一种在活细胞表面锚定修饰纳米药物的方法技术

本发明专利技术公开了一种在活细胞表面锚定修饰纳米药物的方法。通过细胞膜锚定分子的疏水尾链将活性反应基团引入到活细胞表面，在纳米药物表面修饰对应反应基团，活细胞表面修饰的活性反应基团与纳米药物表面修饰的对应反应基团发生生物正交点击反应，从而将纳米药物锚定修饰到细胞表面得到修饰了纳米药物的活细胞。本发明专利技术方法简便、快捷、通用，可以应用到各种具有脂质膜结构的细胞包括原代细胞，并且经过这种改造后不会影响细胞自身的功能，为细胞改造提供了一个新的技术平台，具有非常广阔的应用前景。本发明专利技术公开的通过上述细胞改造技术得到的细胞药物，相比于单纯的细胞及单纯的纳米药物具有最佳的治疗效果，为多种疾病治疗提供新思路和新药物。

【技术实现步骤摘要】
一种在活细胞表面锚定修饰纳米药物的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种在活细胞表面锚定修饰纳米药物的方法。
技术介绍
随着纳米技术的发展，纳米药物在各种疾病治疗中的应用越来越广泛，1964年第一个纳米药物问世以来，其他类型的纳米药物例如聚合物胶束，白蛋白纳米粒等相继问世，迄今为止已有36个纳米药物上市。但是，纳米药物存在一定的局限性，从给药部位到靶部位需要克服层层生理屏障，包括血液、组织、细胞等，最终到达靶部位的药量仅有给药剂量的5％-8％，靶向效率较低，临床疗效不够理想。为了提高纳米药物的靶向效率，应用内源性细胞作为递送纳米药物的工具得到了广泛研究。一方面内源性细胞可以帮助纳米药物逃避网状内皮系统(ReticuloendothelialSystem，RES)的识别，且提高纳米药物富集于特定组织的能力，从而提高其体内滞留时间及靶向效率；另一方面内源性细胞如T细胞(含嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)、T细胞受体基因工程改造的T细胞(TCR-T细胞))、自然杀伤细胞(Naturalkillercells，NK)可用于过继性细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在细胞表面锚定修饰纳米药物的方法，其特征在于通过细胞膜锚定分子的疏水尾链将活性反应基团引入到活细胞表面，在纳米药物表面修饰对应反应基团，活细胞表面修饰的细胞膜锚定分子的活性反应基团与纳米药物表面修饰的对应反应基团发生生物正交点击反应，从而将纳米药物锚定修饰到细胞表面得到修饰了纳米药物的活细胞。/n

【技术特征摘要】
20191030 CN 20191104710851.一种在细胞表面锚定修饰纳米药物的方法，其特征在于通过细胞膜锚定分子的疏水尾链将活性反应基团引入到活细胞表面，在纳米药物表面修饰对应反应基团，活细胞表面修饰的细胞膜锚定分子的活性反应基团与纳米药物表面修饰的对应反应基团发生生物正交点击反应，从而将纳米药物锚定修饰到细胞表面得到修饰了纳米药物的活细胞。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的细胞膜锚定分子结构通式如下：



其中，R1为常见脂质或6-20个C的长链烷烃；
n＝8-200，优选n＝20-100；

为活性反应基团，选自叠氮、氮杂二苯并环辛炔、巯基、氨基、马来酰亚胺、α，β-不饱和羰基、四氮嗪、双环[6.1.0]壬炔中的任意一种。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的常见脂质选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺、1,2-十六烷基-3-甘油-磷酸乙醇胺或胆固醇；优选二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺。


4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的n＝20-100。


5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的活性反应基团选自四氮嗪、双环[6.1.0]壬炔、叠氮、氮杂二苯并环辛炔中的任意一种。


6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的活细胞选自人或动物具有脂质膜结构的原代细胞或永生化细胞，优选肿瘤细胞、中性粒细胞、T细胞、间充质干细胞、造血干细胞、自然杀伤细胞、抗原递呈细胞、巨噬细胞中的任意一种，进一步优选T细胞或中性粒细胞；所述的T细胞选自嵌合抗原受体T细胞、T细胞受体基因工程改造的T细胞或普通未经修饰的T细胞。


7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的纳米药物为载有治疗剂的纳米粒；所述的纳米粒为粒径为1-1000nm的脂质体、纳米囊泡、固体脂质纳米粒或胶束。


8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述的治疗剂为治疗肿瘤或炎性相关疾病的药物，选自小分子化学药物、蛋白治疗药物或基因治疗药物中的一种或多种；所述的小分子化学药物优选疏水性药物或亲水性药物，所述的疏水性药物选自阿伐麦布、紫杉醇、槲皮素、BAY87-2243、TGF-β抑制剂、白皮杉醇中的任意一种或多种，所述的亲水性药物选自阿霉素、柔红霉素、丝裂霉素中的任意一种或多种；所述的蛋白治疗药物优选PD-1单抗、PD-L1单抗，所述的基因治疗药物优选siRNA、mRNA、shRNA、质粒。


9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述的治疗剂选自阿伐麦布、紫杉醇或PD-1单抗。


10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于通过对应反应基团修饰剂将对应反应基团修饰到纳米药物表面；所述的对应反应基团修饰剂为含有对应反应基团的脂质，其通式为
其中，X＝-NH，O，
R1为常见脂质或链长为6-20个C的长链烷烃；

为对应反应基团，选自氮杂二苯并环辛炔、叠氮、马来酰亚胺、巯基、氨基、双环[6.1.0]壬炔、或四氮嗪中的任意一种，优选双环[6.1.0]壬炔、四氮嗪、氮杂二苯并环辛炔、叠氮中的任意一种。


11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的生物正交点击反应选自酮/羟胺缩合，巯基或氨基与马来酰亚胺的迈克尔加成反应，环张力驱动的叠氮-炔...

【专利技术属性】
技术研发人员：张灿，鞠曹云，郝玫茜，侯思源，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32