E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肿瘤诊断或预后评估试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术和医学诊断领域，具体是E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌诊断或预后评估试剂或试剂盒中的应用，以及相应的检测试剂盒。本发明专利技术研究发现，肾透明细胞癌患者中E3泛素化蛋白连接酶UBR5分子的表达通常下调，且其表达水平与患者的预后显著相关，结合UBR5的表达能更好的预测肾透明细胞癌患者的总生存期(OS)与无进展生存期(PFS)。

【技术实现步骤摘要】
E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肿瘤诊断或预后评估试剂盒中的应用
本专利技术涉及生物技术和医学诊断领域，具体地说，是E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌诊断或预后评估试剂盒中的应用。
技术介绍
肾癌是全世界男女最常见的癌症之一。(BarataPC,RiniBI.Treatmentofrenalcellcarcinoma:Currentstatusandfuturedirections.CACancerJClin.2017；67(6):507-524.)肾透明细胞癌(ClearCellRenalCellCarcinoma，ccRCC)是最常见的肾癌类型(ShuchB,AminA,ArmstrongAJ,etal.Understandingpathologicvariantsofrenalcellcarcinoma:distillingtherapeuticopportunitiesfrombiologiccomplexity.EurUrol.2015；67(1):85-97)。局限性ccRCC患者一般采用外科手术治疗，随着近年来的进步，其副作用明显减轻(HsiehJJ,PurdueMP,SignorettiS,etal.Renalcellcarcinoma.NatRevDisPrimers.2017；3:17009.)。尽管腹腔镜或机器人辅助腹腔镜等微创技术降低了手术引起功能损害的风险，但ccRCC术后复发、进展和转移通常会随之发生(WangG,ZhangZJ,JianWG,etal.NovellongnoncodingRNAOTUD6B-AS1indicatespoorprognosisandinhibitsclearcellrenalcellcarcinomaproliferationviatheWnt/β-cateninsignalingpathway.MolCancer.2019；18(1):15.)。因此，为了准确评价和监测ccRCC患者的病情发展和预后，有必要确定可靠的术后指标。在临床上，ccRCC患者的具体手术方式或术后监测与随访在很大程度上取决于包括TNM分期在内的临床病理参数，TNM分期是预测ccRCC患者临床预后最普遍的预后因素之一(BarataPC,RiniBI.Treatmentofrenalcellcarcinoma:Currentstatusandfuturedirections.CACancerJClin.2017；67(6):507-524.)。此外，分期评分系统SSIGN(分期、大小、分级和坏死)将ccRCC患者分为不同风险的亚组，有助于预测术后预后(5.HoTH,KapurP,Eckel-PassowJE,etal.MulticenterValidationofEnhancerofZesteHomolog2ExpressionasanIndependentPrognosticMarkerinLocalizedClearCellRenalCellCarcinoma.JClinOncol.2017；35(32):3706-3713.)。然而，为了更好的进行特殊治疗和指导精确的药物应用，上述这些因素对患者的分层仍显不足。因此，许多研究报道了包括癌基因、抑癌基因和癌干细胞(CSC)标记在内的其他指标可用于预测患者术后预后(WangM,LiX,ZhangJ,etal.AHNAK2isaNovelPrognosticMarkerandOncogenicProteinforClearCellRenalCellCarcinoma.Theranostics.2017；7(5):1100-1113.；LiX,MaX,ChenL,etal.PrognosticvalueofCD44expressioninrenalcellcarcinoma:asystematicreviewandmeta-analysis.SciRep.2015；5:13157.)。然而，以往的研究主要集中在肿瘤细胞的特性上。自从1975年泛素被发现以来，大量的研究表明泛素系统通过控制广泛的细胞功能对维持体内平衡至关重要。泛素与底物蛋白的赖氨酸(Lys)残基共价结合，分别作为信号分子介导其降解或调节其生物学功能。泛素结合是一个多步反应，涉及三种酶的后续作用：E1，泛素激活酶；E2，泛素结合酶；E3，泛素连接酶。整个过程始于泛素分子的C末端甘氨酸残基的ATP依赖性激活，并通过泛素与底物蛋白的结合而终止。单个泛素(单泛素化)或多个Ub分子(多泛素化)可以连接到目标蛋白的Lys残基上。此外，通过七个赖氨酸残基中的一个或N-末端蛋氨酸残基(M1)连接多个泛素部分，形成不同的链。最后，底物结合的Ub分子也可以被其他ptm修饰，例如SUMOylation、磷酸化和乙酰化，增加泛素代码的复杂程度。值得注意的是，泛素化是一个可逆的过程。泛素分子自身之间以及泛素与其底物之间的连接可以通过氘化酶(DUBs)的作用水解。综上所述，泛素化表现出广泛的多样性。泛素系统作为一种有前途的药物靶点正受到人们的关注。存在大量的底物蛋白和泛素连接酶(E3)(人类有600多个)负责底物识别。其次，底物蛋白的命运在很大程度上取决于多种泛素结合，如单泛素化、多泛素化和至少有八种不同连接的多泛素化。第三，泛素化可以被约100种去泛素化酶(DUBs)调节，这些去泛素酶可以去除或修剪基质蛋白上的泛素链。UBR5是HECT结构域E3泛素蛋白连接酶家族的29个成员之一，据报道是多能性发展和维持所必需的(KoyuncuS,SaezI,LeeHJ,etal.TheubiquitinligaseUBR5suppressesproteostasiscollapseinpluripotentstemcellsfromHuntington'sdiseasepatients.NatCommun.2018；9(1):2886.)。UBR5在DNA损伤后泛素介导的信号转导的内稳态中发挥了关键作用(LiCG,MahonC,SweeneyNM,etal.PPARγInteractionwithUBR5/ATMINPromotesDNARepairtoMaintainEndothelialHomeostasis.CellRe.2019；26(5):1333-1343.e7.)。UBR5与多种癌症有关。来自癌症基因组图谱(TCGA)的数据表明，UBR5基因扩增在许多癌症类型中是一种常见的改变(ShearerRF,IconomouM,WattsCK,etal.FunctionalRolesoftheE3UbiquitinLigaseUBR5inCancer.MolCancerRes.2015；13(12):1523-1532.)。研究表明，UBR5促进包括结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌在内的恶性肿瘤的生长和进展(JiSQ,ZhangYX,YangBH.UBR5promotescellproliferationandinhibitsapoptosisincoloncancerbydestabliz本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用。


2.根据权利要求1所述的E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的肾透明细胞癌选自：原发性肾透明细胞癌、或转移性肾透明细胞癌。


3.根据权利要求1所述的E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的试剂或试剂盒检测E3泛素化蛋白连接酶UBR5在肾透明细胞癌患者肿瘤组织中的表达量。


4.根据权利要求3所述的E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的试剂或试剂盒采用免疫组化方法或生物芯片检测法检测E3泛素化蛋白连接酶UBR5在肾透明细胞癌患者肿瘤组织中的表达量。


5.根据权利要求4所述的E3泛素化蛋白连接酶UBR5在制备肾透明细胞癌预后评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的试剂或试剂盒是将E3泛素化蛋白连接酶UBR5作为分子标记，利用E3泛素化蛋白连接酶UBR5单克隆抗体或多...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔心刚，王超，洪天宇，王宇宁，田毅君，彭广，王鸿儒，姜宁，李健，储传敏，章璟，
申请(专利权)人：上海市浦东新区公利医院第二军医大学附属公利医院，
类型：发明
国别省市：上海;31