一种呋喃磺酸类化合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种呋喃磺酸类化合物，通式如式I所示：

【技术实现步骤摘要】
一种呋喃磺酸类化合物及其制备方法与应用
本专利技术属于医药
，具体地说，涉及一种从地龙中分离得到的呋喃磺酸类化合物及其制备方法，以及该类化合物在抗血栓及抗血小板聚集的药物中的应用。
技术介绍
中药地龙为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretimaaspergillum(E.Perrier)、通俗环毛蚓PheretimavulgarisChen、威廉环毛蚓Pheretimaguillelmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓PheretimapectiniferaMichaelsen的干燥体。前一种习称“广地龙”，后三种习称“沪地龙”，是我国民间传统动物药之一，具有清热定惊、通络、平喘、利尿的功效。李时珍在《本草纲目》称其在通经活络、活血化瘀、预防治疗心脑血管疾病作用方面具有较好的疗效，在临床上的应用表明其可以有效降压降脂、抗凝血、抗血栓、镇痛消炎，并在治疗神经系统疾病如脑血栓、中风等引起的脑损伤中发挥重要作用。根据文献报道，地龙主要包含氨基酸、蛋白质、甾体、核苷、呋喃磺酸和磷脂等成分，主要生物活性成分是地龙素、氨基酸、蚓激酶、蚯蚓纤溶酶等。2015版《中国药典》仅以氨基酸为对照品开展鉴别，尚无含量测定项。目前，呋喃磺酸类化合物在自然界中仅是地龙才有的一种代谢物，存在于地龙肠道前端部分，可能是肠道的表面活性剂。其作用在于不影响蚓激酶活性的前提下，减少多酚类物质经过肠道产生的可溶性蛋白沉淀，帮助地龙在高多酚土壤环境下的生存(MLiebeke,N.Strittmatter,S.Fearn,etal.,Uniquemetabolitesprotectearthwormsagainstplantpolyphenols,NatureCommunications6(2015)7869)，因此，推测该类成分具有潜在的溶解蛋白大分子，即溶栓活性。日本在1988年公开了从地龙中分离2-乙基-5-己基呋喃-3-磺酸成药的专利(专利公开号为JP63005088A)，公开了地龙中2-乙基-5-己基呋喃-3-磺酸的分离制备工艺方法及抗血小板聚集作用。目前，尚无文献具体报导从地龙中分离纯化得到呋喃磺酸类化合物，也尚未见该类化合物在抗血栓及抗血小板聚集的药理作用的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种呋喃磺酸类化合物。本专利技术的第二个目的是提供一种所述呋喃磺酸类化合物的制备方法。本专利技术的第三个目的是提供一种所述呋喃磺酸类化合物在制备抗血栓或抗血小板聚集的药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术的第一个方面是提供了一种呋喃磺酸类化合物，通式如式I所示：其中，R1、R2、R3各自独立的选自氢、羟基、甲氧基，R1、R2、R3不同时为氢。优选的，所述呋喃磺酸类化合物为以下结构中的一种：化合物Pha-2*：R1＝H，R2＝OH，R3＝H；化合物Pha-3*：R1＝OCH3，R2＝H，R3＝H；化合物Pha-4*：R1＝H，R2＝OCH3，R3＝H；化合物Pha-5*：R1＝OH，R2＝OH，R3＝H；化合物Pha-6*：R1＝OCH3，R2＝OH，R3＝H；化合物Pha-7*/8*：R1＝OH，R2＝OCH3，R3＝H；化合物Pha-9*：R1＝OCH3，R2＝OCH3，R3＝H；化合物Pha-10*：R1＝OCH3，R2＝H，R3＝OCH3。所述呋喃磺酸类化合物是从地龙提取物中分离制备得到。本专利技术的第二个方面提供了一种所述呋喃磺酸类化合物的制备方法，包括以下步骤：将地龙干燥体剪碎后用亲水性溶剂浸泡提取，过滤、减压蒸馏，得到浸膏，用有机溶剂萃取，得到有机相部分，经硅胶柱层析，洗脱液减压浓缩后获得粗品I、II、III、IV；取粗品II和III进行凝胶色谱分离，以甲醇-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到8个组分记为Fr.1-Fr.8；经LC-MS跟踪，发现Fr.4为主要收集部位，记为粗品Fr.4V；取粗品Fr.4V硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用30％-75％的乙腈-水溶液进行洗脱，流速为30mL/min，经LC-MS跟踪将40％-50％段收集液经减压蒸馏浓缩得粗品，将粗品硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用36％乙腈-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到5个组分记为Fr.4V-1-Fr.4V-5，其中Fr.4V-3通过HPLC制备色谱(21.2×250mm，5μm)，其中流速1mL/min，进样量40μL，流动相35％-40％乙腈-水溶液，检测波长为210nm，收集保留时间为16.25min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-2，收集保留时间为17.50min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-3，收集保留时间为19.17min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-4；经LC-MS跟踪，发现Fr.5为主要收集部位，记为粗品Fr.5V；取粗品Fr.5V硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用30％-75％的乙腈-水溶液进行洗脱，流速为30mL/min，经LC-MS跟踪将50％-60％段收集液经减压蒸馏浓缩得粗品；将粗品硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用50％乙腈-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到7个组分记为Fr.5V-1-Fr.5V-7，其中Fr.5V-3及Fr.5V-4通过HPLC制备色谱(21.2×250mm，5μm)，其中流速1mL/min，进样量40μL，流动相30％-35％乙腈-水溶液，检测波长为210nm，收集保留时间为13.23min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-5，收集保留时间为14.20min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-6，收集保留时间为15.10min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-7，收集保留时间为16.45min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-8；经LC-MS跟踪，发现Fr.6为主要收集部位，记为粗品Fr.6V；取粗品Fr.6V硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用30％-75％的乙腈-水溶液进行洗脱，流速为30mL/min，经LC-MS跟踪将60％-75％段收集液经减压蒸馏浓缩得粗品，将粗品硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用50％～70％乙腈-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到5个组分记为Fr.6V-1-Fr.6V-5，其中Fr.6V-4及Fr.6V-5通过HPLC制备色谱(21.2×250mm，5μm)，其中流速1mL/min，进样量40μL，流动相45％-50％乙腈-水溶液，检测波长为210nm，收集保留时间为17.15min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-9，收集保留时间为18.35min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-10。所述地龙干燥体为参环毛蚓干燥体、通俗环毛蚓干燥体、威廉环毛蚓干燥体或栉盲环毛蚓干燥体中的至少一种。所述亲水性溶剂为甲醇、乙醇，优选乙醇。所述地龙干燥体溶于亲水性溶剂的浓度为0.15～0.3g/mL，优选为0.2g/mL。...

【技术保护点】
1.一种呋喃磺酸类化合物，其特征在于，通式如式I所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种呋喃磺酸类化合物，其特征在于，通式如式I所示：



其中，R1、R2、R3各自独立的选自氢、羟基、甲氧基，R1、R2、R3不同时为氢。


2.根据权利要求1所述的呋喃磺酸类化合物，其特征在于，所述呋喃磺酸类化合物为以下结构中的一种：
化合物Pha-2*：R1＝H，R2＝OH，R3＝H；
化合物Pha-3*：R1＝OCH3，R2＝H，R3＝H；
化合物Pha-4*：R1＝H，R2＝OCH3，R3＝H；
化合物Pha-5*：R1＝OH，R2＝OH，R3＝H；
化合物Pha-6*：R1＝OCH3，R2＝OH，R3＝H；
化合物Pha-7*/8*：R1＝OH，R2＝OCH3，R3＝H；
化合物Pha-9*：R1＝OCH3，R2＝OCH3，R3＝H；
化合物Pha-10*：R1＝OCH3，R2＝H，R3＝OCH3。


3.根据权利要求2所述的呋喃磺酸类化合物，其特征在于，所述呋喃磺酸类化合物是从地龙提取物中分离制备得到。


4.一种权利要求1至3任一项所述的呋喃磺酸类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将地龙干燥体剪碎后用亲水性溶剂浸泡提取，过滤、减压蒸馏，得到浸膏，用有机溶剂萃取，得到有机相部分，经硅胶柱层析，洗脱液减压浓缩后获得粗品I、II、III、IV；取粗品II和III进行凝胶色谱分离，以甲醇-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到8个组分记为Fr.1-Fr.8；
经LC-MS跟踪，发现Fr.4为主要收集部位，记为粗品Fr.4V；取粗品Fr.4V硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用30％-75％的乙腈-水溶液进行洗脱，流速为30mL/min，经LC-MS跟踪将40％-50％段收集液经减压蒸馏浓缩得粗品，将粗品硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用36％乙腈-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到5个组分记为Fr.4V-1-Fr.4V-5，其中Fr.4V-3通过HPLC制备色谱，其中流速1mL/min，进样量40μL，流动相35％-40％乙腈-水溶液，检测波长为210nm，收集保留时间为16.25min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-2，收集保留时间为17.50min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-3，收集保留时间为19.17min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-4；
经LC-MS跟踪，发现Fr.5为主要收集部位，记为粗品Fr.5V；取粗品Fr.5V硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用30％-75％的乙腈-水溶液进行洗脱，流速为30mL/min，经LC-MS跟踪将50％-60％段收集液经减压蒸馏浓缩得粗品；将粗品硅胶拌样，经干燥后装入反相C18中压色谱柱，用50％乙腈-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到7个组分记为Fr.5V-1-Fr.5V-7，其中Fr.5V-3及Fr.5V-4通过HPLC制备色谱，其中流速1mL/min，进样量40μL，流动相30％-35％乙腈-水溶液，检测波长为210nm，收集保留时间为13.23min的洗脱液浓缩得到化合物Pha-5，收集保留时间为14.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卫东，叶霁，李慧梁，程桃芳，武志立，苏日鑫，张榆浩，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：上海;31