一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用制造技术

技术编号:26162385 阅读:55 留言:0更新日期:2020-10-31 12:52
本发明专利技术涉及检测技术领域,具体而言,涉及一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。该检测试剂盒包含正反向引物及探针、侧流层析试纸条;所述反向引物5'端用生物素进行标记;所述探针5'端用Fluorescein Isothiocyanate(FITC)标记,中间区域C碱基(距5'端至少30bp、距3'端至少15bp)用[THF]进行替换,3'端用C3‑spacer进行末端封闭。本发明专利技术使用RPA‑LFS(The isothermal recombinase polymerase amplification and the lateral flow strip)方法能够在不依赖仪器设备的非实验室环境下,实现实时、实地、即时的快速现场检测,且准确率高。

【技术实现步骤摘要】
一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用
本专利技术涉及检测
,尤其涉及一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。
技术介绍
虹鳟(Oncorhynchusmykiss),属于鲑科(Salmonidae)、大马哈鱼属(Oncorhynchus),自19世纪起在美国开始淡水养殖,我国曾从朝鲜、美国、日本等国多次引种,目前在20多个省市区都有人工养殖,是国内养殖范围较广的冷水鱼类。生食淡水养殖的虹鳟鱼掺假的三文鱼,相比海水养殖的三文鱼,极易带来寄生虫感染的风险。因此,迫切需要建立快速准确的检测手段,用于鉴定三文鱼中掺假的虹鳟。随着分子生物学技术的发展,以聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction,PCR)为基础的DNA分析成为目前物种鉴定方法的主流。例如,DNA条形码技术和荧光定量PCR等。但DNA条形码技术需要对PCR扩增产物进行测序,成本高且耗时较长;荧光定量PCR对设备和操作水平的要求较高;近年由于重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA技术)、侧流层析试纸条检测技术(LFS)的兴起,本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针,其特征在于,其正向引物和反向引物分别为om-F、om-R,且序列分别为ATGCATGCAATCCGTAGCTACCCTCTCCCCTCCAC、Biotin-AAGCTAATATTTTCTGTGCCAAGCAGTCAGTGGGT,其探针为om-P,且序列为FITC-ACTAGGATTTATGGCTGAACGTTTCTATAG[THF]GTTTTGCTGAGTAGAC-/C3-spacer/。/n

【技术特征摘要】
1.一种虹鳟鱼特异性正反向引物及探针,其特征在于,其正向引物和反向引物分别为om-F、om-R,且序列分别为ATGCATGCAATCCGTAGCTACCCTCTCCCCTCCAC、Biotin-AAGCTAATATTTTCTGTGCCAAGCAGTCAGTGGGT,其探针为om-P,且序列为FITC-ACTAGGATTTATGGCTGAACGTTTCTATAG[THF]GTTTTGCTGAGTAGAC-/C3-spacer/。


2.一种虹鳟鱼特异性的检测试剂盒,其特征在于,其包含权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵盼盼董井泉高嵩王蕾杨潇含董宇张玮
申请(专利权)人:江苏海洋大学连云港海恒生化科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

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