用于提高刺糖孢菌中多杀菌素产量的基因及其应用制造技术

本发明专利技术提供了用于提高刺糖孢菌中多杀菌素产量的基因及其应用。具体地，本发明专利技术提供了一种多杀菌素生产菌株的构建方法，在出发菌株中，增强多杀菌素合成相关蛋白的活性或导入外源性的多杀菌素合成相关蛋白。通过实验证实，多杀菌素合成相关蛋白的活性增强或包含外源性的多杀菌素合成相关蛋白的遗传改造工程菌株，多杀菌素的生产能力显著提高。

【技术实现步骤摘要】
用于提高刺糖孢菌中多杀菌素产量的基因及其应用
本专利技术涉及基因工程或分子生物学领域，具体地，本专利技术涉及用于提高刺糖孢菌中多杀菌素产量的基因及其应用。
技术介绍
刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinosa)属于糖多孢菌属，可产生多种新型大环内酯类化合物A83543(1)。目前，从该类菌发酵液中至少分离到30种结构类似物，依次命名为SpinosynA，B，C等，其中以SpinosynA和D活性最高(2)。美国陶氏益农公司于1997年推出以SpinosynA和D为活性物的新型高效生物杀虫剂多杀菌素(Spinosad)。多杀菌素杀虫谱广，对蜘蛛、线虫、昆虫均有控制作用，特别是对鳞翅目和双翅目害虫有较好的毒杀作用；该类物质在环境中易降解，对哺乳动物、鸟类以及捕食性昆虫相对低毒，表现出更好的环境安全性。Spinosyns类物质主要由三部分组成，核心骨架为21碳形成的12元大环内酯，另加一个鼠李糖和一个福乐胺糖。刺糖多孢菌不同菌株产生这类化合物的比例组分有所不同，如NRRL18395、18537、18538、18539主要产生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多杀菌素生产菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：/n在出发菌株中，增强多杀菌素合成相关蛋白的活性或导入外源性的多杀菌素合成相关蛋白，其中，所述多杀菌素合成相关蛋白包括一种或多种选自下组的多肽：/n(a)具有如SEQ ID NO.:6-10中任一所示的氨基酸序列的多肽；/n(b)将如SEQ ID NO.:6-10中任一所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有多杀菌素合成相关蛋白活性的由(a)衍生的多肽；/n(c)氨基酸序列与SEQ ID NO.:6-10中任一所示序列的同源性≥85％(较佳地≥90％、95％、更佳地≥98％)，具有多杀菌素...

【技术特征摘要】
1.一种多杀菌素生产菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：
在出发菌株中，增强多杀菌素合成相关蛋白的活性或导入外源性的多杀菌素合成相关蛋白，其中，所述多杀菌素合成相关蛋白包括一种或多种选自下组的多肽：
(a)具有如SEQIDNO.:6-10中任一所示的氨基酸序列的多肽；
(b)将如SEQIDNO.:6-10中任一所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有多杀菌素合成相关蛋白活性的由(a)衍生的多肽；
(c)氨基酸序列与SEQIDNO.:6-10中任一所示序列的同源性≥85％(较佳地≥90％、95％、更佳地≥98％)，具有多杀菌素合成相关蛋白活性的多肽。


2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述多杀菌素合成相关蛋白至少包括具有如SEQIDNO.:10所示的氨基酸序列的多肽。


3.一种多杀菌素生产菌株，其特征在于，所述菌株中多杀菌素合成相关蛋白的活性增强或包含外源性的多杀菌素合成相关蛋白，其中，所述多杀菌素合成相关蛋白包括一种或多种选自下组的多肽：
(a)具有如SEQIDNO.:6-10中任一所示的氨基酸序列的多肽；
(b)将如SEQIDNO.:6-10中任一所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有多杀菌素合成相关蛋白活性的由(a)衍生的多肽；
(c)氨基酸序列与SEQIDNO.:6-10中任一所示序列的同源性≥85％(较佳地≥90％、95％、更佳地≥98％)，具有多杀菌素合成相关蛋白活性的多肽。


4.如权利要求3所述的多杀菌素生产菌株的用途，其特征在于，用于产生多杀菌素和/或产生以多杀菌素为前体下游产物。


5.一种制备多杀菌素的方法，其特征在于，包括步骤：
1)发酵培养权利要求3所述的多杀菌素生产菌株，从而得到多杀菌素；和
2)任选从1)的发酵培养体系中获得多杀菌素。


6.一种赋予或增强菌株多杀菌素生产能力的方法，其特征在于，包括步骤：
在出发菌株中，增强多杀菌素合成相关蛋白的活性或导入外源性的多杀菌素合...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏海洋，马小舒，覃重军，
申请(专利权)人：中国科学院分子植物科学卓越创新中心，
类型：发明
国别省市：上海;31