一种偶联抗体的荧光微球及其制备方法与用途技术

本发明专利技术公开了一种偶联抗体的荧光微球及其制备方法与用途，将荧光微球溶液、NHS和EDC溶液在超声波条件下活化反应，后离心、分离、稀释分散获得活化荧光微球溶液；将活化荧光微球溶液与抗体溶液在超声波条件下进行偶联反应获得偶联反应液；将偶联反应液与封闭液在超声波条件下进行封闭反应，获得封闭反应液；将所述封闭反应液离心、分离，复溶后混匀获得偶联抗体的荧光微球；所述超声波条件均为：超声波频率20KHZ～80KHZ，采用多次超声方式，相邻两次超声之间存在间隔时间，其中，单次超声时间3～10s，间隔时间为3～10s，超声总时间为3min～30min。有效提升反应偶联效率，偶联抗体的荧光微球均一性与稳定性好。

【技术实现步骤摘要】
一种偶联抗体的荧光微球及其制备方法与用途
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种偶联抗体的荧光微球及其制备方法与用途。
技术介绍
免疫层析检测技术是基于免疫标记技术和色谱层析技术发展起来的一种可用于检测抗原、抗体的检测技术，其特点是基于抗原抗体的特异性免疫学反应和层析技术，通过试剂盒的形式，实现快速、准确、简单、特异性的检测目的。时间分辨荧光免疫层析试纸是免疫层析检测技术中的一种重要的检测工具。将时间分辨荧光微球与相应的抗原抗体标记，基于抗原抗体的特异性免疫学反应，通过时间分辨荧光微球的特异性信号，实现对待测抗原抗体的准确定量检测。目前常规使用的时间分辨荧光微球的标记，均是基于EDC/NHS等活化荧光微球，通过涡旋/振荡等混匀操作，提供微球的活化、微球与抗体的偶联反应环境。一般而言，通过涡旋/振荡等混匀操作，微球与抗原抗体的偶联，需要2小时至24小时，反应过程中，经常出现由于涡旋/振荡设备的规律性运转，导致反应溶液与容器器壁规律性接触，从而造成微球及抗原抗体与容器器壁的不均匀性吸附，导致荧光微球与抗体的偶联效率不高且耗时过长，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种偶联抗体的荧光微球的制备方法，其特征在于，所述方法包括：/n获得荧光微球溶液、NHS溶液、EDC溶液和交联反应溶液；/n将所述荧光微球溶液、所述NHS溶液和所述EDC溶液在第一超声波条件下进行活化反应，后进行离心和/或固液分离，获得第一固体，将所述第一固体使用所述交联反应溶液稀释，后分散，获得活化荧光微球溶液；/n获得抗体溶液；将所述活化荧光微球溶液与所述抗体溶液混匀，后在第二超声波条件下进行偶联反应，获得偶联反应液；/n获得封闭液；将所述偶联反应液与所述封闭液混匀，后在第三超声波条件下进行封闭反应，获得封闭反应液；/n获得复溶溶液；将所述封闭反应液进行离心和/或固液分离，获得第二固体...

【技术特征摘要】
1.一种偶联抗体的荧光微球的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
获得荧光微球溶液、NHS溶液、EDC溶液和交联反应溶液；
将所述荧光微球溶液、所述NHS溶液和所述EDC溶液在第一超声波条件下进行活化反应，后进行离心和/或固液分离，获得第一固体，将所述第一固体使用所述交联反应溶液稀释，后分散，获得活化荧光微球溶液；
获得抗体溶液；将所述活化荧光微球溶液与所述抗体溶液混匀，后在第二超声波条件下进行偶联反应，获得偶联反应液；
获得封闭液；将所述偶联反应液与所述封闭液混匀，后在第三超声波条件下进行封闭反应，获得封闭反应液；
获得复溶溶液；将所述封闭反应液进行离心和/或固液分离，获得第二固体，将所述第二固体用所述复溶溶液重悬后混匀，获得偶联抗体的荧光微球；
所述第一超声波条件、所述第二超声波条件和所述第三超声波条件均为：超声波频率为20KHZ～80KHZ，采用多次超声方式，且相邻两次超声之间存在间隔时间，其中，单次超声时间为3～10s，单次间隔时间为3～10s，超声总时间为3min～30min。


2.根据权利要求1所述的一种偶联抗体的荧光微球的制备方法，其特征在于，所述第一超声波中所述超声总时间为3min～10min。


3.根据权利要求1所述的一种偶联抗体的荧光微球的制备方法，其特征在于，所述第二超声波中所述超声总时间为10min～20min。


4.根据权利要求1所述的一种偶联抗体的荧光微球的制备方法，其特征在于，所述第三超声波条...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨文，李文叶，黄玲，舒芹，张雪娇，赵愿安，
申请(专利权)人：武汉生之源生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42