地衣芽孢杆菌。进一步地，在步骤(2)中，所述震荡培养条件为温度35-40℃和250rpm的条件；在步骤(3)中，所述生料发酵条件为通风量为15-30％、温度30-35℃。进一步地，所述发酵培养基包括以下重量份的组分：经过预处理的白酒糟30-35份、蔗糖5-10份、葡萄糖5-9份、氯化钠1-3份、KH2PH42-4份、MnSO4·H2O0.2-1.5份。进一步地，所述发酵培养基的配制方法为：将所述发酵培养基各组分混合，按料液比1:0.5-0.8加入水，混合均匀，120-130℃高温高压灭菌25min。进一步地，在步骤(5)中，所述温度为35-37℃，湿度为80-85％。本专利技术还提供一种上述的肠球菌微生态制剂在动物饲料中的应用。进一步地，加入6-10wt％到动物饲料中，混合均匀后用于饲喂动物。本专利技术公开了以下技术效果：本专利技术中以白酒糟为原料发酵制备粪肠球菌，白酒糟是白酒生产的副产品，价格低廉，且白酒糟中含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素以及各种微量元素，利于菌体的生长。本专利技术发酵过程采用固态发酵生产粪肠球菌的方法，整个发酵过程遵循无菌操作规程，使粪肠球菌的固态培养生产实现了纯种培养，可实现大规模放大生产。本专利技术涉及的发酵培养基解决了以白酒糟为主要原料发酵中存在的活菌数量低的问题，及液体培养中容易污染杂菌，营养利用率低，菌体及代谢物难分离的问题，大大提高了粪肠球菌的产量，获得的发酵产品活菌数最高可以达到7.8×1012cfu/g，且具有较高的芽孢率。本专利技术发酵过程生产出富含粪肠球菌的生物发酵产品，是制作微生态制剂的理想原料，由于粪肠球菌具有芽孢，具有耐酸、耐碱、耐100℃高温及耐挤压等优点，在制粒过程和酸性胃环境中均能保持稳定性，在肠道中不增殖，只在肠道上段迅速发育转变成具有新陈代谢功能的营养性细胞。粪肠球菌能使肠道酸化而有利于铁、钙及维生素D等的吸收，促进动物生长，缩短生长周期，能明显提高蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性，增强动物对植物性饲料的可利用种类；并且，粪肠球菌属于兼性厌氧菌中的非致病菌，以自身的耗氧来促进双歧杆菌、乳酸杆菌和梭菌等厌氧菌的生长，有效抑制肠道中肠杆菌和肠球菌等需氧菌的生长，促进宿主肠道正常菌群生长，保持微生态平衡，提高机体免疫力。具体实施方式现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粪肠球菌微生态制剂，其特征在于，包括：/n载体，所述载体为粪肠球菌培养物和微藻的干燥遗体；/n薄膜，所述薄膜用于包覆所述载体；/n以及，多种益生菌，所述益生菌位于薄膜层中；/n其中，所述薄膜层是由所述益生菌与所述载体在室温条件下共同培养，使所述益生菌聚集在所述载体表面形成的；/n所述粪肠球菌培养物利用白酒糟生产得到，包括以下步骤：/n(1)菌种活化：将-80℃保存的粪肠球菌菌种在固体种子培养基平板上划线，在温度为35-40℃的条件下培养20-24h；所述菌种为粪肠球菌；/n(2)一级种子培养：将活化的粪肠球菌，用接种环挑取三到五环接种于液体种子培养基中，置于摇床中，震荡培养20-24h，制得一级种子菌；/n(3)白酒糟预处理：将白酒糟与水按照质量比1:1-1:2混合均匀，加入碳酸氢钠调整pH值至6.4-7.0，接种一级种子菌，生料发酵，培养3-7天，得到预处理的白酒糟；/n(4)配制发酵培养基；/n(5)固体发酵：在所述发酵培养基中接种8-10％的一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度和温度，培养20-24h，得到二级种子菌；/n(6)将所述二级种子菌，按照步骤(5)进一步发酵，干燥，得到粪肠球菌培养物。/n...

【技术特征摘要】
1.一种粪肠球菌微生态制剂，其特征在于，包括：
载体，所述载体为粪肠球菌培养物和微藻的干燥遗体；
薄膜，所述薄膜用于包覆所述载体；
以及，多种益生菌，所述益生菌位于薄膜层中；
其中，所述薄膜层是由所述益生菌与所述载体在室温条件下共同培养，使所述益生菌聚集在所述载体表面形成的；
所述粪肠球菌培养物利用白酒糟生产得到，包括以下步骤：
(1)菌种活化：将-80℃保存的粪肠球菌菌种在固体种子培养基平板上划线，在温度为35-40℃的条件下培养20-24h；所述菌种为粪肠球菌；
(2)一级种子培养：将活化的粪肠球菌，用接种环挑取三到五环接种于液体种子培养基中，置于摇床中，震荡培养20-24h，制得一级种子菌；
(3)白酒糟预处理：将白酒糟与水按照质量比1:1-1:2混合均匀，加入碳酸氢钠调整pH值至6.4-7.0，接种一级种子菌，生料发酵，培养3-7天，得到预处理的白酒糟；
(4)配制发酵培养基；
(5)固体发酵：在所述发酵培养基中接种8-10％的一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度和温度，培养20-24h，得到二级种子菌；
(6)将所述二级种子菌，按照步骤(5)进一步发酵，干燥，得到粪肠球菌培养物。


2.根据权利要求1所述的肠球菌微生态制剂，其特征在于，所述微藻为扁藻、小球藻、拟球藻、角刺藻、骨条藻、等鞭金藻、裂壶藻、螺旋藻和/或席藻；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭楠，常章兵，田建平，梁运祥，
申请(专利权)人：四川润格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51