一种胸部脂肪填充用干细胞组合物及其应用制造技术

本发明专利技术实施例涉及一种胸部脂肪填充用干细胞组合物及其应用。该胸部脂肪填充用干细胞组合物，包括以下组分：脂肪干细胞、成纤维细胞、浓缩生长因子、富血小板纤维蛋白以及间充质干细胞分泌的外泌体，其中：每1ml含(1‑10)×10

【技术实现步骤摘要】
一种胸部脂肪填充用干细胞组合物及其应用
本专利技术涉及细胞制品，具体涉及一种胸部脂肪填充用干细胞组合物及其应用。
技术介绍
目前市面上丰胸主要通过两种方式，即：假体丰胸和脂肪丰胸。假体丰胸一次成型，但假体本身有寿命期限且副作用多，如：可能引起血肿、假体破裂、包膜挛缩、乳房变硬、感觉异常、操作不当带来位置异常、做胸部检查X光时会遮挡射线。脂肪丰胸是向胸部注入未经处理的脂肪团，但注入的脂肪团在体内容易被吸收，无法达到效果。人们一直在寻找能提高脂肪移植成活率的方法。公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术的目的在于提供一种胸部脂肪填充用干细胞组合物及其应用。本专利技术实施例中的胸部脂肪填充用干细胞组合物中，使用了CGF、PRF和MSC外泌体以促进机体干细胞存活和生长。CGF和PRF除了具有生长因子、细胞因子外，还具有网络状纤维蛋白凝胶结构，可以作为脂肪干细胞和成纤维细胞存活和生长的支架，而CGF和PRF本身具有的生长因子、细胞因子又可以促进支架上的干细胞存活和生长。MSC外泌体因其包含多种物质，可以促进机体干细胞存活和生长。解决方案为实现本专利技术目的，本专利技术实施例提供了一种胸部脂肪填充用干细胞组合物，其包括以下组分：脂肪干细胞、成纤维细胞、浓缩生长因子、富血小板纤维蛋白以及间充质干细胞分泌的外泌体，其中：每1ml含(1-10)×107脂肪干细胞的溶液与0.5-2ml含(1-10)×107成纤维细胞的溶液、1-2ml的浓缩生长因子、0.5-2ml的富血小板纤维蛋白、以及1-3ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合。在一种可能的实现方式中，每1ml含5×107脂肪干细胞的溶液与1ml含5×107成纤维细胞的溶液、1ml的浓缩生长因子、1ml的富血小板纤维蛋白以及2ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合。在一种可能的实现方式中，含脂肪干细胞的溶液与含成纤维细胞的溶液中，所用溶剂均为生理盐水。在一种可能的实现方式中，浓缩生长因子的制备方法包括以下步骤：将装有血液、不添加抗凝剂的采血管放置到离心机中，进行差速离心，所述差速离心的程序为：加速30秒；2700转/分钟离心2分钟；2400转/分钟离心4min；2700转/分钟离心4分钟；3000转/分钟离心3分钟；减速33s，离心后血液样品分三层：取中间层黄色部分为CGF。在一种可能的实现方式中，富血小板纤维蛋白的制备方法包括以下步骤：将装有血液、不添加抗凝素的采血管放置到离心机中，3000转/分钟离心10分钟；离心后血液分成3层，取中间层为富含血小板的纤维蛋白凝胶层。在一种可能的实现方式中，间充质干细胞分泌的外泌体的制备方法包括以下步骤：取间充质干细胞培养上清40mL，4000g，4℃离心20分钟，去除细胞或细胞碎片，离心后将上清吸入新管中，收集样本至于冰上；取处理后的细胞培养上清放入离心管中，加入外泌体沉淀试剂，混匀后4℃静置至少30min；静置后的样品12,000g，4℃离心30min，管底可见白色外泌体沉淀，吸去上清，加入100μl缓冲液溶解沉淀，获得重悬的外泌体；将重悬的外泌体转移至纯化柱，放入1.5mL收集管中，3,000×g，4℃离心10min，弃掉纯化柱，收集管中为提取的外泌体。本专利技术实施例还提供了上述胸部脂肪填充用干细胞组合物在制备胸部脂肪填充材料中的应用。一种胸部脂肪填充材料，包括上述胸部脂肪填充用干细胞组合物以及生理盐水。在一种可能的实现方式中，每1ml含(1-10)×107脂肪干细胞的溶液与0.5-2ml含(1-10)×107成纤维细胞的溶液、1-2ml的浓缩生长因子、0.5-2ml的富血小板纤维蛋白、以及1-3ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合，用生理盐水补充至50ml。在一种可能的实现方式中，每1ml含5×107脂肪干细胞的溶液与1ml含5×107成纤维细胞的溶液、1ml的浓缩生长因子、1ml的富血小板纤维蛋白以及2ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合，用生理盐水补充至50ml。脂肪干细胞：脂肪组织在人体内储量丰富，通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞(ADSCs)，脂肪干细胞有自我更新增殖及多向分化潜能，可向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞等分化，而且可分泌多种促血管生成因子。成纤维细胞：以前一直认为成纤维细胞是人体的终末体细胞，但近年来随着细胞生物学的快速发展，研究者专利技术成纤维细胞在不同微环境下可分化成不同的成体细胞，如：脂肪细胞、心肌细胞、巨噬细胞、软骨细胞等。成纤维细胞起源于胚胎中胚层的间充质细胞，是疏松结缔组织的主要细胞成分。成纤维细胞体外培养能够合成纤维蛋白、黏连蛋白、胶原蛋白等蛋白质，以及胶原纤维、弹性纤维、网状纤维等细胞外基质。成纤维细胞与脂肪干细胞共同起源于中胚层间质细胞，而且成纤维细胞能表达CD29、CD44、CD71、CD73等脂肪干细胞的标志物，并在特定条件下能形成脂肪组织。浓缩生长因子：即CGF，主要由各种生长因子和纤维蛋白凝胶组成。这些生长因子主要分布在血浆和血小板中，血小板在制备过程中因变速离心而被大量激活，释放出各类生长因子，这一类生长因子包括：血管内皮生长因子(VEGF)、类胰岛素生长因子(IGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)等。CGF还具有结构为三维聚合物的网络纤维蛋白结构，生长因子诱导组织修复与再生过程中有了一个可靠的支架，可以使得大量干细胞在支架上附着并进行增殖与分化。CGF最常被用于骨缺损修复，如修补牙等。富血小板纤维蛋白：即Platelet-RichFabrin(PRF)是一种区别于传统富血小板血浆(Platelet-richplasma)技术的富含细胞因子和生长因子的新一代血小板浓缩物，其结构类似于天然血凝块，可以借助细胞因子的调节作用以及纤维蛋白的支架作用进行组织修复。间充质干细胞分泌的外泌体：即MSC外泌体，其富含多种胞外基质蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生长因子。在临床上，干细胞外泌体主要治疗烧伤、烫伤、皮肤溃疡，再生健康皮肤；在护肤方面，主要是对外伤受损、衰老中毒皮肤进行修复。有益效果1、本专利技术实施例中的胸部脂肪填充用干细胞组合物中，使用了CGF、PRF和MSC外泌体以促进机体干细胞存活和生长。CGF和PRF除了具有生长因子、细胞因子外，还具有网络状纤维蛋白凝胶结构，可以作为脂肪干细胞和成纤维细胞存活和生长的支架，而CGF和PRF本身具有的生长因子、细胞因子又可以促进支架上的干细胞存活和生长。MSC外泌体因其包含多种物质，可以促进机体干细胞存活和生长。2、CGF在胸部脂肪填充领域鲜有报道，本专利技术实施例中通过将CGF与脂肪干细胞、成纤维细胞、PRF和MSC外泌体组合使用，并通过调节各组分的比例，获得了优良的效果。将这五种成分注射入胸部后，术后瘢痕更小、胸部增大的效果更明显且均匀性更好、移植注射后保持情况本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：包括以下组分：脂肪干细胞、成纤维细胞、浓缩生长因子、富血小板纤维蛋白以及间充质干细胞分泌的外泌体，其中：每1ml含(1-10)×10

【技术特征摘要】
1.一种胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：包括以下组分：脂肪干细胞、成纤维细胞、浓缩生长因子、富血小板纤维蛋白以及间充质干细胞分泌的外泌体，其中：每1ml含(1-10)×107脂肪干细胞的溶液与0.5-2ml含(1-10)×107成纤维细胞的溶液、1-2ml的浓缩生长因子、0.5-2ml的富血小板纤维蛋白、以及1-3ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合。


2.根据权利要求1所述的胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：每1ml含5×107脂肪干细胞的溶液与1ml含5×107成纤维细胞的溶液、1ml的浓缩生长因子、1ml的富血小板纤维蛋白以及2ml的间充质干细胞分泌的外泌体混合。


3.根据权利要求1所述的胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：含脂肪干细胞的溶液与含成纤维细胞的溶液中，所用溶剂均为生理盐水。


4.根据权利要求1所述的胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：浓缩生长因子的制备方法包括以下步骤：
将装有血液、不添加抗凝剂的采血管放置到离心机中，进行差速离心，所述差速离心的程序为：加速30秒；2700转/分钟离心2分钟；2400转/分钟离心4min；2700转/分钟离心4分钟；3000转/分钟离心3分钟；减速33s，离心后血液样品分三层：取中间层黄色部分为浓缩生长因子。


5.根据权利要求1所述的胸部脂肪填充用干细胞组合物，其特征在于：富血小板纤维蛋白的制备方法包括以下步骤：
将装有血液、不添加抗凝素的采血管放置到离心机中，3000转/分钟离心10分钟；离心后血液分成3层，取中间层为富含血小板的纤维蛋白凝胶...

【专利技术属性】
技术研发人员：亓爱杰，李少波，马宏磊，亓爱磊，
申请(专利权)人：北京诺赛启研再生医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11