一种APTT检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及APTT检测技术领域，尤其涉及一种APTT检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.05‑0.08mM；兔脑磷脂的含量为0.25‑0.5wt％；橙皮苷的含量为0.8‑1.2wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.2‑2wt％；柠檬酸锌的含量为0.5‑1wt％；防腐剂的含量为0.3‑0.5wt％，发明专利技术在试剂R1中添加橙皮苷和淫羊藿黄酮和柠檬酸锌，橙皮苷和淫羊藿黄酮和柠檬酸锌在协同作用下能够有效的提高试剂的稳定性，使得试剂的热稳定性高，试剂反复冻融或者长时间加热后，其血凝活性基本不受影响，便于试剂在不同环境下进行运输。

An APTT detection kit

【技术实现步骤摘要】
一种APTT检测试剂盒
本专利技术涉及APTT检测
，尤其涉及一种APTT检测试剂盒。
技术介绍
活化部分凝血活酶时间(APTT)测定是凝血功能检测的一项重要指标，也是术前检查的重要指标。APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径及共同途径凝血因子的定量试验，可检测除VII因子外的其他血浆凝血因子，特别是用于因子VIII、IX、XI、XII和前激肽释放酶的测定。同时，APTT测定可用于肝素治疗监控。APTT延长：见于凝血因子II、V、VIII、IX、XI、XII减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在(如血内肝素含量增加及口服抗凝剂)，是监控肝素治疗的重要指标。APTT缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合症。目前APTT的测定均已运用半自动化或自动化的仪器，检测原理是将部分凝血活酶加入待测血浆中，再加入适当的钙离子，在Ca2+参与下纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白，从而出现凝固。测定凝固所需的时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)。现有的APTT的试剂一般热稳定性较差，反复冻融时会影响其血凝活性，在寒冷地区运输时比较麻烦。因此，我们提出了一种APTT检测试剂盒用于解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种APTT检测试剂盒。一种APTT检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.05-0.08mM；兔脑磷脂的含量为0.25-0.5wt％；橙皮苷的含量为0.8-1.2wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.2-2wt％；柠檬酸锌的含量为0.5-1wt％；防腐剂的含量为0.3-0.5wt％。优选的，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液、磷酸钠盐缓冲液、碳酸钠缓冲液和MPOS缓冲液中的一种。优选的，所述防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种。优选的，所述试剂R2中，氯化钙的含量为0.2-0.5wt％。优选的，所述试剂R2中，还包括三酰甘油，三酰甘油的含量为1-5wt％。优选的，所述APTT检测试剂盒的使用方法包括以下步骤：S1、试剂的准备：对于试剂R1，用前从冰箱中取出平衡至室温，即可使用；对于试剂R2，用前将其37℃预热5分钟，即可使用；S2、血浆的准备：静脉采血，然后用0.109mol/L(3.2％)枸橼酸钠与全血按1：9体积比迅速混匀，在3000r/min的转速下离心15min，收集上层血浆，即为待测血浆；S3、进行检测：取待测血浆和平衡至室温的试剂R1各50μl，混匀，37℃准确温育3min，立即加入已预温至37℃的氯化钙溶液50μl，记录凝固时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间。优选的，所述S3中，还可以采用全自动血凝仪或者半自动血凝仪对凝血时间进行检测。优选的，所述S3中，还包括质量控制程序，所述质量控制程序包括以下步骤：每天测定时，都应用正常和异常质控品来评价操作技术、仪器及试剂，若质控品所得数据不在参照范围内，则该批样本检测结果无效。优选的，所述S1中，对于试剂R2，在预热及使用后及时加盖防止蒸发。本专利技术的有益效果是：1、专利技术在试剂R1中添加橙皮苷和淫羊藿黄酮和柠檬酸锌，橙皮苷和淫羊藿黄酮和柠檬酸锌在协同作用下能够有效的提高试剂的稳定性，使得试剂的热稳定性高，试剂反复冻融或者长时间加热后，其血凝活性基本不受影响，便于试剂在不同环境下进行运输。2、专利技术在试剂R2中添加少量的三酰甘油，与R1试剂混合后，三酰甘油一定程度上能够加快兔脑磷脂恢复活性，使得反应能够及时进行，便于试剂的使用。3、本专利技术提出的剂盒试剂是由鞣花酸、磷脂和二价金属离子等组成的纳米级颗粒悬浮剂，外观呈透明溶液，可以用0.22μm滤膜过滤，该试剂即使长期处于静置状态，也不会有“绿色絮凝物”出现，且该试剂对肝素的敏感性，随着血浆肝素含量的增加，活化部分凝血活酶时间明显延长，该特点为口服肝素抗凝剂治疗提供了可靠的监控手段。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步解说。实施例1中，一种APTT检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.05mM；兔脑磷脂的含量为0.25wt％；橙皮苷的含量为0.8wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.2wt％；柠檬酸锌的含量为0.5wt％；防腐剂的含量为0.3wt％。进一步的，缓冲液为Tris-HCl缓冲液、磷酸钠盐缓冲液、碳酸钠缓冲液和MPOS缓冲液中的一种。进一步的，防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种。进一步的，试剂R2中，氯化钙的含量为0.2wt％。进一步的，试剂R2中，还包括三酰甘油，三酰甘油的含量为1wt％。实施例2中，一种APTT检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.08mM；兔脑磷脂的含量为0.5wt％；橙皮苷的含量为1.2wt％；淫羊藿黄酮的含量为2wt％；柠檬酸锌的含量为1wt％；防腐剂的含量为0.5wt％。进一步的，缓冲液为Tris-HCl缓冲液、磷酸钠盐缓冲液、碳酸钠缓冲液和MPOS缓冲液中的一种。进一步的，防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种。进一步的，试剂R2中，氯化钙的含量为0.5wt％。进一步的，试剂R2中，还包括三酰甘油，三酰甘油的含量为5wt％。实施例3中，一种APTT检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.06mM；兔脑磷脂的含量为0.4wt％；橙皮苷的含量为1wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.5wt％；柠檬酸锌的含量为0.7wt％；防腐剂的含量为0.4wt％。进一步的，缓冲液为Tris-HCl缓冲液、磷酸钠盐缓冲液、碳酸钠缓冲液和MPOS缓冲液中的一种。进一步的，防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种。进一步的，试剂R2中，氯化钙的含量为0.3wt％。进一步的，试剂R2中，还包括三酰甘油，三酰甘油的含量为3wt％。...

