甲胎蛋白特异性结合多肽及应用制造技术

本发明专利技术涉及针对甲胎蛋白(alpha‑fetal protein，AFP)特异性结合多肽及其应用，属于生物技术领域。其中，所述多肽由葡萄球菌蛋白A(SPA)免疫球蛋白结合区域通过突变1‑20个氨基酸残基获得(多肽序列见SEQ ID：2‑14)，能够特异性结合甲胎蛋白。本发明专利技术通过三轮富集从全合成亲合体多肽分子库淘选获得甲胎蛋白特异性结合多肽编码序列，并利用原核表达系统对获得的多肽进行了大量制备，该多肽与甲胎蛋白特异结合，与CEA、EGF、BSA、胰岛素等蛋白无明显亲和，且相比于单克隆抗体具有制备成本低、稳定性好等显著优点。本发明专利技术还进一步应用该多肽及其变体作为酶联免疫检测中的捕获元件，用于甲胎蛋白定量检测，检测灵敏度分别为8和2ng，检测线性范围分别为10‑100ng和6‑100ng，可满足临床检测需求。

【技术实现步骤摘要】
甲胎蛋白特异性结合多肽及应用
本专利技术属于生物
，具体涉及特异性结合甲胎蛋白(alpha-fetalprotein，AFP)的多肽、或其变体、或其功能性片段，以及所述多肽、或其变体、或功能性片段的制备方法和应用。
技术介绍
甲胎蛋白是由干细胞内粗面内质网核糖颗粒合成的一种糖蛋白，由一条含有591个氨基酸残基的单肽链组成(BergstrandCG，CzarBetal.Demonstrationofanewproteinfractioninserumfromthehumanfetus.ScandinavianJournalofClinical&LaboratoryInvestigation，1956，8(2)：174-174)。在胚胎发育过程中，甲胎蛋白是由胎儿肝脏和卵黄囊产生的，胚胎甲胎蛋白的浓度在第15周达到高峰，约为3mg/mL，然后慢慢降低，直到出生前，降为20μg/mL，而正常成人甲胎蛋白浓度小于25ng/mL。大量研究证明甲胎蛋白是原发性肝癌(primaryhepaticcarcinoma，PHC)重要的血清学标志物，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性结合甲胎蛋白(alpha-fetal protein，AFP)的多肽、或其变体、或其功能性片段，所述特异性结合AFP的多肽由葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A，SPA)免疫球蛋白结合区域通过突变1-20个氨基酸残基获得，具备1个或1个以上甲胎蛋白结合结构域。/n

【技术特征摘要】
1.一种特异性结合甲胎蛋白(alpha-fetalprotein，AFP)的多肽、或其变体、或其功能性片段，所述特异性结合AFP的多肽由葡萄球菌蛋白A(staphylococcalproteinA，SPA)免疫球蛋白结合区域通过突变1-20个氨基酸残基获得，具备1个或1个以上甲胎蛋白结合结构域。


2.根据权利要求1所述多肽，其氨基酸序列与SPA免疫球蛋白结合区域氨基酸序列(如SEQIDNO：1所示)相比，存在1-25个氨基酸突变位点。


3.根据权利要求2所述多肽，其氨基酸序列在第9、10、11、13、14、17、18、24、25、27、28、32和35位点，存在1个及1个以上位点的氨基酸突变。


4.根据权利要求1至3所述多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：2-13或其突变体。


5.权利要求1至4所述多肽与其他多肽的融合蛋白，该融合蛋白可特异性结合甲胎蛋白，其包括：
a.权利要求1至4所述多肽、或其变体、或其功能性片段；
b.在甲胎蛋白特异结合多肽、或其变体、或其功能性片段的氨基端或羧基端的其他氨基酸残基或多肽链；
优选地，所述其他氨基酸残基或多肽链，包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵青，刁爱坡，刘娟娟，崔东旭，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12