用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的荧光定量RT-PCR引物、探针及试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的双重荧光定量RT‑PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物和探针包括：(1)序列如SEQ ID NO.1‑3所示的检测H1亚型猪流感病毒的引物和探针；(2)序列如SEQ ID NO.4‑6所示的检测H3亚型猪流感病毒的引物和探针。本发明专利技术还提供了包括上述引物和探针的试剂盒。本发明专利技术用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型，具有快速、特异性强、灵敏度高等特点，不仅可以在临床流行病学调查中对猪的鼻腔拭子和肺脏、气管等组织样品以及鸡胚尿囊液进行检测，而且也适用于病毒体内感染性实验的定量测定。

【技术实现步骤摘要】
用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的荧光定量RT-PCR引物、探针及试剂盒
本专利技术属于病毒病原学检测领域，主要涉及H1、H3亚型猪流感病毒检测与分型的荧光定量RT-PCR方法中的引物探针组。
技术介绍
猪流感病毒(Swineinfluenzavirus，SIV)在分类上隶属于正黏病毒科的A型流感病毒属，由其引起的猪流感(swineinfluenza,SI)是猪群中常见的一种急性、高度接触性呼吸道传染病；并且，该病毒易与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体、猪圆环病毒、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌等发生继发感染或混合感染，严重危害猪群健康及生产性能。全球范围内流行的SIV主要有3种亚型：H1N1、H1N2、H3N2(HuanliangYang,YanChen,ChuanlingQiao,etal.Prevalence,genetics,andtransmissibilityinferretsofEurasianavian-likeH1N1swineinfluenzaviruses.ProcNatlAcadSciUSA.2016,1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的双重荧光定量RT-PCR的引物和探针，其特征在于包括两对特异性引物和探针，所述引物及探针序列如下：/n(1)检测H1亚型猪流感病毒的引物及探针：/nH1-上游引物:GGCTAYCATGCBAACAATTC/nH1-下游引物:TGGGTTGCCMAGGATCCA/nH1-探针：FAM-ACAGACACTGTMGACACA-MGB/n(2)检测H3亚型猪流感病毒的引物及探针：/nH3-上游引物:GAAATGGGAAAAGCTCAATAATGA/nH3-下游引物：ATTTCTCATYCCTGTTGCCAA/nH3-探针：HEX-CCAAATGGAAGC...

【技术特征摘要】
1.一种用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的双重荧光定量RT-PCR的引物和探针，其特征在于包括两对特异性引物和探针，所述引物及探针序列如下：
(1)检测H1亚型猪流感病毒的引物及探针：
H1-上游引物:GGCTAYCATGCBAACAATTC
H1-下游引物:TGGGTTGCCMAGGATCCA
H1-探针：FAM-ACAGACACTGTMGACACA-MGB
(2)检测H3亚型猪流感病毒的引物及探针：
H3-上游引物:GAAATGGGAAAAGCTCAATAATGA
H3-下游引物：ATTTCTCATYCCTGTTGCCAA
H3-探针：HEX-CCAAATGGAAGCATT-MGB。


2.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，所述检测H1亚型猪流感病毒的探针5’端使用FAM荧光基团标记，3‘端使用猝灭基团MGB标记；检测H3亚型猪流感病毒的探针5‘端使用HEX荧光基团标记，3’端使用猝灭基团MGB标记。


3.权利要求1或2所述的引物和探针在制备用于检测H1和H3亚型猪流感病毒的制品中的应用。


4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的制品为...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾敏，陈凯彪，刘秀梵，施丽微，王晓泉，龙进学，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32