【技术保护点】
1.一种APTT检测试剂盒，其特征在于，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；/n所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；/n在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.05-0.08mM；兔脑磷脂的含量为0.25-0.5wt％；橙皮苷的含量为0.8-1.2wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.2-2wt％；柠檬酸锌的含量为0.5-1wt％；防腐剂的含量为0.3-0.5wt％。/n

【技术特征摘要】
1.一种APTT检测试剂盒，其特征在于，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含鞣花酸、兔脑磷脂和附加剂，R2包含氯化钙溶液；
所述附加剂包括橙皮苷、淫羊藿黄酮、柠檬酸锌、防腐剂和缓冲液；
在试剂R1中，鞣花酸的浓度为0.05-0.08mM；兔脑磷脂的含量为0.25-0.5wt％；橙皮苷的含量为0.8-1.2wt％；淫羊藿黄酮的含量为1.2-2wt％；柠檬酸锌的含量为0.5-1wt％；防腐剂的含量为0.3-0.5wt％。


2.根据权利要求1所述的一种APTT检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液、磷酸钠盐缓冲液、碳酸钠缓冲液和MPOS缓冲液中的一种。


3.根据权利要求1所述的一种APTT检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种。


4.根据权利要求1所述的一种APTT检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中，氯化钙的含量为0.2-0.5wt％。


5.根据权利要求4所述的一种APTT检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中，还包括三酰甘油，三酰甘油的含量为1-5wt％。


6.根据权利要求1-5任一所述的一种APTT检...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓红，刘芳，王玉玉，
申请(专利权)人：保定天岳生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13