亲和色谱法制造技术

本发明专利技术涉及一种使用亲和色谱法从液体中移除化学实体的方法。该方法包括使长形的固相穿过导管，液体也流过该导管。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】亲和色谱法本专利技术涉及一种使用亲和色谱法从液体中移除化学实体(chemicalentity)的方法。该方法包括使长形的固相(elongatesolidphase)穿过导管，液体也流过该导管。背景生物分子诸如蛋白质、核酸、抗体、肽和寡糖是高度通用的生物材料，具有在医学、测试和工业加工中的应用。新一代的生物药物已经为许多先前被认为难以治疗或不可能治疗的严重疾病产生了多种新颖的疗法。这些蛋白质和抗体通常是在无菌发酵罐中使用以廉价营养素诸如糖和氨基酸为食物的细胞生产的。还已经通过使用基因修饰的植物和动物开发了生产蛋白质的可选择的方法。尽管使用细胞培养物、植物或动物的材料的实际生产是有效的，但这种生产具有的缺点是产物是在与大量细胞副产物组合的稀水溶液中获得的。这意味着原料的实际纯化通常占生产成本的约多于80％。用于纯化蛋白质和抗体的主要方法使用了被称为‘亲和色谱法’的技术。这种技术使用了固体材料，该固体材料已经被工程化以特异性地吸附期望的材料。在这种工艺中，细胞混合物与固体混合，并且然后固体被分离、洗涤，并最后用从固体中置换蛋白质的材料进行处理，以便可以将蛋白质收集在液体中用于进一步加工。间歇工艺亲和色谱法通常只有在大规模进行时才能获得高产出。它还遭受周期长的问题并且是工厂密集型(plantintensive)的。对较大型设备的需求意味着保留时间延长，这意味着一些产物可能在制造期间降解，导致杂质增加和/或收率降低。大规模色谱法工艺的开发和验证也是昂贵和耗时的。例如，蛋白质通常通过发酵产生。在蛋白质生产的发酵阶段期间产生的液体量大，并且传统的亲和色谱法工艺可能需要在亲和色谱法工艺之前对发酵肉汤进行大量浓缩。这可能损害期望的产物，并且通常仍然导致该工艺的流量在第一装载阶段比随后的洗脱和/或洗涤阶段大得多。已经开发了多柱连续合成方法(multi-columncontinuoussynthesismethod)，但是这些方法需要复杂的阀和控制机构来工作。它们还具有的缺点是需要在平行柱中使用大量的固定相。本公开内容的简述根据本专利技术，提供了一种从液体中移除化学实体的方法，该方法包括：a)使长形主体(elongatebody)穿过导管；所述导管包括液体输入端口和液体输出端口；其中，从其中移除化学实体的液体以与长形主体相反的方向沿着导管从液体输入端口到达液体输出端口，所述导管被配置成使得液体接触长形主体；其中附接于长形主体的是亲和实体，所述亲和实体对化学实体具有亲和力；b)洗涤长形主体以移除存在的与化学实体相比对亲和实体具有较低亲和力的产物。使长形主体穿过导管从液体中移除了化学实体。化学实体变得与附接于长形主体的亲和实体结合(例如，非共价键合)，从而将化学实体从液体中移除。当长形主体和/或液体穿过导管时，其可以经历声处理(例如超声)。当长形主体和/或液体穿过导管时，其可以被搅动。长形主体可以穿过多于一个所述导管。当长形主体穿过多于一个所述导管时，液体可以同样穿过多于一个所述导管。液体可以以与长形主体相反的方向穿过多于一个所述导管。可选择地，可以将液体分别供应至每个导管。可以从单个液体源将液体分别供应至每个导管。可以从多于一个液体源将液体分别供应至每个导管。由多于一个液体源中的每一个供应的液体可以不同，例如液体中给定试剂的浓度可以变化。可能的是，步骤b)包括使长形主体穿过洗涤导管(washconduit)，所述洗涤导管包括洗涤液体输入端口和洗涤液体输出端口；其中洗涤液体以与长形主体相反的方向沿着洗涤导管从洗涤液体输入端口到达洗涤液体输出端口，所述洗涤导管被配置成使得洗涤液体接触长形主体。使长形主体穿过洗涤导管移除了存在于长形主体上的与化学实体相比对亲和实体具有较低亲和力的产物。化学实体保持与亲和实体结合(例如保持键合至亲和实体)，而初始液体中存在的任何其他产物被洗掉。与化学实体相比对亲和实体具有较低亲和力的产物通常将存在于(例如溶解于)从洗涤液体输出端口回收的洗涤液体中。当长形主体和/或洗涤液体穿过洗涤导管时，其可以经历声处理(例如超声)。当长形主体和/或洗涤液体穿过洗涤导管时，其可以被搅动。长形主体可以穿过多于一个所述洗涤导管。当长形主体穿过多于一个所述洗涤导管时，洗涤液体可以同样穿过多于一个所述洗涤导管。洗涤液体可以以与长形主体相反的方向穿过多于一个所述洗涤导管。可选择地，可以将洗涤液体分别供应至每个洗涤导管。可以从单个洗涤液体源将洗涤液体分别供应至每个洗涤导管。可以从多于一个洗涤液体源将洗涤液体分别供应至每个洗涤导管。由多于一个洗涤液体源中的每一个供应的洗涤液体可以不同，例如相应的洗涤液体中给定试剂的浓度可以变化。该方法还可以包括步骤c)从长形主体中回收化学实体。当期望的产物是例如蛋白质、核酸、抗体、肽、糖肽、糖蛋白或寡糖时，该步骤可能特别有用。可能的是，步骤c)包括使长形主体穿过置换导管(displacementconduit)，所述置换导管包括置换液体输入端口和置换液体输出端口；其中置换液体以与长形主体相反的方向沿着置换导管从置换液体输入端口到达置换液体输出端口，所述置换导管被配置成使得置换液体接触长形主体。使长形主体穿过置换导管从亲和实体中置换了化学实体。化学实体通常将存在于(例如溶解于)从置换液体输出端口回收的置换液体中。当长形主体和/或置换液体穿过置换导管时，其可以经历声处理(例如超声)。当长形主体和/或置换液体穿过置换导管时，其可以被搅动。长形主体可以穿过多于一个所述置换导管。当长形主体穿过多于一个所述置换导管时，置换液体可以同样穿过多于一个所述置换导管。置换液体可以以与长形主体相反的方向穿过多于一个所述置换导管。可选择地，可以将置换液体分别供应至每个置换导管。可以从单个置换液体源将置换液体分别供应至每个置换导管。可以从多于一个置换液体源将置换液体分别供应至每个置换导管。由多于一个置换液体源中的每一个供应的置换液体可以不同，例如相应的置换液体中给定试剂的浓度可以变化。该方法还可以包括步骤d)在从置换液体输出端口回收的置换液体中回收化学实体。这可以通过提取从置换液体输出端口回收的置换液体来实现。这可以通过对从置换液体输出端口回收的置换液体进行色谱法来实现。这可以通过移除在从置换液体输出端口回收的置换液体中存在的任何挥发性溶剂来实现，例如通过加热和/或经历真空。该方法还可以包括步骤e)从洗涤液体中回收具有较低亲和力的产物，所述洗涤液体例如从洗涤液体输出端口回收的洗涤液体。当化学实体是例如内毒素，并且期望的产物是与内毒素相比对亲和实体具有较低亲和力的产物中的一种时，该步骤可能是特别有用的。这可以通过用与所述产物对洗涤液体的亲和力相比所述产物对其具有较大亲和力的液体提取包含所述产物的洗涤液体来实现。这可以通过对包含所述产物的洗涤液体的色谱法来实现。这可以通过从产物中移除在洗涤液体中存在的任何挥发性溶剂来实现，例如通过加热和/或经历真空。通过使用多阶段连续工艺，每个阶段都可以在专用设备中进行，所述专用设备对于每个阶段所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从液体中移除化学实体的方法，所述方法包括：/na)使长形主体穿过导管以从液体中移除化学实体；所述导管包括液体输入端口和液体输出端口；其中，从其中移除所述化学实体的所述液体以与所述长形主体相反的方向沿着所述导管从所述液体输入端口到达所述液体输出端口，所述导管被配置成使得所述液体接触所述长形主体；其中附接于所述长形主体的是亲和实体，所述亲和实体对所述化学实体具有亲和力；/nb)洗涤所述长形主体以移除存在的与所述化学实体相比对所述亲和实体具有较低亲和力的产物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180205 GB 1801842.41.一种从液体中移除化学实体的方法，所述方法包括：
a)使长形主体穿过导管以从液体中移除化学实体；所述导管包括液体输入端口和液体输出端口；其中，从其中移除所述化学实体的所述液体以与所述长形主体相反的方向沿着所述导管从所述液体输入端口到达所述液体输出端口，所述导管被配置成使得所述液体接触所述长形主体；其中附接于所述长形主体的是亲和实体，所述亲和实体对所述化学实体具有亲和力；
b)洗涤所述长形主体以移除存在的与所述化学实体相比对所述亲和实体具有较低亲和力的产物。


