基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法技术

本发明专利技术一种基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，包括以下步骤：S1、直肠拭子采集；S2、肿瘤部位拭子采集；S3、细胞内总miRNA提取，进行反转录；S4、利用realtime PCR方法检测；S5、统计学分析。本发明专利技术无创，患者依从性好：肛门刷检时刷检获取直肠粘膜上皮细胞；标本处理流程简单，miRNA可用于降解检材，不易受食物药物等影响，并且检测结果可信度高；基因在大肠癌早期即可出现变化，因此适用于早期筛查；技术成熟，检测价格低廉，易于推广，用于于人群大规模筛查。

【技术实现步骤摘要】
基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法
本专利技术涉及生物医学研究和临床检测诊断
，特别是涉及一种基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法。
技术介绍
随着我国人们生活水平的提高，饮食习惯与结构的改变，加之人口老龄化趋势影响，大肠癌发病率和死亡率逐年升高。据统计，2015年我国死于大肠癌的患者高达40万。由于大肠癌早期症状不明显，多数患者往往在出现症状数周甚至数月后才到医院就诊，多已发展到晚期，错过了最佳治疗时机。目前，在全球范围内，结肠镜检因不但能直视病灶还能钳取活检进行病理学检查，被誉为大肠癌诊断的“金”标准。但是由于结肠镜检是侵入性检查，被检查者有腹痛等不适症状，部分需筛查者拒绝接受此项检查，加之结肠镜设备及医师有限，不能全面推广用于人群筛查。大便潜血(又称便隐血)是指消化道少量出血，红细胞被消化破坏，粪便外观无异常改变，肉眼和显微镜下均不能证实的出血。一些欠发达国家常常用此检验方法作为大肠癌筛查的主要手段。此项检查虽然无创、廉价，但是结果受诸多因素影响：(1)食物，比如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、直肠拭子采集；/nS2、肿瘤部位拭子采集；/nS3、细胞内总miRNA提取，进行反转录；/nS4、利用realtime PCR方法检测；/nS5、统计学分析。/n

【技术特征摘要】
1.基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、直肠拭子采集；
S2、肿瘤部位拭子采集；
S3、细胞内总miRNA提取，进行反转录；
S4、利用realtimePCR方法检测；
S5、统计学分析。


2.根据权利要求1所述的基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，其特征在于：所述S1中将直肠拭子棒，用75％酒精浸泡，生理盐水冲洗，鼓风干燥箱干燥，备用；使用时先用扩肛器将肛门口扩开，将刷头伸入，沿距肛门口5cm的直肠粘膜表面旋转2周，取出拭子棒，置于RNA提取液中，低温保存。


3.根据权利要求2所述的基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，其特征在于：所述S1中浸泡时间为30min。


4.根据权利要求2所述的基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查和诊断方法，其特征在于：所述S1中保存温度为4℃。


5.根据权利要求2所述的基于直肠粘膜上皮细胞刷检的miRNAs大肠癌早期筛查...

【专利技术属性】
技术研发人员：何培元，李炳庆，侯志平，尹春英，王鑫，李思锦，
申请(专利权)人：承德医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：河北;13