一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法，其特征在于，包括了细胞接种步骤、细胞洗涤步骤、细胞测定步骤、细胞固定和DAPI染色步骤。本发明专利技术通过测量氧消耗和糖酵解速率，对其进行严格的质量控制，保证干细胞产品的安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法
本专利技术涉及干细胞质量控制领域，具体涉及一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法。
技术介绍
干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞，是我们肌体的起源细胞，是形成人体各种组织、器官的原始细胞。在一定条件下，干细胞可能被诱导分化不同的细胞，补充受伤或者死亡的细胞，有很大的利用价值，也是近年来研究的重点对象。干细胞产品使用时必须保持活性状态，对其安全性和有效性有着苛刻的标准，堪称有史以来最为复杂的“药品”也不为过，其生产的每一个环节又要严格按照既有规范执行，比如在复合GMP要求的场地生产、由合格的人员操作、采用的材料试剂得到相应的批准，那么干细胞产品的安全性才有保障。
技术实现思路
为了克服现有技术的上述缺陷，本专利技术的目的在于提供一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法。一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法，包括如下步骤：细胞接种步骤：将干细胞产品当中的培养基吸去后采用DPBS清洗后吸去清洗液；加入消化液对细胞进行消本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n细胞接种步骤：/n将干细胞产品当中的培养基吸去后采用DPBS清洗后吸去清洗液；/n加入消化液对细胞进行消化后吸去消化液后在二氧化碳培养箱当中孵育后采用培养基将细胞收集在试管中；/n将试管中的含有细胞的培养基与AOPI荧光染料1:1混合后计数；/n按照5000cells/well的比例将计数后的细胞配置成细胞悬液接种在24孔板上，将没有细胞的培养基接种至A1，B4，C3，D6孔内作为校正孔；/n待细胞贴壁后补充培养基后放置在二氧化碳培养箱中待用；/n细胞洗涤步骤：/n将检测液加热到37℃后从二氧化碳培养箱中取出细胞板...

【技术特征摘要】
1.一种基于代谢水平的干细胞质量控制及评价的方法，其特征在于，包括如下步骤：
细胞接种步骤：
将干细胞产品当中的培养基吸去后采用DPBS清洗后吸去清洗液；
加入消化液对细胞进行消化后吸去消化液后在二氧化碳培养箱当中孵育后采用培养基将细胞收集在试管中；
将试管中的含有细胞的培养基与AOPI荧光染料1:1混合后计数；
按照5000cells/well的比例将计数后的细胞配置成细胞悬液接种在24孔板上，将没有细胞的培养基接种至A1，B4，C3，D6孔内作为校正孔；
待细胞贴壁后补充培养基后放置在二氧化碳培养箱中待用；
细胞洗涤步骤：
将检测液加热到37℃后从二氧化碳培养箱中取出细胞板后观察细胞形态合格后用检测液洗涤细胞后观察后放置在37℃二氧化碳培养箱中待用；
细胞测定步骤：
配置符合工作浓度的寡霉素(Oligomycin)、线粒体解偶联剂(FCCP)、鱼藤酮与抗霉素A混合物(Rotenone+AntimycinA)三种化合物至工作浓度后根据依次注入细胞当中对细胞代谢进行感染，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：王瑛，雷颖，胡晓婷，
申请(专利权)人：赛济检验认证中心有限责任公司，
类型：发明
国别省市：上海;31