2.如权利要求1所述的方法，其中当所述长形主体和/或所述液体穿过所述导管时，所述长形主体和/或所述液体经历声处理。


3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中步骤b)包括使所述长形主体穿过洗涤导管，以移除存在于所述长形主体上的与所述化学实体相比对所述亲和实体具有较低亲和力的产物，所述洗涤导管包括洗涤液体输入端口和洗涤液体输出端口；其中洗涤液体以与所述长形主体相反的方向沿着所述洗涤导管从所述洗涤液体输入端口到达所述洗涤液体输出端口，所述洗涤导管被配置成使得所述洗涤液体接触所述长形主体。


4.如权利要求3所述的方法，其中当所述长形主体和/或所述洗涤液体穿过所述洗涤导管时，所述长形主体和/或所述洗涤液体经历声处理。


5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述方法还包括步骤c)从所述长形主体中回收所述化学实体。


6.如权利要求5所述的方法，其中步骤c)包括使所述长形主体穿过置换导管，以从所述亲和实体中置换所述化学实体，所述置换导管包括置换液体输入端口和置换液体输出端口；其中置换液体以与所述长形主体相反的方向沿着所述置换导管从所述置换液体输入端口到达所述置换液体输出端口，所述置换导管被配置成使得所述置换液体接触所述长形主体。


7.如权利要求6所述的方法，其中当所述长形主体和/或所述置换液体穿过所述置换导管时，所述长形主体和/或所述置换液体经历声处理。


8.如权利要求5或权利要求6所述的方法，所述方法还包括步骤d)在从所述置换液体输出端口回收的所述置换液体中回收所述化学实体。


9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述方法还包括步骤e)从洗涤物中回收所述具有较低亲和力的产物。


10.如任一前述权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·R·R·普利维，
申请(专利权)人：瑞典仿生三零零零有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB