乙型肝炎病毒（HBV）特异性B细胞表位检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了乙型肝炎病毒(HBV)特异性B细胞检测方法及其应用。本方法首次利用HBV病毒蛋白重叠多肽对HBV感染者血清抗体识别的HBV蛋白B细胞线性表位进行检测，克服了现有技术中无法检测HBV特异性B细胞表位的技术缺陷；本发明专利技术使用的单肽检测浓度仅需0.68μg/mL，成本低，操作简单，快速，检测结果相较与现有技术更加准确，尤其是对于常规方法无法检测的慢性HBV感染，本发明专利技术在能完全检测到的情况下，还能对表位做出准确的分析，具有极高的市场价值。

【技术实现步骤摘要】
乙型肝炎病毒（HBV）特异性B细胞表位检测方法及其应用
本专利技术涉及细胞检测领域，具体涉及乙型肝炎病毒(HBV)特异性B细胞表位检测方法及其应用。
技术介绍
HBV感染可导致严重肝病，包括急性和慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌。1990年至2015年之间，世界肝癌的发病率增加了75％，其中42％为HBV继发的相关肝细胞癌(HCC)。最新统计表明，病毒性肝炎已成为全球发病率和死亡率的第七大诱因，每年共计造成全球145万人死亡，其死亡率远超艾滋病毒、疟疾和结核病。在HBV感染过程中，适应性免疫应答决定了HBV感染的预后。既往研究多聚焦于HBV特异性T细胞免疫应答方面，对HBV特异性B细胞的作用机制研究较少。目前，现有技术中对于B细胞表位研究方法的方法主要有蛋白质化学技术、分子生物学技术、噬菌体表达肽库法、预测法、X射线晶体衍射以及NMR(核磁共振)技术等。蛋白质化学技术，主要通过化学试剂或酶处理抗原，将抗原分解成多种小片段，通过分析这些抗原小片段与抗体或者抗血清的作用判定抗原-抗体相互作用的位置。或采用水解抗原-抗体复合物法(即本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HBV特异性B细胞表位的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：/n采集血清样品；/n用检测肽库包被液对容器包被，洗涤，加入封闭液封闭；/n去除封闭液，加入采集的血清样品，孵育；/n洗涤，加入山羊抗人IgG-biotin抗体，孵育；/n洗涤，加入显色剂，孵育，加入显示终止液，根据反应结果，定性HBV特异性B细胞表位；/n其中，所述检测肽库包括构成同一种HBV蛋白的单肽中的一种或多种。/n

【技术特征摘要】
1.一种HBV特异性B细胞表位的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
采集血清样品；
用检测肽库包被液对容器包被，洗涤，加入封闭液封闭；
去除封闭液，加入采集的血清样品，孵育；
洗涤，加入山羊抗人IgG-biotin抗体，孵育；
洗涤，加入显色剂，孵育，加入显示终止液，根据反应结果，定性HBV特异性B细胞表位；
其中，所述检测肽库包括构成同一种HBV蛋白的单肽中的一种或多种。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中设置有阴性对照；所述阴性对照的封闭液为HIVP29蛋白包被液10-20μg/mL。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，通过所述显色反应后的光密度值判断所述样品的反应结果；
若显色反应后的样品光密度值为阴性对照中的光密度值的两倍或以上，则样品中含有检测肽库中的HBV蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：李咏茵，唐利波，易璇，郭玲，王卫彬，古书琴，温春花，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：广东;44