一种新的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白１６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白１６的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。碳代谢副产物阻遏蛋白(CCR4)是一种生物体内普遍存在的转录调控蛋白，通过在体内形成多亚基复合物，它可以影响很多基因的表达。研究发现，尽管CCR4并不结合于DNA，但它在与非正常的DNA结合功能域结合后可以刺激转录过程。与其他转录调节因子相比，CCR4是受葡萄糖调节的。在两个转录调控功能域中，一个是葡萄糖相关的，它包含有一个富含谷氨酸盐-脯氨酸的结构区，这与很多真核生物中发现的转录因子所含有的结构区十分相似。研究发现，如CCR4缺少了亮氨酸重复结构和C末端，则其两个转录调控功能域不能组成有功能的CCR4。因此，亮氨酸重复结构和C末端对于连接两个转录调控功能域形成完整的CCR4有关键作用。(Mol Cell Biol 1994Jul；14(7):4522-31)有进一步的研究结果显示，CCR4所含的亮氨酸重复结构除了对形成完整的CCR4有作用外，还对CCR4与其相关蛋白相互结合作用有重要作用。(Mol Cell Biol1994 Jul；14(7):4522-31)；(Genetics 1992 Dec；132(4):951-62)酵母的CCR4蛋白是一些非发酵生长的调控基因(如葡萄糖-抑制乙醇脱氢酶ADH2等)表达过程中不可缺少的一种蛋白，并且也是SPT6和SPT10突变基因的校正基因，而SPT6和SPT10对于保持染色质的稳定性有作用。(Mol Cell Biol 1994Jul；14(7):4522-31)免疫沉淀反应的结果表明，CCR4可以与至少4种蛋白形成复合物而起作用。(Mol Cell Biol 1994 Jul；14(7):4522-31)CCR4相关蛋白——CAF1(POP2)是CCR4复合物的一种组成蛋白，它的同源蛋白在很多生物体内已有发现，比如人，线虫，爪蟾，鼠，酵母等等。CCR4相关蛋白(CAF1)在生物体内的主要功能是调控转录过程。CCR4相关蛋白(CAF1)的具体结构请参阅相关文献。(Mol Cell Biol 1995 Jul；15(7):3487-95)尽管对CCR4相关蛋白的结构和功能的研究还不是十分清楚，但根据已有的研究，我们已经知道CCR4相关蛋白的部分功能。CCR4通过形成多亚基复合物，可以影响很多酵母中的基因的表达。细胞周期调节激酶(DBF2)在细胞有丝分裂末期向G1期过度的过程中有重要作用，DBF2与CCR4以及CAF-1/POP2共同形成复合物，在细胞周期的基因表达和后来的有丝分裂的基因转录过程中有重要作用。(EMBO J 1997 Sep 1；16(17):5289-98)人的B细胞移位蛋白(BTG1)是一种肿瘤抑制因子，因为其过度表达抑制了NIH 3T3细胞的增殖。碳代谢副产物阻遏蛋白(CCR4)的结合因子(hCAF-1)，是同源于鼠的CAF-1，酿酒酵母的CAF-1/POP2的。在体外，hCAF-1/BTG1复合物的形成依赖于BTG1(Ser-159)的p34cdc2激酶位点的磷酸化。hCAF-1/BTG1复合物对于细胞分裂和细胞增殖有重要且明显的调控作用。(Biochem J 1998 Dec 1；336(Pt 2):471-81)；(Wilcox,Scott,Subramanian,Ross,Adams-Burton,Stoltenborg and Corjay(1995)Circulation 92,I34-I35)通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本专利技术的多肽的表达谱与人CCR4相关蛋白31的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16。由于如上所述人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中84-371位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-502位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白16表达异本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人碳代谢副产物阻遏蛋白相关蛋白１６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]