重组多肽及其使用方法技术

本公开提供了重组多肽、编码重组多肽的核酸以及使用这些多肽和/或核酸在有此需要的受试者中增强或诱导免疫应答的方法。本公开还提供了通过将公开的多肽和/或核酸施用于有此需要的受试者来治疗细胞增殖性病症、诸如癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】重组多肽及其使用方法序列表本申请含有已经经由EFS-Web以ASCII格式提交且在此以其整体通过引用并入的序列表。所述ASCII拷贝，在2017年11月21日创建，名为IMHC-001/F01US_ST25.txt，并且大小为42KB。专利技术背景免疫原性细胞死亡是细胞死亡或凋亡的一种形式。与传统的凋亡(其主要是非免疫原性的)不同，癌细胞中的免疫原性细胞死亡可以通过活化树突细胞来诱导有效的抗肿瘤免疫应答。凋亡前状态被定义为活化胱天蛋白酶3/7之前的状态，即细胞凋亡的表现。免疫原性细胞死亡的特征在于在死亡中的细胞表面上的凋亡前损伤相关分子模式(DAMP)的表达。存在三种在免疫原性细胞死亡期间暴露于细胞表面的重要的凋亡前DAMP：钙网蛋白(CRT)、HSP70和HSP90。这三种凋亡前DAMP信号通过经由HSP70和HSP90的CRT和树突细胞成熟/活化在树突细胞募集和细胞吞噬作用中起重要作用，产生有效的抗肿瘤免疫应答。化学疗法和放射疗法的选择形式可以诱导附带的免疫原性细胞死亡。尽管这些疗法可以诱导三种凋亡前DAMP信号中的一种或两种，但它们不诱导所有三种凋亡前DAMP信号的表达。此外，化学疗法和放射疗法是免疫抑制疗法，其减少淋巴细胞的数目，并且还引起对周围非肿瘤细胞的附带损害，分别导致不良的抗肿瘤免疫应答以及不良事件。需要这样的组合物，其通过诱导所有三种凋亡前DAMP信号的表达来以增加的效率和效力来诱导免疫原性细胞死亡，同时使副作用最小化。本公开解决了该需求。专利技术概述本公开提供了酸性重组多肽。本公开提供了重组多肽，其包含选自SEQIDNO:1-16的氨基酸序列或与SEQIDNO:1-16的氨基酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成。在一个方面，所述重组多肽包含选自SEQIDNO:1-8的氨基酸序列或与SEQIDNO:1-8的氨基酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成。在一个方面，所述重组多肽包含选自SEQIDNO:9-16的氨基酸序列或与SEQIDNO:9-16的氨基酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成。在一个优选方面，所述重组多肽包含SEQIDNO:9的氨基酸序列或与SEQIDNO:9的氨基酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成。在一个方面，所述重组多肽包含选自SEQIDNO:1-16的氨基酸序列或与SEQIDNO:1-16的氨基酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成，所述重组多肽是如通过pI确定的酸性重组多肽。在一个方面，所述重组多肽的pI低于SEQIDNO:1-16的pI。在一个方面，天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)和亮氨酸(L)各自独立地以大于或等于所述重组多肽序列内存在的任何其他氨基酸残基的量的量存在。在一个方面，所述酸性重组多肽的氨基酸序列包含天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)和亮氨酸(L)，作为所述氨基酸序列内的三种最丰富的残基或丰度大于或等于所述酸性重组多肽的下一最丰富的氨基酸残基。本公开还提供了编码本文公开的重组多肽中的任一种的核酸分子。在一个方面，所述核酸分子编码SEQIDNO:1-16的重组多肽。在一个方面，所述核酸分子包含SEQIDNO:17-32的核酸序列或与SEQIDNO:17-32的核酸序列中的任一种具有至少约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%同一性的核酸序列，基本上由其组成，或由其组成。本公开还提供了包含本文公开的核酸中的任一种的表达载体或质粒。本公开还提供了包含本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种的宿主细胞。本公开还提供了包含本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种和药学上可接受的载体的药物组合物。在一个方面，所述药学上可接受的载体包含缓冲溶液，其包含浓度为约0.4M至约1.0M的NaCl，pH为约7.5至约9.0。本公开提供了增强或诱导有此需要的受试者中的免疫应答的方法，其包括向所述受试者施用本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种。本专利技术提供了增强或诱导有此需要的受试者中的免疫应答的方法，其包括向所述受试者施用包含本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种的药物组合物。在一个方面，所述免疫应答是通过免疫原性细胞死亡。在一个方面，所述免疫原性细胞死亡包括内源性树突细胞活化。在一个方面，所述细胞具有凋亡前损伤相关分子模式(DAMP)信号的增加表达，所述凋亡前损伤相关分子模式(DAMP)信号包括钙网蛋白(CRT)、热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90(HSP90)或其组合。在一个方面，所述细胞是癌细胞。在一个方面，所述癌细胞选自肺癌、结肠癌或乳腺癌细胞。本公开提供了增强或诱导有此需要的受试者中的细胞表面上的疾病相关抗原的内源性呈递的方法，其包括向所述受试者施用本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种。本公开提供了增强或诱导有此需要的受试者中的细胞表面上的疾病相关抗原的内源性呈递的方法，其包括向所述受试者施用包含本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种的药物组合物。在一个方面，所述细胞是癌细胞。在一个方面，所述癌细胞选自肺癌、结肠癌或乳腺癌细胞。本公开提供了治疗、预防或减轻有此需要的受试者中的细胞增殖性病症的至少一种症状的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种。本公开提供了治疗、预防或减轻有此需要的受试者中的细胞增殖性病症的至少一种症状的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的包含本文公开的重组多肽和/或核酸中的任一种的药物组合物。在一个方面，所述细胞增殖性病症是癌症。在一个方面，所述癌症选自肺癌、结肠癌或乳腺癌。本公开还提供了试剂盒，其包含用于进行本文公开的任何方法的本文公开的组合物。任何上述方面可以与任何其他方面组合。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.重组多肽，其包含与SEQ ID NO:1的多肽具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，其中/ni. 所述重组多肽是酸性的，如通过等电点(pI)所确定；/nii. 所述重组多肽的pI低于SEQ ID NO:1的pI；且/niii. 天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸各自独立地以大于或等于所述重组多肽序列内存在的任何其他氨基酸残基的量的量存在。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.重组多肽，其包含与SEQIDNO:1的多肽具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，其中
i.所述重组多肽是酸性的，如通过等电点(pI)所确定；
ii.所述重组多肽的pI低于SEQIDNO:1的pI；且
iii.天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸各自独立地以大于或等于所述重组多肽序列内存在的任何其他氨基酸残基的量的量存在。


2.重组多肽，其包含SEQIDNO:9的氨基酸序列。


3.权利要求1的重组多肽，其中所述重组多肽包含与SEQIDNO:9的重组多肽具有至少99%序列同一性的氨基酸序列。


4.药物组合物，其包含权利要求2的重组多肽和药学上可接受的载体。


5.权利要求4的药物组合物，其中最终NaCl浓度为0.4M-1.0M，且所述药学上可接受的载体包含pH7.5-9.0的缓冲溶液。


6.核酸，其编码权利要求2的重组多肽。


7.表达载体，其包含权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：YH陈，TL林，
申请(专利权)人：免疫实验室私人有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG