利用肿瘤抗原特异性T细胞反应预测肝癌消融术后是否易复发的成套多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了利用肿瘤抗原特异性T细胞反应预测肝癌消融术后是否易复发的成套多肽及其应用。本发明专利技术公开的成套多肽由序列表中序列1‑50所示的50条多肽组成。本发明专利技术通过检测消融术治疗肝癌前患者外周血单个核细胞中的T细胞对本发明专利技术的成套多肽的反应强度发现，复发组的T细胞对本发明专利技术的成套多肽的反应强度明显高于未复发组，说明可通过检测待测肝癌患者外周血单个核细胞中的肿瘤相关抗原特异性T细胞对本发明专利技术的成套多肽的反应预测消融术后的复发风险或进行预后，本发明专利技术的成套多肽具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
利用肿瘤抗原特异性T细胞反应预测肝癌消融术后是否易复发的成套多肽及其应用
本专利技术涉及生物医学领域中，利用肿瘤抗原特异性T细胞反应预测肝癌消融术后是否易复发的成套多肽及其应用。
技术介绍
原发性肝癌是中国第三位致死性肿瘤，其中85％～90％以上是肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)。因其缺乏灵敏的早期诊断标志物导致一经发现就到了肝癌晚期，失去了进行肝癌根除术的最佳治疗时期。另外，即使进行手术治疗患者，HCC的复发率也很高。所以，临床对于HCC诊疗的瓶颈则为：早诊率低，复发率高。近几年，随着相关临床试验的开展，肿瘤免疫治疗因其突出的有效性和安全性，在中晚期HCC的治疗中受到越来越广泛的关注，也给癌症患者带来了巨大的希望。肿瘤相关抗原(tumor-associatedantigens,TAAs)是而随着对肝癌的深入研究发现的一些非特异性表达于肿瘤细胞表面和非肿瘤细胞表面的物质。TAAs种类繁多，比如甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、卵巢癌抗原(CA125)等。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何预测肝细胞癌患者消融术后的复发风险。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了一种成套多肽，其名称为成套多肽A+B，所述成套多肽A+B由序列表中序列1-50所示的50条多肽组成。所述成套多肽A+B中，各多肽可独立包装也可包装在一起。所述成套多肽A+B中的各多肽的质量均相等。本专利技术还提供了另一种成套多肽，该成套多肽为由序列表中序列1-27所示的27条多肽组成的成套多肽A，或由序列表中序列28-50所示的23条多肽组成的成套多肽B。所述成套多肽A中，各多肽可独立包装也可包装在一起。所述成套多肽A中的各多肽的质量均相等。所述成套多肽B中，各多肽可独立包装也可包装在一起。所述成套多肽B中的各多肽的质量均相等。所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B可具有如下任一用途：X1、预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险；X2、制备预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险产品；X3、肝癌患者消融术后的预后或辅助预后；X4、制备肝癌患者消融术后的预后或辅助预后产品；X5、预测或辅助预测肝癌患者复发风险；X6、制备预测或辅助预测肝癌患者复发风险产品；X7、预防或辅助预防肝癌患者复发；X8、制备预防或辅助预防肝癌患者复发产品。本专利技术还提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B。所述试剂盒还可包括进行酶联免疫斑点实验所需的其他试剂。所述试剂盒中，所述其他试剂可为IFN-gamma抗体(如抗IFN-gamma单克隆抗体)、二抗(如BiotinylateddetectionmAb(7-B6-1)，Mabtech公司，美国，货号：3420-2A)和/或连有荧光素的三抗(如Streptavidin-ALP,Mabtech公司，美国，货号：3420-2A)。所述试剂盒可仅由所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B组成，还可由成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B与所述进行酶联免疫斑点实验所需的其他试剂组成。所述试剂盒可用于预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险，还可用于肝癌患者消融术后的预后或辅助预后，还可用于预防或辅助预防肝癌患者复发，也可用于预测或辅助预测肝癌患者复发风险。