用于鉴定短乳杆菌的恒温检测方法及其专用引物与试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种用于鉴定短乳杆菌的恒温检测方法及其专用引物与试剂盒。本发明专利技术提供的特异引物组，由引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB组成，六种引物依次如序列表的序列2至7所示。所述特异引物组的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)鉴定或辅助鉴定短乳杆菌；(b2)检测待测样本中是否含有短乳杆菌。本发明专利技术利用环介导等温扩增技术扩增短乳杆菌特异性基因片段，填补了啤酒中短乳杆菌LAMP检测方法的空白，具特异性强、操作简单、快速便捷等优点，可用于啤酒质量监控，适合酒厂基层应用和现场快速检测。

【技术实现步骤摘要】
用于鉴定短乳杆菌的恒温检测方法及其专用引物与试剂盒
本专利技术属于生物
，涉及一种用于鉴定短乳杆菌的恒温检测方法及其专用引物与试剂盒。
技术介绍
短乳杆菌(Lactobacillusbreris)广泛分布于自然界中，属乳杆菌目、乳杆菌科、短乳杆菌属，常见于牛奶、酸乳酒、干酪、酸泡菜中。啤酒中存在短乳杆菌时，常引起啤酒酸度升高、粘度增加，更甚者造成啤酒浑浊沉淀，影响啤酒口感品质。由短乳杆菌污染引起的啤酒质量事件屡见不鲜，据统计，日常啤酒污染事件中50％以上是由短乳杆菌引起的，短乳杆菌的快速检测成为啤酒厂质量监控亟待解决的一大问题。目前对于短乳杆菌的检测方法主要有培养鉴定法、生物发光和免疫学方法及分子生物学方法。培养鉴定法是应用NBB-A、NBB-B、MRS等培养基进行菌体培养，并通过染色镜检、生理生化实验等确定菌体类型，是目前国内啤酒厂最常用的检测方法。这种方法在目前所有类型的检测方法中精确度较高、成本小、对实验人员要求低，能够满足基层应用需求，但无论采用哪个那种培养基进行培养鉴定，结果检出都需要5-7天以上，无法及时反映啤酒污染情本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.特异引物组，由引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB组成；/n所述引物F3为如下(a1)或(a2)：/n(a1)序列表的序列2所示的单链DNA分子；/n(a2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；/n所述引物B3为如下(a3)或(a4)：/n(a3)序列表的序列3所示的单链DNA分子；/n(a4)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；/n所述引物FIP为如下(a5)或(a6)：/n(a5)序列表的序列4所示的单链DNA分子；/n(a6)将序列4经过一个或几个核苷...

【技术特征摘要】
1.特异引物组，由引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB组成；
所述引物F3为如下(a1)或(a2)：
(a1)序列表的序列2所示的单链DNA分子；
(a2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；
所述引物B3为如下(a3)或(a4)：
(a3)序列表的序列3所示的单链DNA分子；
(a4)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；
所述引物FIP为如下(a5)或(a6)：
(a5)序列表的序列4所示的单链DNA分子；
(a6)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；
所述引物BIP为如下(a7)或(a8)：
(a7)序列表的序列5所示的单链DNA分子；
(a8)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；
引物LF如下(a9)或(a10)：
(a9)序列表的序列6所示的单链DNA分子；
(a10)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子。
引物LB如下(a11)或(a12)：
(a11)序列表的序列7所示的单链DNA分子；
(a12)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子。


2.权利要求1所述特异引物组在制备试剂或试剂盒中的应用；所述试剂或试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)鉴定或辅助鉴定短乳杆菌；(b2)检测待测样本中是否含有短乳杆菌。


3.特异试剂，包括如下组分：权利要求1所述特异引物组；所述特异试剂为液态，每11μL检测试剂中，各引物含量为：引物F32.5pmol、引物B32.5pmol、引物FIP20pmol、引物BIP20pmol、引物LF10pmol、引物LB10pmol。


4.含有权利要求1所述特异引物组或权利要求3所述特异试剂的试剂盒；所述试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)鉴定或辅助鉴定短乳杆菌；(b2)检测待测样本中是否含...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭立芸，刘秀，谢鑫，梁玉林，徐文文，丁梦璇，周鹏飞，宋玉梅，尹建军，贾凤超，宋全厚，
申请(专利权)人：北京燕京啤酒股份有限公司，中国食品发酵工业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11