华法林的检测方法技术

本发明专利技术提供了华法林的检测方法，包括：制备具有华法林和内标物的至少三种浓度的标准溶液；利用液相色谱质谱联用仪分别检测每一种标准溶液，获得每种标准溶液的第一检测结果；根据各个第一检测结果、标准溶液中的华法林和内标物的浓度拟合华法林的标准曲线方程；对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；向第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用液相色谱质谱联用仪在检测条件下检测待测样品，获得待测样品的第二检测结果；基于标准曲线方程和第二检测结果，得到待测样品中华法林的浓度。本方案能够缩短样品检测时间。

【技术实现步骤摘要】
华法林的检测方法
本专利技术涉及生物检测
，特别涉及华法林的检测方法。
技术介绍
华法林是香豆素类抗凝剂的一种，有对抗维生素K的作用。可以抑制维生素K参与的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的在肝脏的合成。目前，检测样品中华法林含量通常采用的方法为高效液相色谱法。而高效液相色谱法检测华法林通常需要对待测样品进行较复杂的前处理，耗费时间较多，从而导致样品检测时间较长。
技术实现思路
本专利技术提供了华法林的检测方法，能够缩短样品检测时间。为了解决上述问题，本专利技术实施例提供了华法林的检测方法，包括：制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有华法林和内标物的溶液，且所述至少三种浓度的标准溶液中的内标物的量相同；利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的华法林和内标物的浓度，拟合华法林的标准曲线方程；对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；<br>向所述第一上清本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.华法林的检测方法，其特征在于，包括：/n制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有华法林和内标物的溶液，且所述至少三种浓度的标准溶液中的内标物的量相同；/n利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；/n根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的华法林和内标物的浓度，拟合华法林的标准曲线方程；/n对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；/n向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和含有内标物的内标工作液，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；/n利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测...

【技术特征摘要】
1.华法林的检测方法，其特征在于，包括：
制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有华法林和内标物的溶液，且所述至少三种浓度的标准溶液中的内标物的量相同；
利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；
根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的华法林和内标物的浓度，拟合华法林的标准曲线方程；
对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；
向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和含有内标物的内标工作液，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；
利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；
基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中华法林的浓度。


2.根据权利要求1所述的华法林的检测方法，其特征在于，
所述检测条件中的液相条件，包括：
洗脱流动相为有机相和水相，其中，有机相包括甲醇溶液和/或乙腈溶液；
柱温为18℃-50℃；
流速为0.2-0.6mL/min。


3.根据权利要求2所述的华法林的检测方法，其特征在于，
所述洗脱流动相中的有机相与水相的比例为：
0-0.5min：20-30％:80-70％；
0.51-1.5min：90-95％:10-5％；
1.51-2.5min：20-30％:80-70％；
和/或，
所述洗脱流动相中的有机相中含有0-1mmol/L的缓冲盐和0-0.5％的甲酸；
所述洗脱流动相中的水相中含有0-10mmol/L的缓冲盐和0-0.5％的甲酸。


4.根据权利要求1所述的华法林的...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾永娟，刘春冉，翟瑞雪，倪君君，
申请(专利权)人：北京和合医学诊断技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11