本专利技术还提供了所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B的下述任一应用：Y1、制备预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险产品；Y2、制备肝癌患者消融术后的预后或辅助预后产品；Y3、制备预测或辅助预测肝癌患者复发风险产品；Y4、制备预防或辅助预防肝癌患者复发产品。本专利技术还提供了所述试剂盒的下述任一应用：Y1、制备预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险产品；Y2、制备肝癌患者消融术后的预后或辅助预后产品；Y3、制备预测或辅助预测肝癌患者复发风险产品；Y4、制备预防或辅助预防肝癌患者复发产品。本专利技术还提供了预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险的产品，所述产品含有所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B。本专利技术还提供了肝癌患者消融术后的预后或辅助预后的产品，含有所述成套多肽A+B，或所述成套多肽A，或所述成套多肽B。上述产品还可用于预防或辅助预防肝癌患者复发或预测或辅助预测肝癌患者复发风险。本专利技术中，所述肝癌可为肝细胞癌。在本专利技术的实施例中，肝细胞癌满足如下条件：中国肝癌的分期方案Ia、Ib或IIa期，且符合PS0-2分+ChildA-B级+无肝外转移+无血管侵犯。所述复发可为消融术后6个月内的复发。消融术以肿瘤完全毁损且出现0.5-1cm的消融边缘为完成治疗。本专利技术中，在预测肝癌患者消融术后复发风险，或肝癌患者消融术后的预后时，所检测样本为待测肝癌患者的外周血中的外周血单个核细胞。具体的，所检测样本为待测肝癌患者外周血中的T细胞(如肿瘤相关抗原特异性T细胞(tumor-associatedantigensspecificTcells,TAS-T))。具体的，如果待测肝癌患者的T细胞对所述成套多肽A+B或所述成套多肽A或所述成套多肽B的反应强，则该患者消融术后复发风险高，即复发率高，预后较差；如果待测肝癌患者的T细胞对所述成套多肽A+B或所述成套多肽A或所述成套多肽B的反应弱，则该患者消融术后复发风险低，即复发率低，预后较好。本专利技术通过检测消融术治疗肝癌前患者外周血单个核细胞中的T细胞对本专利技术的成套多肽的反应强度发现，复发组的T细胞对本专利技术的成套多肽的反应强度明显高于未复发组，说明可通过检测待测肝癌患者外周血单个核细胞中的肿瘤相关抗原特异性T细胞对本专利技术的成套多肽的反应预测消融术后的复发风险或进行预后，本专利技术的成套多肽具有很好的应用前景。附图说明图1为早期复发组(复发)和未复发组(未复发)的患者接受治疗前的外周血单个核细胞中T细胞的反应强度。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。以下提供的实施例可作为本
普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本专利技术的限制。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂、仪器等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。实施例1、成套多肽的制备本实施例提供了一组由成套多肽A和成套多肽B组成的成套多肽，记为成套多肽A+B。成套多肽A由27条多肽组成，见表1，成套多肽A中各多肽的质量均相等。成套多肽B由23条多肽组成，见本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.成套多肽，由序列表中序列1-50所示的50条多肽组成。/n

【技术特征摘要】
1.成套多肽，由序列表中序列1-50所示的50条多肽组成。


2.成套多肽，由序列表中序列1-27所示的27条多肽组成，或由序列表中序列28-50所示的23条多肽组成。


3.一种试剂盒，包括权利要求1或2所述的成套多肽。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括进行酶联免疫斑点实验所需的其他试剂。


5.权利要求1或2所述的成套多肽的下述任一应用：
Y1、制备预测或辅助预测肝癌患者消融术后复发风险产品；
Y2、制备肝癌患者消融术后的预后或辅助预后产品；
Y3、制备预测或辅助预测肝癌患者复发风险产品；
Y4、制备预防或辅助预防肝癌患者复发产品。

【专利技术属性】
技术研发人员：覃岭，臧超然，赵艳，张永宏，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京佑安医院，
类型：发明
国别省市：北京;11