【技术实现步骤摘要】
一种肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的融合蛋白及其应用
本专利技术涉及一种肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的融合蛋白及其应用，属于生物医药领域。
技术介绍
肺炎克雷伯氏菌是一种普遍存在于环境中、人和动物皮肤表面和黏膜上的革兰氏阴性菌。它是条件致病菌，可引起肺炎、眼内炎、菌血症以及肝脓肿等疾病，容易感染幼儿以及年老体弱者，已成为目前医院和社区获得性感染的最主要致病因素。肺炎克雷伯氏菌常常具有耐药性，对其感染的治疗带来了巨大的困难。此外，近年来报道的能够产生超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯氏菌病例逐渐增加，临床上几乎面临无药可用的局面；另外高毒力肺炎克雷伯氏菌的出现，使得健康的成年人也极易感染该病原菌，并且由于耐药菌和高毒力菌株越来越具有交叉和重叠的趋势，使得研制出一种能够有效预防其感染的疫苗非常迫切。肺炎克雷伯氏菌胞外多糖的抗体对预防细菌感染具有十分重要的作用，但单独的多糖抗原免疫后不能有效地激发机体反应，无法产生有效的免疫应答。将细菌表面多糖与载体蛋白连接制备而成的多糖结合疫苗，由于同时激发了T细胞依赖和非依赖免疫应答，免疫效果大大增强，...
【技术保护点】
1.一种肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的蛋白质的制备方法，其特征在于，包括使蛋白质的编码基因在生物中进行表达得到肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的蛋白质的步骤，/n所述蛋白质为a)或b)或c)或d)：/na)由SEQ ID No.3的氨基酸序列组成的蛋白质；/nb)由SEQ ID No.5的氨基酸序列组成的蛋白质；/nc)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；/nd)将a)或b)所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的蛋白质。/n
【技术特征摘要】
1.一种肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的蛋白质的制备方法，其特征在于，包括使蛋白质的编码基因在生物中进行表达得到肺炎克雷伯氏菌多糖修饰的蛋白质的步骤，
所述蛋白质为a)或b)或c)或d)：
a)由SEQIDNo.3的氨基酸序列组成的蛋白质；
b)由SEQIDNo.5的氨基酸序列组成的蛋白质；
c)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；
d)将a)或b)所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：其特征在于，所述蛋白质的编码基因为如下1)或2)或3)或4)或5)所示的基因：
1)编码序列是SEQIDNo.4所示的DNA分子；
2)编码序列是SEQIDNo.4的第178-792位所示的DNA分子；
3)编码序列是SEQIDNo.6所示的DNA分子；
4)编码序列是SEQIDNo.6的第178-654位所示的DNA分子；
5)与1)或2)或3)或4)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码所述蛋白质。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于；所述生物为微生物、植物或非人动物。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述使蛋白质的编码基因在生物中进行表达包括将所述蛋白质的编码基因导入受体微生物，得到表达所述蛋白质的重组微生物，培养所述重组微生物，表达得到所述蛋白质。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述重组微生物为1)或2)
1)将pET28-tacpglL-tacCTBTri4573导入脂多糖合成缺陷的肺炎克雷伯氏菌355株感受态细胞得到的表达氨基酸序列是SEQIDNo.3的蛋白质的重组微生物，所述载体pET28-tacpglL-tacCTBTri4573为将pET28-tacpglL的SacI和XhoI识别位点之间的序列替换为SEQIDNo.4的第7-792位核苷酸，并保持其他序列不变的重组载体；所述pET28-tacpglL为将pET28a(+)的XbaI和XhoI识别位点之间的序列替换为SEQIDNo.2第7-2485核苷酸序列后得到的重组载体；
2)将pET28-tacpglL-tacCTB4573导入脂多糖合成缺陷的...
【专利技术属性】
技术研发人员：王恒樑，朱力，张璐璐，潘超，吴军，孙鹏，冯尔玲，刘波，曾明，王斌，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11
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